TBE buffer (original) (raw)
Disolución tampón formada por Tris, borato y EDTA, de uso frecuente en electroforesis, en especial en gel de agarosa para separar ácidos nucleicos. * El Tris es la molécula responsable del tamponamiento (regulación del pH). * El borato contribuye a ajustar el pH deseado e igualmente a mantenerlo. * El EDTA es un quelante de cationes divalentes cuya función es secuestrar el Mg2+, con lo que se evita que las posibles nucleasas presentes degraden los ácidos nucleicos de la muestra (la mayoría de las nucleasas requieren Mg2+ como cofactor).
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| dbo:abstract | El TBE, o Tris/Borat/EDTA, és una solució tampó que conté una mescla de base Tris, àcid bòric i EDTA. En biologia molecular, els tampons TBE i TAE s'empren normalment en processos en què s'utilitzen àcids nucleics, el més comuns dels quals és l'electroforesi. Les solucions Tris-àcid són efectius per a condicions lleugerament bàsiques, que mantenen l'ADN desprotonat i soluble en aigua. L'EDTA és un de cations divalents, particularment del magnesi (Mg2+). Com que aquests ions són co-factors necessaris per a molts enzims, incloent-hi les nucleases contaminants, el paper de l'EDTA és el de protegir els àcids nucleics contra la degradació enzimàtica. Però com que el magnesi també és un cofactor per a molts enzims útils de modificació de l'ADN, com els enzims de restricció i les polimerases de l'ADN, la seva concentració als tampons TBE i el TAE normalment es manté baixa (típicament al voltant d'1 ). També existeixen substituts per al TBE i el TAE a l'electroforesi, descoberts més recentment. (ca) TBE-Puffer ist die Abkürzung für TRIS-Borat-EDTA-Puffer, ein nach seinen Bestandteilen * TRIS (Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan), * Borat (Anion der Borsäure) und * EDTA (Ethylendiamintetraessigsäure) benannter Elektrophoresepuffer. TBE-Puffer werden u. a. bei der Agarose-Gelelektrophorese eingesetzt. Dabei variiert die Konzentration des eingesetzten Puffers von Labor zur Labor. In der Regel kommen dabei 0,5-fach oder 1-fach konzentrierter TBE-Puffer zum Einsatz. Die TRIS- und Borsäure-Konzentrationen sind meistens beide gleich und bei einem einfach konzentrierten TBE-Puffer zwischen 50 und 90 millimolar. Die EDTA-Konzentration liegt zwischen 1 und 2 mM. Der pH-Wert wird meistens auf einen Wert zwischen 8 und 8,9 eingestellt. Für die Herstellung eines TBE-Puffers (1-fach) pH 8,0 werden z. B. 10,8 g (89 mM) TRIS Base, 5,5 g (89 mM) Borsäure und 0,7 g (2 mM) EDTA-Na2 mit destilliertem (entmineralisiertem) Wasser auf 1000 ml aufgefüllt. Alternativ verwendete Elektrophoresepuffer sind z. B. der TAE-Puffer, der TPE-Puffer, SB-Puffer und der LB-Puffer. Im Vergleich zu TAE-Puffern besitzt TBE-Puffer eine höhere Pufferkapazität. Jedoch neigt er auch zu stärkerem Erhitzen, wodurch etwas niedrigere Spannungen an das Gel angelegt werden müssen. Die Wanderungsgeschwindigkeit ist etwa halb so hoch wie bei TAE-Puffer. Konzentrierte Stammlösungen von TBE-Puffern neigen zum Ausfallen des Tris-Borats, wodurch inhomogene Pufferzusammensetzungen entstehen können. (de) Disolución tampón formada por Tris, borato y EDTA, de uso frecuente en electroforesis, en especial en gel de agarosa para separar ácidos nucleicos. * El Tris es la molécula responsable del tamponamiento (regulación del pH). * El borato contribuye a ajustar el pH deseado e igualmente a mantenerlo. * El EDTA es un quelante de cationes divalentes cuya función es secuestrar el Mg2+, con lo que se evita que las posibles nucleasas presentes degraden los ácidos nucleicos de la muestra (la mayoría de las nucleasas requieren Mg2+ como cofactor). (es) Le Tampon TBE (pour Tris, Borate, EDTA) est un tampon de migration utilisé en électrophorèse et composé de Tris, d'acide borique et d'EDTA. (fr) TBE or Tris/Borate/EDTA, is a buffer solution containing a mixture of Tris base, boric acid and EDTA. In molecular biology, TBE and TAE buffers are often used in procedures involving nucleic acids, the most common being electrophoresis. Tris-acid solutions are effective buffers for slightly basic conditions, which keep DNA deprotonated and soluble in water. EDTA is a chelator of divalent cations, particularly of magnesium (Mg2+). As these ions are necessary co-factors for many enzymes, including contaminant nucleases, the role of the EDTA is to protect the nucleic acids against enzymatic degradation. But since Mg2+ is also a co-factor for many useful DNA-modifying enzymes such as restriction enzymes and DNA polymerases, its concentration in TBE or TAE buffers is generally kept low (typically at around 1 mM). More recently discovered substitutes for TBE and TAE buffers for electrophoresis are available. (en) Il buffer TBE è una soluzione tampone usata nella preparazione di gel elettroforetici di agarosio per la separazione di frammenti di DNA risultanti dall'amplificazione di PCR, da protocolli di purificazione e da esperimenti di clonaggio. È composto da una soluzione di Tris-borato-EDTA, e l'EDTA sequestra i cationi bivalenti. Il buffer TBE è particolarmente utile nella separazione di piccoli frammenti di DNA (peso molecolare < 1000), ad esempio piccoli prodotti risultanti dalla digestione con enzimi di restrizione. Il TBE ha una migliore capacità tamponante e fornisce una più accurata risoluzione del buffer TAE.Il TBE è generalmente più costoso del TAE e inibisce la DNA ligasi che può causare problemi nel caso si volesse procedere con la purificazione o la ligazione del DNA. (it) TBE ou Tris/Borato/EDTA, é uma solução tampão contendo uma mistura de base T (Tris), ácido Bórico e EDTA. Em biologia molecular, tampões TBE e TAE são frequentemente usados em procedimentos envolvendo ácidos nucleicos, a mais comum sendo a eletroforese. As soluções Tris-ácidas são tampões eficientes para condições levemente básicas, as quais mantém o DNA deprotonado e solúvel em água. EDTA é um quelante de cátions divalentes, particularmente de magnésio (Mg2+). Como estes íons são necessariamente co-fatores para muitas enzimas, incluindo nucleases contaminantes, o papel do EDTA é proteger os ácidos nucleicos contra a degradação enzimática. Mas desde que Mg2+ é também um co-fator para muitas enzimas de modificação do DNA tais como enzimas de restrição e polimerases de DNA, sua concentração nos tampões TBE ou TAE é geralmente mantida baixa (tipicamente em torno de 1 mM). OBS: Nunca use água tratada com (dietilpirocarbonato) para o preparo de soluções contendo Tris. (pt) Трис-боратний буфер (англ. Tris/Borate/EDTA, TBE) — буферний розчин, що містить трис-(гідроксиметил)-амінометан (трис), борну кислоту й етилендіамінтетраоцтову кислоту з pH близько 8 або трохи вище,. (uk) TBE或Tris/Borate/EDTA，是一種緩衝液，含有三羥甲基氨基甲烷（Tris）、硼酸，和EDTA。 在分子生物學上，TBE和經常用於溶解核酸，最常見於電泳實驗。由於Tris類的緩衝液皆呈弱鹼性，因此可將DNA脫除氫離子而有帶電性，更容易溶於水中。EDTA則是一種雙價陽離子螯合劑，特別是對鎂離子（Mg2+）。由於核酸酶需要這些離子，EDTA可以將這些離子牢牢抓住，避免核酸降解。但要注意的是，鎂離子同時是很多酵素的輔助因子，如限制酶、DNA聚合酶等等，因此EDTA的濃度一般不會太高（通常在1mM左右）。 近期研究顯示，TBE和TAE在電泳中是可以互相置換的。 (zh) |
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| rdfs:comment | Disolución tampón formada por Tris, borato y EDTA, de uso frecuente en electroforesis, en especial en gel de agarosa para separar ácidos nucleicos. * El Tris es la molécula responsable del tamponamiento (regulación del pH). * El borato contribuye a ajustar el pH deseado e igualmente a mantenerlo. * El EDTA es un quelante de cationes divalentes cuya función es secuestrar el Mg2+, con lo que se evita que las posibles nucleasas presentes degraden los ácidos nucleicos de la muestra (la mayoría de las nucleasas requieren Mg2+ como cofactor). (es) Le Tampon TBE (pour Tris, Borate, EDTA) est un tampon de migration utilisé en électrophorèse et composé de Tris, d'acide borique et d'EDTA. (fr) Трис-боратний буфер (англ. Tris/Borate/EDTA, TBE) — буферний розчин, що містить трис-(гідроксиметил)-амінометан (трис), борну кислоту й етилендіамінтетраоцтову кислоту з pH близько 8 або трохи вище,. (uk) TBE或Tris/Borate/EDTA，是一種緩衝液，含有三羥甲基氨基甲烷（Tris）、硼酸，和EDTA。 在分子生物學上，TBE和經常用於溶解核酸，最常見於電泳實驗。由於Tris類的緩衝液皆呈弱鹼性，因此可將DNA脫除氫離子而有帶電性，更容易溶於水中。EDTA則是一種雙價陽離子螯合劑，特別是對鎂離子（Mg2+）。由於核酸酶需要這些離子，EDTA可以將這些離子牢牢抓住，避免核酸降解。但要注意的是，鎂離子同時是很多酵素的輔助因子，如限制酶、DNA聚合酶等等，因此EDTA的濃度一般不會太高（通常在1mM左右）。 近期研究顯示，TBE和TAE在電泳中是可以互相置換的。 (zh) El TBE, o Tris/Borat/EDTA, és una solució tampó que conté una mescla de base Tris, àcid bòric i EDTA. En biologia molecular, els tampons TBE i TAE s'empren normalment en processos en què s'utilitzen àcids nucleics, el més comuns dels quals és l'electroforesi. Les solucions Tris-àcid són efectius per a condicions lleugerament bàsiques, que mantenen l'ADN desprotonat i soluble en aigua. L'EDTA és un de cations divalents, particularment del magnesi (Mg2+). Com que aquests ions són co-factors necessaris per a molts enzims, incloent-hi les nucleases contaminants, el paper de l'EDTA és el de protegir els àcids nucleics contra la degradació enzimàtica. Però com que el magnesi també és un cofactor per a molts enzims útils de modificació de l'ADN, com els enzims de restricció i les polimerases de (ca) TBE-Puffer ist die Abkürzung für TRIS-Borat-EDTA-Puffer, ein nach seinen Bestandteilen * TRIS (Tris-(hydroxymethyl)-aminomethan), * Borat (Anion der Borsäure) und * EDTA (Ethylendiamintetraessigsäure) Für die Herstellung eines TBE-Puffers (1-fach) pH 8,0 werden z. B. 10,8 g (89 mM) TRIS Base, 5,5 g (89 mM) Borsäure und 0,7 g (2 mM) EDTA-Na2 mit destilliertem (entmineralisiertem) Wasser auf 1000 ml aufgefüllt. (de) TBE or Tris/Borate/EDTA, is a buffer solution containing a mixture of Tris base, boric acid and EDTA. In molecular biology, TBE and TAE buffers are often used in procedures involving nucleic acids, the most common being electrophoresis. Tris-acid solutions are effective buffers for slightly basic conditions, which keep DNA deprotonated and soluble in water. EDTA is a chelator of divalent cations, particularly of magnesium (Mg2+). As these ions are necessary co-factors for many enzymes, including contaminant nucleases, the role of the EDTA is to protect the nucleic acids against enzymatic degradation. But since Mg2+ is also a co-factor for many useful DNA-modifying enzymes such as restriction enzymes and DNA polymerases, its concentration in TBE or TAE buffers is generally kept low (typical (en) Il buffer TBE è una soluzione tampone usata nella preparazione di gel elettroforetici di agarosio per la separazione di frammenti di DNA risultanti dall'amplificazione di PCR, da protocolli di purificazione e da esperimenti di clonaggio. È composto da una soluzione di Tris-borato-EDTA, e l'EDTA sequestra i cationi bivalenti. Il buffer TBE è particolarmente utile nella separazione di piccoli frammenti di DNA (peso molecolare < 1000), ad esempio piccoli prodotti risultanti dalla digestione con enzimi di restrizione. (it) TBE ou Tris/Borato/EDTA, é uma solução tampão contendo uma mistura de base T (Tris), ácido Bórico e EDTA. Em biologia molecular, tampões TBE e TAE são frequentemente usados em procedimentos envolvendo ácidos nucleicos, a mais comum sendo a eletroforese. As soluções Tris-ácidas são tampões eficientes para condições levemente básicas, as quais mantém o DNA deprotonado e solúvel em água. EDTA é um quelante de cátions divalentes, particularmente de magnésio (Mg2+). Como estes íons são necessariamente co-fatores para muitas enzimas, incluindo nucleases contaminantes, o papel do EDTA é proteger os ácidos nucleicos contra a degradação enzimática. Mas desde que Mg2+ é também um co-fator para muitas enzimas de modificação do DNA tais como enzimas de restrição e polimerases de DNA, sua concentração (pt) |
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