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En biochimie, l’acide 5,10-méthylènetétrahydrofolique est un dérivé de l'acide folique, ou vitamine B9. Sa forme biologiquement active est la forme ionique (déprotonée) de l'acide, le 5,10-méthylènetétrahydrofolate, couramment abrégé en 5,10-CH2-THF, substrat de la (MTHFR) pour former l'ion 5-méthyltétrahydrofolate (5-MTHF). Le 5,10-CH2-THF peut également intervenir comme coenzyme dans la biosynthèse de la thymidine. Plus précisément, c'est le donneur de groupes monocarbonés dans les réactions catalysées par la thymidylate synthase et la .

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