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Conference Presentations by Buitrago Serna

La histoplasmosis es una enfermedad de humanos y otros mamíferos causada por el hongo dimórfico H... more La histoplasmosis es una enfermedad de humanos y otros mamíferos causada por el hongo dimórfico Histoplasma capsulatum. Aparece naturalmente como un saprófito del suelo en áreas relativamente cálidas y húmedas. Su desarrollo se potencia mediante material orgánico apropiado como las heces de aves o murciélagos. La infección ocurre por inhalación de las esporas, que son fácilmente suspendidas en el aire al mover depósitos fecales secos, habiendo muchos casos en América de contagio de espeleólogos y otras personas que frecuentaban cuevas y minas con colonias de murciélagos [1]. No es posible el contagio directo entre personas.[2]
En 2013 un biólogo especializado en murciélagos sufrió durante muchos meses distintos síntomas parecidos a neumonías partiendo de una sensación parecida al asma que no respondía ante antihistamínicos. Sus dos hijos también presentaron en un momento dado síntomas de neumonía por lo que se barajó la posibilidad de una tuberculosis contagiada entre la familia, que se descartó mediante los análisis correspondientes.
España es considerada como zona libre de histoplasmosis, pero el hongo se supone de distribución cosmopolita [3]. Los datos sobre presencia en Europa son escasos y muy dudosos. No se ha dado histoplasmosis entre espeleólogos ibéricos, pero en el sujeto afectado se daba el caso de que todas las expediciones a cuevas se hacían precisamente a las zonas con murciélagos, donde se permanecía durante el trabajo con éstos animales.
El conocimiento de un artículo de una revista sin revisores que afirmaba haber encontrado H. capsulatum en una cueva de la provincia de Málaga [4] en la que también había estado el biólogo animó a salir de dudas y se analizó la presencia de anticuerpos en sangre con resultado negativo.
El análisis de muestras de guano y suelos implica un laboratorio de bioseguridad de nivel 3, lo que complica mucho el estudio de éste hongo. Nuestros resultados de anticuerpos ayudan sugiriendo la ausencia de H. capsulatum en guano de murciélagos en Andalucía y la dificultad de contraer aquí histoplasmosis en estos casos teóricos de riesgo.

Agradecimientos: A la Biblioteca Mundial de Murciélagos de Ginebra por la facilitación de bibliografía. La detección de anticuerpos se hizo en el Centro Nacional de Microbiología.

Referencias:
[1] Denny G. Constantine. Health Precautions for Bat Researchers. In “Ecological and Behavioral Methods for the Study of Bats”. T.H. Kunz ed. (Smithsonian Institution Press, 1988).
[2] Buitrago, M.J. & M. Cuenca-Estrella. 2011. Epidemiología actual y diagnóstico de laboratorio de las micosis endémicas en España. Enferm Infecc Microbiol Clin. Doi:10.1016/j.eimc.2011.09.014
[3] http://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/causes.html
[4] Jose Luis Fernández, “Hongo Encontrado por el G.E.V. en la Cueva de Yeso III (Antequera, Málaga”. Espeleo nº 21, Bio-Espeleo, 54-55, 2009. Pictures of the fungus:http://micologia.mcnetworks.org/forums/Missatge.asp?MIId=301379

Papers by Buitrago Serna

Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2005

The role of Aspergillus fumigatus 14α-sterol demethylase (Cyp51A) in azole drug susceptibility wa... more The role of Aspergillus fumigatus 14α-sterol demethylase (Cyp51A) in azole drug susceptibility was assessed. Targeted disruption of cyp51A in azole-susceptible and -resistant strains decreased MICs from 2- to 40-fold. The cyp51A mutants were morphologically indistinguishable from the wild-type strain, retaining the ability to cause pulmonary disease in neutropenic mice.

La presente invention concerne une methode de detection simultanee d'ADN d' Histoplasma c... more La presente invention concerne une methode de detection simultanee d'ADN d' Histoplasma capsulatum et de Paracoccidioides brasiliensis au moyen de la technique de PCR multiplex quantitative en temps reel, basee sur des sondes specifiques marquees avec deux fluorophores differents. Cette technique peut etre appliquee tant a des echantillons biologiques qu'a des cultures microbiologiques et a des echantillons environnementaux. L'invention concerne egalement une trousse permettant de detecter les deux micro-organismes de maniere simultanee.

Revista Iberoamericana de Micología, 2013

Background: A multicenter study was conducted. A panel containing DNA from Histoplasma capsulatum... more Background: A multicenter study was conducted. A panel containing DNA from Histoplasma capsulatum, as well as negative and cross-reaction controls, was sent to five different laboratories, members of the MICOMOL network from CYTED Program. Aims: The objective was to assess the accuracy of different PCR protocols to detect H. capsulatum DNA. Methods: Seven different PCR protocols were tested. They were based on PCR techniques and used unicopy and multicopy targets. Results: Most of these protocols (4/7) were able to detect the smallest amounts of fungal DNA (10 2 fg/l). Overall sensitivity was 86% and specificity was 100%. The protocol based on a unicopy target (SCAR 220) presented lower sensitivity (43%) but 100% specificity. The real-time protocols tested were highly reproducible, sensitive, and specific. Neither false positives nor cross-reactions were detected in any protocol. Conclusions: All laboratories were able to amplify H. capsulatum DNA, and real-time PCR seems to be a promising tool to efficiently detect this pathogen in clinical samples.

Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica, 2007

toward preventing and responding to bioterrorist threats and acts. As a whole, these measures are... more toward preventing and responding to bioterrorist threats and acts. As a whole, these measures are known as biodefense. This article briefly analyzes several aspects related to detecting and identifying acts of bioterrorism, and considers the biological agents that are implicated. The microbiological diagnosis that allows identification of the causal agent, a key point for taking suitable control measures, is also included.

Diagnostic Microbiology and Infectious Disease, 2014

Objectives Coccidioidomycosis is endemic in the southwestern United States and Latin America. Alt... more Objectives Coccidioidomycosis is endemic in the southwestern United States and Latin America. Although primary disease is selflimited, coccidioidomycosis also presents with disseminated disease, especially in immunocompromised patients. Early diagnosis of coccidioidomycosis is difficult, as most clinical signs are non-specific, and cultures often negative. Moreover, serology may be also negative, especially early after infection or not indicative of acute infection. Thus, the development of molecular methods for early diagnosis is needed. The aim of this study was the development of a Real-Time PCR assay for the early diagnosis of coccidioidomycosis, and validation of the assay in a murine model of disseminated infection.

Revista Iberoamericana de Micología, 2016

Background: Fungal infections have been commonly diagnosed in individuals with advanced HIV disea... more Background: Fungal infections have been commonly diagnosed in individuals with advanced HIV disease. Cryptococcosis, pneumocystosis, and histoplasmosis are the most frequent systemic mycoses in people suffering from HIV/AIDS. Case report: We report a case of multiple fungal infections in an advanced AIDS-patient. A 33-year-old HIV-positive man from Brazil was hospitalized due to diarrhea, dyspnea, emaciation, hypoxemia, extensive oral thrush, and a CD4+ T lymphocyte count of 20 cells/mm 3. Honeycombed-structures consistent with Pneumocystis jirovecii were observed by direct immunofluorescence in induced sputum. Cryptococcus neoformans was recovered from respiratory secretion and cerebrospinal fluid cultures. Histopathology of the bone marrow also revealed the presence of Histoplasma capsulatum. Molecular assays were performed in a sputum sample. Nested-PCR confirmed the presence of P. jirovecii and H. capsulatum; qPCR multiplex was positive for C. neoformans and H. capsulatum. With the treatment of antifungal drugs the patient progressed satisfactorily. Conclusions: The diagnosis of several systemic mycoses demonstrates the vulnerability of advanced AIDSpatients. Thus, the detection of AIDS cases in the early stages of infection is necessary for a prompt and adequate introduction of HAART therapy, and the use of prophylaxis to control opportunistic infections.

Enfermedades Infecciosas Y Microbiologia Clinica, 2007

El bioterrorismo y el uso potencial de armas biológicas se ha convertido en una preocupación impo... more El bioterrorismo y el uso potencial de armas biológicas se ha convertido en una preocupación importante de los gobiernos y autoridades competentes. Como ejemplo, el envío de cartas con esporas del agente causante del carbunco en Estados Unidos en 2001 ocasionó varias muertes, causó pánico y tuvo repercusiones negativas en la economía mundial. Si este incidente, a pequeña escala, produjo semejante impacto, los efectos de un ataque masivo podrían ser catastróficos. En muchos países éste fue el punto que marcó el inicio de la toma de medidas encaminadas a prevenir y responder ante amenazas yactos bioterroristas, acciones que, en su conjunto, se conocen como biodefensa. Este artículo pretende analizar someramente algunos aspectos relacionados con la detección e identificación de este tipo de acciones y los agentes biológicos implicados. Se considera el diagnóstico microbiológico que permite la identificación del agente causal, punto clave para la toma de medidas de control adecuadas.Bio...