Fernanda Stanisçuaski - Academia.edu (original) (raw)

Papers by Fernanda Stanisçuaski

Research paper thumbnail of Bias against parents in science hits women harder

Research paper thumbnail of Maternity in the Brazilian CV Lattes: when will it become a reality?

Anais da Academia Brasileira de Ciências

Despite the increasing attention on the causes generating the observed gender gap in science and ... more Despite the increasing attention on the causes generating the observed gender gap in science and the efforts in resolving it, women are still underrepresented in academia, especially in STEM (science, technology, engineering, and mathematics) fi elds (Shauman 2017). This scenario is also observed in Brazil (Barros & Mourão 2020, Areas et al. 2020). Many factors can contribute to the observed gender gap in science, but maternity is certainly playing an important role (Sallee et al. 2016). Maternity leave, which in Brazil ranges from four to six months, often leads to a decrease in productivity, affecting women competitiveness for a few years after the birth of a child (Machado et al. 2019). For this reason, funding agencies and universities should consider maternity leave as a career break and create strategies to circumvent its negative effect in the evaluations of researchers' productivity.

Research paper thumbnail of Simpósio Brasileiro Sobre Maternidade e Ciência: Um Marco Nacional Na Luta Pela Equidade De Gênero Na Academia

Anais do III Simpósio Brasileiro sobre Maternidade e Ciência - III SCMC-PIS

Research paper thumbnail of Parent in Science

Research paper thumbnail of Editais que incluem a maternidade

Research paper thumbnail of Diferenças no processamento proteolítico de urease vegetal entre ninfas e adultos de Dysdercus peruvianus (hemíptera : Pyrrhocoridae)

Research paper thumbnail of Gender, race and parenthood impact academic productivity during the COVID-19 pandemic: from survey to action

While the Coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic is altering academia dynamics, those juggl... more While the Coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic is altering academia dynamics, those juggling remote work and domestic demands – including childcare - have already felt the impacts on productivity. Female authors are facing a decrease in papers submission rates since the beginning of the pandemic period. The reasons for this decline in women productivity need to be further investigated. Here we show the influence of gender, parenthood and race in academics productivity during the pandemic period, based on a survey answered by 3,345 Brazilian academics from various knowledge areas and research institutions. Findings revealed that male academics - especially childless ones - were the least affected group, whereas female academics, especially Black women and mothers, were the most impacted group. This scenario will leave long-term effects on the career progression of the most affected groups. The results presented here are crucial for the development of actions and policies that...

Research paper thumbnail of The 100,000 most influential scientists rank: the underrepresentation of Brazilian women in academia

Despite the progress observed in recent years, women are still underrepresented in science worldw... more Despite the progress observed in recent years, women are still underrepresented in science worldwide, especially at top positions. Many factors contribute to women progressively leaving academia at different stages of their career, including motherhood, harassment and conscious and unconscious discrimination. Implicit bias plays a major negative role in recognition, promotions and career advancement of female scientists. Recently, a rank on the most influential scientists in the world was created based on several metrics, including the number of published papers and citations. Here, we analyzed the representation of Brazilian scientists in this rank, focusing on gender. Female Brazilian scientists are greatly underrepresented in the rank (11% in the Top 100,000; 18% in the Top 2%). Male scientists have more self-citation than female scientists and positions in the rank varied when self-citations were included, suggesting that self-citation by male scientists increases their visibili...

Research paper thumbnail of Jaburetox, a urease‐derived peptide: Effects on enzymatic pathways of the cockroach Nauphoeta cinerea

Archives of Insect Biochemistry and Physiology, 2020

Jaburetox is a recombinant peptide derived from one of the Canavalia ensiformis urease isoforms. ... more Jaburetox is a recombinant peptide derived from one of the Canavalia ensiformis urease isoforms. This peptide induces several toxic effects on insects of different orders, including interference on muscle contractility in cockroaches, modulation of UDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylase (UAP) and nitric oxide synthase (NOS) activities in the central nervous system of triatomines, as well as activation of the immune system in Rhodnius prolixus. When injected, the peptide is lethal for R. prolixus and Triatoma infestans. Here, we evaluated Jaburetox toxicity to Nauphoeta cinerea cockroaches, exploring the effects on the central nervous system through the activities of UAP, NOS, acid phosphatases (ACP), and acetylcholinesterase (AChE). The results indicated that N. cinerea is not susceptible to the lethal effect of the peptide. Moreover, both in vivo and in vitro treatments with Jaburetox inhibited NOS activity, without modifying the protein levels. No alterations on ACP activity were observed. In addition, the enzyme activity of UAP only had its activity affected at 18 hr after injection. The peptide increased the AChE activity, suggesting a mechanism involved in overcoming the toxic effects. In conclusion, our findings indicate that Jaburetox affects the nitrinergic signaling as well as the AChE and UAP activities and establishes N. cinerea as a Jaburetox-resistant model for future comparative studies.

Research paper thumbnail of Impact of COVID-19 on academic mothers

Research paper thumbnail of The role of extracellular nucleic acids in the immune system modulation of Rhodnius prolixus (Hemiptera: Reduviidae)

Pesticide Biochemistry and Physiology, 2020

This is a PDF file of an article that has undergone enhancements after acceptance, such as the ad... more This is a PDF file of an article that has undergone enhancements after acceptance, such as the addition of a cover page and metadata, and formatting for readability, but it is not yet the definitive version of record. This version will undergo additional copyediting, typesetting and review before it is published in its final form, but we are providing this version to give early visibility of the article. Please note that, during the production process, errors may be discovered which could affect the content, and all legal disclaimers that apply to the journal pertain.

Research paper thumbnail of Risk assessment of the antifungal and insecticidal peptide Jaburetox and its parental protein the Jack bean (Canavalia ensiformis) urease

Food and Chemical Toxicology, 2019

This is a PDF file of an article that has undergone enhancements after acceptance, such as the ad... more This is a PDF file of an article that has undergone enhancements after acceptance, such as the addition of a cover page and metadata, and formatting for readability, but it is not yet the definitive version of record. This version will undergo additional copyediting, typesetting and review before it is published in its final form, but we are providing this version to give early visibility of the article. Please note that, during the production process, errors may be discovered which could affect the content, and all legal disclaimers that apply to the journal pertain.

Research paper thumbnail of Actions developed by the Brazilian Physiological Society to promote women’s participation in science

Advances in Physiology Education, 2019

Here we described two activities related to Women in Science: one main conference and one symposi... more Here we described two activities related to Women in Science: one main conference and one symposium, both developed during the Annual Congress of the Brazilian Physiological Society, which were held within the XXXIII Annual Meeting of the Federation of Brazilian Experimental Biology Societies, from September 3–6, 2018, in Campos do Jordão (SP/Brazil). This conference and the symposium were among the most popular activities of the congress. This is important because the activities addressed important issues, including the fact that only 29% of the worlds’ researchers are women, and women have difficulty progressing in a scientific career. Our report discusses why and which strategies could change this reality. We believe this symposium has not only contributed to advance and bring insights to physiological sciences, but, more importantly, it inspired and motivated physiologists to think about gender balance and the contribution and participation of women in physiological science.

Research paper thumbnail of {"__content__"=>"The Impact of Urease upon Platelets and Consequent Contributions to Inflammation.", "i"=>{"__content__"=>"Helicobacter pylori"}}

Frontiers in microbiology, 2017

Gastric infection by is considered a risk factor for gastric and duodenal cancer, and extragastri... more Gastric infection by is considered a risk factor for gastric and duodenal cancer, and extragastric diseases. Previous data have shown that, in a non-enzymatic way, urease (HPU) activates neutrophils to produce ROS and also induces platelet aggregation, requiring ADP secretion modulated by the 12-lipoxygenase pathway, a signaling cascade also triggered by the physiological agonist collagen. Here we investigated further the effects on platelets of recombinant versions of the holoenzyme HPU, and of its two subunits (HpUreA and HpUreB). Although HpUreA had no aggregating activity on platelets, it partially inhibited collagen-induced aggregation. HpUreB induced platelet aggregation in the nanomolar range, and also interfered dose-dependently on both collagen- and ADP-induced platelet aggregation. HPU-induced platelet aggregation was inhibited by antibodies against glycoprotein VI (GPVI), the main collagen receptor in platelets. Flow cytometry analysis revealed exposure of P-selectin in H...

Research paper thumbnail of Jaburetox-induced toxic effects on the hemocytes of Rhodnius prolixus (Hemiptera: Reduviidae)

Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology, 2017

Jaburetox-induced toxic effects on the hemocytes of Rhodnius prolixus

Research paper thumbnail of Jaburetox affects gene expression and enzyme activities in Rhodnius prolixus, a Chagas' disease vector

Acta tropica, 2017

Jaburetox, a recombinant peptide of ∼11kDa derived from one of the Canavalia ensiformis (Jack Bea... more Jaburetox, a recombinant peptide of ∼11kDa derived from one of the Canavalia ensiformis (Jack Bean) urease isoforms, is toxic and lethal to insects belonging to different orders when administered orally or via injection. Previous findings indicated that Jaburetox acts on insects in a complex fashion, inhibiting diuresis and the transmembrane potential of Malpighian tubules, interfering with muscle contractility and affecting the immune system. In vitro, Jaburetox forms ionic channels and alters permeability of artificial lipid membranes. Moreover, recent data suggested that the central nervous system (CNS) is a target organ for ureases and Jaburetox. In this work, we employed biochemical, molecular and cellular approaches to explore the mode of action of Jaburetox using Rhodnius prolixus, one of the main Chagas' disease vectors, as experimental model. In vitro incubations with fluorescently labeled Jaburetox indicated a high affinity of the peptide for the CNS but not for saliva...

Research paper thumbnail of Ureases de Canavalia ensiformis : processamento e mecanismo de ação em insetos

Ureases (E.C. 3.5.1.5) são metaloenzimas distribuídas em plantas, fungos e bactérias. As duas iso... more Ureases (E.C. 3.5.1.5) são metaloenzimas distribuídas em plantas, fungos e bactérias. As duas isoformas de ureases de Canavalia ensiformis (canatoxina - CNTX e urease do feijão de porco - JBU) são altamente tóxicas para insetos de diferentes ordens. A toxicidade dessas proteínas é dependente da liberação de um fragmento de cerca de 10 kDa a partir da proteína nativa. Essa liberação se dá por ação das enzimas digestivas cisteínicas e aspárticas (tipo catepsina B e D) presentes no trato digestivo de algumas ordens de insetos. Ureases não são tóxicas para insetos com digestão baseada em enzimas serínicas (tipo tripsina). Esse peptídeo de 10 kDa foi isolado e caracterizado, recebendo o nome de Pepcanatox. Um peptídeo recombinante, equivalente ao Pepcanatox, foi expresso em Escherichia coli e chamado Jaburetox 2Ec. Jaburetox 2Ec é tóxico, por via oral, para ninfas de Dysdercus peruvianus e, por injeção toráxica, para ninfas de Rhodnius prolixus e ninfas e adultos de Triatoma infestans. CNTX e JBU, dados por via oral, são tóxicos para ninfas de D. peruvianus e R. prolixus, mas não são tóxicas para as formas adultas desses insetos.O processamento de CNTX e JBU por enzimas de ninfas e adultos de D. peruvianus mostraram um perfil distinto, podendo ser esse diferencial o responsável pela falta de efeito tóxico observado em adultos. Usando Callosobruchus maculatus como modelo, as enzimas responsáveis pelo processamento das ureases foram investigadas. Usando Callosobruchus maculatus como modelo, as enzimas responsáveis pelo processamento das ureases foram investigadas. A purificação parcial das enzimas de C. maculatus por gel-filtração resultou em uma fração (Pico B) capaz de liberar um peptídeo de aproximadamente 10 kDa a partir de CNTX e JBU. A atividade proteolítica do Pico B é completamente inibida por Pep-A e parcialmente inibida por E-64, indicando a presença de aspártico (majoritária) e cisteíno proteases. Observamos que tanto E-64 (inibidor de cisteíno proteinases) quanto Pepstatina-A (inibidor de aspártico proteinases) diminuem a formação do peptídeo entomotóxico pelo Pico B, sugerindo que cisteíno e aspártico proteases estão envolvidas nesse processo.O mecanismo de ação em insetos das ureases, assim como dos peptídeos derivados, ainda não é conhecido. Um efeito observado in vivo é a diminuição da taxa de perda de peso de R. prolixus após a alimentação com ureases, indicando uma possível alteração no sistema excretório. Para avaliar o efeito das ureases e de Jaburetox 2Ec na secreção de R. prolixus, realizamos ensaios de secreção de fluídos pelos túbulos de Malpighi isolados, assim como ensaios de contrações dos intestinos anterior e posterior e vaso dorsal. JBU e Jaburetox 2Ec inibem a secreção de fluídos por túbulos de Malpighi isolados, de maneira dose dependente. CNTX também tem efeito antidiurético, enquando a urease de Helicobacter pylori (HPU) não causa nenhuma alteração na secreção dos túbulos de Malpighi. Jaburetox 2Ec, mas não JBU, causa um aumento dos níveis de GMPc nos túbulos sendo esse o segundo mensageiro de sua ação.Metabólitos de eicosanóides e cálcio (intra e extracelular) influenciam a ação de JBU, mas não de Jaburetox 2Ec. Ensaios de potencial transepitelial realizados com túbulos de Malpighi indicaram que Jaburetox 2Ec, mas não JBU, alteram a ação de uma H+-ATPase presente na membrana dos túbulos, causando um desequilíbrio no transporte iônico e, como consequência, alteração na secreção de fluídos. Os dados obtidos não mostram que JBU e Jaburetox 2Ec desencadeiam rotas distintas nos túbulos de Malpighi, ambos culminando em antidiurese. Assim como nos túbulos de Malpighi, JBU diminui o transporte de fluídos pelo epitélio do estômago de R. prolixus. Jaburetox 2Ec e JBU causam um aumento na frequência de contrações do estômago estimuladas por serotonina. No intestino posterior, observamos que JBU também causa um aumento na frequência e amplitude das contrações, e mudança no tônus basal do tecido. No vaso dorsal, nenhuma alteração significativa nas contrações foram observadas. Também avaliamos por microscopia o efeito da alimentação com JBU na liberação de serotonina, hormônio envolvido em diversos processos fisiológicos. Não observamos nenhuma alteração significativa na liberação desse hormônio a partir das células do sistema nervoso, assim como nos órgãos controlados por serotonina. A liberação de fragmento(s) entomotóxico(s) a partir de ureases vegetais, assim como o mecanismo de ação dessas ureases e fragmentos, são processosbastante complexos. Nessa tese tivemos êxito em caracterizar várias etapas desses processos, esclarecendo pontos chaves e levantando evidências para guiar trabalhos futuros.Ureases (E.C. 3.5.1.5) are metalloenzymes widespread in plants, fungi and bacteria. Two isoforms of Canavalia ensiformis urease, (canatoxin - CNTX and jack bean urease – JBU), are toxic to insects from different orders. The toxicity of these proteins is due to the release of a 10 kDa peptide from…

Research paper thumbnail of Caracterização parcial das enzimas digestivas de ninfas de Dysdercus peruvianus, um Hemiptera susceptível a canatoxina

A canatoxina (CNTX) é uma proteína tóxica presente nas sementes de Canavalia ensiformis, que é le... more A canatoxina (CNTX) é uma proteína tóxica presente nas sementes de Canavalia ensiformis, que é letal para mamíferos por via intraperitoneal, mas inócua se administrada oralmente. Um papel defensivo da CNTX em C. ensiformis foi proposto uma vez que a proteína também é letal quando ingerida por insetos que apresentam catepsinas digestivas capazes de ativar proteoliticamente a CNTX. Nenhum efeito foi observado em insetos com enzimas digestivas do tipo tripsina. Neste trabalho nós estudamos os efeitos entomotóxicos da CNTX sobre ninfas de terceiro estágio de Dysdercus peruvianus (Hemiptera: Pyrrhocoridae), uma praga do algodão, e caracterizamos parcialmente as enzimas digestivas presentes no intestino. Ninfas de terceiro estágio foram alimentadas com sementes artificiais contendo CNTX em diferentes concentrações (0.003% e 0.01% p/p) e acompanhadas por 20 dias. Verificou-se uma mortalidade de 80% para ninfas alimentadas com 0.003% de CNTX e 90% para as alimentadas com 0.01%, indicando que o efeito é dose-dependente. Os ensaios enzimáticos foram feitos com homogenatos de intestino de ninfas de terceiro estágio em um intervalo de pH 2.6-9.0, utilizando-se caseína como substrato. O efeito de inibidores/ativadores foi ensaiado sobre esta atividade caseinolítica. Observou-se inibição por E-64 e Pepstatina-A, na faixa de pH 3.0-5.0. Também foi observada estimulação da atividade caseinolítica por cisteína, principalmente em pH 4.6. Tais resultados indicam a presença de cisteíno e aspártico-proteinases no intestino de ninfas de Dysdercus peruvianus, as quais podem ser responsáveis pela ativação proteolítica da CNTX neste inseto, como já descrito para outro Hemiptera, Rhodnius prolixus, e também para o bruquídeo Callosobruchus maculatus. Financiado por: CNPq e PRONEX.

Research paper thumbnail of Estudos morfológicos do trato digestório de formas jovens de Dysdercus peruvianus (Hemiptera; Pirrhocoridae) : efeitos da ingestão de Canatoxina

Research paper thumbnail of Atividade entomotóxica de canatoxina em insetos modelos : Nezara viridula (Hemiptera) E. Spodoptera frugiperda (Lepidoptera)

A canatoxina (CNTX) é uma proteína tóxica presente nas sementes de Canavalia ensiformis que promo... more A canatoxina (CNTX) é uma proteína tóxica presente nas sementes de Canavalia ensiformis que promove convulsões e morte em mamíferos quando injetada intraperitonealmente. Um papel defensivo da CNTX em C. ensiformis foi proposto uma vez que a proteína também é letal quando ingerida por insetos que apresentam catepsinas digestivas capazes de ativar proteoliticamente a CNTX. Nenhum efeito foi observado em insetos com enzimas digestivas do tipo tripsina. Neste trabalho nós estudamos os efeitos entomotóxicos da CNTX sobre Nezara viridula (percevejo-verde da soja) e Spodoptera frugiperda (lagarta-do-cartucho do milho, também uma praga da soja). Ninfas (2 º instar) de N. viridula foram alimentadas com soluções contendo CNTX em diferentes concentrações em intervalos de 24h. A ingestão de CNTX a [0.182] A280 promoveu uma letalidade de ~65% em 72h e a [0.6] A280 promoveu 100% de letalidade em 48h. Quando foi oferecida dieta normal aos insetos após a ingestão de CNTX, a mortalidade foi significativamente reduzida. Surpreendentemente (por se tratar de um Lepidoptero), uma única dose de CNTX a [0.082] A280 adicionada a dieta de Spodoptera frugiperda resultou em um acentuado efeito tóxico em larvas de 3 º instar, com redução do peso e morte das larvas. Homogenatos de intestino mostraram um pH de ~6.3 para N. viridula e ~6.5 para S. frugiperda. Atividade proteásica do homogenato de S. frugiperda foi ensaiada sobre N-t-Boc-Gly-Arg-Arg-7-MCA com um pH ótimo de 8.0. Esta atividade foi inibida por cisteína e p-HMB em concentrações milimolares. Leupeptina (100µM) também mostrou ser um ótimo inibidor, enquanto E-64 (100µM) e Cistatina (1µM), inibidores clássico de tiol-proteinases, não mostraram nenhum efeito. CNPq, PRONEX.

Research paper thumbnail of Bias against parents in science hits women harder

Research paper thumbnail of Maternity in the Brazilian CV Lattes: when will it become a reality?

Anais da Academia Brasileira de Ciências

Despite the increasing attention on the causes generating the observed gender gap in science and ... more Despite the increasing attention on the causes generating the observed gender gap in science and the efforts in resolving it, women are still underrepresented in academia, especially in STEM (science, technology, engineering, and mathematics) fi elds (Shauman 2017). This scenario is also observed in Brazil (Barros & Mourão 2020, Areas et al. 2020). Many factors can contribute to the observed gender gap in science, but maternity is certainly playing an important role (Sallee et al. 2016). Maternity leave, which in Brazil ranges from four to six months, often leads to a decrease in productivity, affecting women competitiveness for a few years after the birth of a child (Machado et al. 2019). For this reason, funding agencies and universities should consider maternity leave as a career break and create strategies to circumvent its negative effect in the evaluations of researchers' productivity.

Research paper thumbnail of Simpósio Brasileiro Sobre Maternidade e Ciência: Um Marco Nacional Na Luta Pela Equidade De Gênero Na Academia

Anais do III Simpósio Brasileiro sobre Maternidade e Ciência - III SCMC-PIS

Research paper thumbnail of Parent in Science

Research paper thumbnail of Editais que incluem a maternidade

Research paper thumbnail of Diferenças no processamento proteolítico de urease vegetal entre ninfas e adultos de Dysdercus peruvianus (hemíptera : Pyrrhocoridae)

Research paper thumbnail of Gender, race and parenthood impact academic productivity during the COVID-19 pandemic: from survey to action

While the Coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic is altering academia dynamics, those juggl... more While the Coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic is altering academia dynamics, those juggling remote work and domestic demands – including childcare - have already felt the impacts on productivity. Female authors are facing a decrease in papers submission rates since the beginning of the pandemic period. The reasons for this decline in women productivity need to be further investigated. Here we show the influence of gender, parenthood and race in academics productivity during the pandemic period, based on a survey answered by 3,345 Brazilian academics from various knowledge areas and research institutions. Findings revealed that male academics - especially childless ones - were the least affected group, whereas female academics, especially Black women and mothers, were the most impacted group. This scenario will leave long-term effects on the career progression of the most affected groups. The results presented here are crucial for the development of actions and policies that...

Research paper thumbnail of The 100,000 most influential scientists rank: the underrepresentation of Brazilian women in academia

Despite the progress observed in recent years, women are still underrepresented in science worldw... more Despite the progress observed in recent years, women are still underrepresented in science worldwide, especially at top positions. Many factors contribute to women progressively leaving academia at different stages of their career, including motherhood, harassment and conscious and unconscious discrimination. Implicit bias plays a major negative role in recognition, promotions and career advancement of female scientists. Recently, a rank on the most influential scientists in the world was created based on several metrics, including the number of published papers and citations. Here, we analyzed the representation of Brazilian scientists in this rank, focusing on gender. Female Brazilian scientists are greatly underrepresented in the rank (11% in the Top 100,000; 18% in the Top 2%). Male scientists have more self-citation than female scientists and positions in the rank varied when self-citations were included, suggesting that self-citation by male scientists increases their visibili...

Research paper thumbnail of Jaburetox, a urease‐derived peptide: Effects on enzymatic pathways of the cockroach Nauphoeta cinerea

Archives of Insect Biochemistry and Physiology, 2020

Jaburetox is a recombinant peptide derived from one of the Canavalia ensiformis urease isoforms. ... more Jaburetox is a recombinant peptide derived from one of the Canavalia ensiformis urease isoforms. This peptide induces several toxic effects on insects of different orders, including interference on muscle contractility in cockroaches, modulation of UDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylase (UAP) and nitric oxide synthase (NOS) activities in the central nervous system of triatomines, as well as activation of the immune system in Rhodnius prolixus. When injected, the peptide is lethal for R. prolixus and Triatoma infestans. Here, we evaluated Jaburetox toxicity to Nauphoeta cinerea cockroaches, exploring the effects on the central nervous system through the activities of UAP, NOS, acid phosphatases (ACP), and acetylcholinesterase (AChE). The results indicated that N. cinerea is not susceptible to the lethal effect of the peptide. Moreover, both in vivo and in vitro treatments with Jaburetox inhibited NOS activity, without modifying the protein levels. No alterations on ACP activity were observed. In addition, the enzyme activity of UAP only had its activity affected at 18 hr after injection. The peptide increased the AChE activity, suggesting a mechanism involved in overcoming the toxic effects. In conclusion, our findings indicate that Jaburetox affects the nitrinergic signaling as well as the AChE and UAP activities and establishes N. cinerea as a Jaburetox-resistant model for future comparative studies.

Research paper thumbnail of Impact of COVID-19 on academic mothers

Research paper thumbnail of The role of extracellular nucleic acids in the immune system modulation of Rhodnius prolixus (Hemiptera: Reduviidae)

Pesticide Biochemistry and Physiology, 2020

This is a PDF file of an article that has undergone enhancements after acceptance, such as the ad... more This is a PDF file of an article that has undergone enhancements after acceptance, such as the addition of a cover page and metadata, and formatting for readability, but it is not yet the definitive version of record. This version will undergo additional copyediting, typesetting and review before it is published in its final form, but we are providing this version to give early visibility of the article. Please note that, during the production process, errors may be discovered which could affect the content, and all legal disclaimers that apply to the journal pertain.

Research paper thumbnail of Risk assessment of the antifungal and insecticidal peptide Jaburetox and its parental protein the Jack bean (Canavalia ensiformis) urease

Food and Chemical Toxicology, 2019

This is a PDF file of an article that has undergone enhancements after acceptance, such as the ad... more This is a PDF file of an article that has undergone enhancements after acceptance, such as the addition of a cover page and metadata, and formatting for readability, but it is not yet the definitive version of record. This version will undergo additional copyediting, typesetting and review before it is published in its final form, but we are providing this version to give early visibility of the article. Please note that, during the production process, errors may be discovered which could affect the content, and all legal disclaimers that apply to the journal pertain.

Research paper thumbnail of Actions developed by the Brazilian Physiological Society to promote women’s participation in science

Advances in Physiology Education, 2019

Here we described two activities related to Women in Science: one main conference and one symposi... more Here we described two activities related to Women in Science: one main conference and one symposium, both developed during the Annual Congress of the Brazilian Physiological Society, which were held within the XXXIII Annual Meeting of the Federation of Brazilian Experimental Biology Societies, from September 3–6, 2018, in Campos do Jordão (SP/Brazil). This conference and the symposium were among the most popular activities of the congress. This is important because the activities addressed important issues, including the fact that only 29% of the worlds’ researchers are women, and women have difficulty progressing in a scientific career. Our report discusses why and which strategies could change this reality. We believe this symposium has not only contributed to advance and bring insights to physiological sciences, but, more importantly, it inspired and motivated physiologists to think about gender balance and the contribution and participation of women in physiological science.

Research paper thumbnail of {"__content__"=>"The Impact of Urease upon Platelets and Consequent Contributions to Inflammation.", "i"=>{"__content__"=>"Helicobacter pylori"}}

Frontiers in microbiology, 2017

Gastric infection by is considered a risk factor for gastric and duodenal cancer, and extragastri... more Gastric infection by is considered a risk factor for gastric and duodenal cancer, and extragastric diseases. Previous data have shown that, in a non-enzymatic way, urease (HPU) activates neutrophils to produce ROS and also induces platelet aggregation, requiring ADP secretion modulated by the 12-lipoxygenase pathway, a signaling cascade also triggered by the physiological agonist collagen. Here we investigated further the effects on platelets of recombinant versions of the holoenzyme HPU, and of its two subunits (HpUreA and HpUreB). Although HpUreA had no aggregating activity on platelets, it partially inhibited collagen-induced aggregation. HpUreB induced platelet aggregation in the nanomolar range, and also interfered dose-dependently on both collagen- and ADP-induced platelet aggregation. HPU-induced platelet aggregation was inhibited by antibodies against glycoprotein VI (GPVI), the main collagen receptor in platelets. Flow cytometry analysis revealed exposure of P-selectin in H...

Research paper thumbnail of Jaburetox-induced toxic effects on the hemocytes of Rhodnius prolixus (Hemiptera: Reduviidae)

Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology, 2017

Jaburetox-induced toxic effects on the hemocytes of Rhodnius prolixus

Research paper thumbnail of Jaburetox affects gene expression and enzyme activities in Rhodnius prolixus, a Chagas' disease vector

Acta tropica, 2017

Jaburetox, a recombinant peptide of ∼11kDa derived from one of the Canavalia ensiformis (Jack Bea... more Jaburetox, a recombinant peptide of ∼11kDa derived from one of the Canavalia ensiformis (Jack Bean) urease isoforms, is toxic and lethal to insects belonging to different orders when administered orally or via injection. Previous findings indicated that Jaburetox acts on insects in a complex fashion, inhibiting diuresis and the transmembrane potential of Malpighian tubules, interfering with muscle contractility and affecting the immune system. In vitro, Jaburetox forms ionic channels and alters permeability of artificial lipid membranes. Moreover, recent data suggested that the central nervous system (CNS) is a target organ for ureases and Jaburetox. In this work, we employed biochemical, molecular and cellular approaches to explore the mode of action of Jaburetox using Rhodnius prolixus, one of the main Chagas' disease vectors, as experimental model. In vitro incubations with fluorescently labeled Jaburetox indicated a high affinity of the peptide for the CNS but not for saliva...

Research paper thumbnail of Ureases de Canavalia ensiformis : processamento e mecanismo de ação em insetos

Ureases (E.C. 3.5.1.5) são metaloenzimas distribuídas em plantas, fungos e bactérias. As duas iso... more Ureases (E.C. 3.5.1.5) são metaloenzimas distribuídas em plantas, fungos e bactérias. As duas isoformas de ureases de Canavalia ensiformis (canatoxina - CNTX e urease do feijão de porco - JBU) são altamente tóxicas para insetos de diferentes ordens. A toxicidade dessas proteínas é dependente da liberação de um fragmento de cerca de 10 kDa a partir da proteína nativa. Essa liberação se dá por ação das enzimas digestivas cisteínicas e aspárticas (tipo catepsina B e D) presentes no trato digestivo de algumas ordens de insetos. Ureases não são tóxicas para insetos com digestão baseada em enzimas serínicas (tipo tripsina). Esse peptídeo de 10 kDa foi isolado e caracterizado, recebendo o nome de Pepcanatox. Um peptídeo recombinante, equivalente ao Pepcanatox, foi expresso em Escherichia coli e chamado Jaburetox 2Ec. Jaburetox 2Ec é tóxico, por via oral, para ninfas de Dysdercus peruvianus e, por injeção toráxica, para ninfas de Rhodnius prolixus e ninfas e adultos de Triatoma infestans. CNTX e JBU, dados por via oral, são tóxicos para ninfas de D. peruvianus e R. prolixus, mas não são tóxicas para as formas adultas desses insetos.O processamento de CNTX e JBU por enzimas de ninfas e adultos de D. peruvianus mostraram um perfil distinto, podendo ser esse diferencial o responsável pela falta de efeito tóxico observado em adultos. Usando Callosobruchus maculatus como modelo, as enzimas responsáveis pelo processamento das ureases foram investigadas. Usando Callosobruchus maculatus como modelo, as enzimas responsáveis pelo processamento das ureases foram investigadas. A purificação parcial das enzimas de C. maculatus por gel-filtração resultou em uma fração (Pico B) capaz de liberar um peptídeo de aproximadamente 10 kDa a partir de CNTX e JBU. A atividade proteolítica do Pico B é completamente inibida por Pep-A e parcialmente inibida por E-64, indicando a presença de aspártico (majoritária) e cisteíno proteases. Observamos que tanto E-64 (inibidor de cisteíno proteinases) quanto Pepstatina-A (inibidor de aspártico proteinases) diminuem a formação do peptídeo entomotóxico pelo Pico B, sugerindo que cisteíno e aspártico proteases estão envolvidas nesse processo.O mecanismo de ação em insetos das ureases, assim como dos peptídeos derivados, ainda não é conhecido. Um efeito observado in vivo é a diminuição da taxa de perda de peso de R. prolixus após a alimentação com ureases, indicando uma possível alteração no sistema excretório. Para avaliar o efeito das ureases e de Jaburetox 2Ec na secreção de R. prolixus, realizamos ensaios de secreção de fluídos pelos túbulos de Malpighi isolados, assim como ensaios de contrações dos intestinos anterior e posterior e vaso dorsal. JBU e Jaburetox 2Ec inibem a secreção de fluídos por túbulos de Malpighi isolados, de maneira dose dependente. CNTX também tem efeito antidiurético, enquando a urease de Helicobacter pylori (HPU) não causa nenhuma alteração na secreção dos túbulos de Malpighi. Jaburetox 2Ec, mas não JBU, causa um aumento dos níveis de GMPc nos túbulos sendo esse o segundo mensageiro de sua ação.Metabólitos de eicosanóides e cálcio (intra e extracelular) influenciam a ação de JBU, mas não de Jaburetox 2Ec. Ensaios de potencial transepitelial realizados com túbulos de Malpighi indicaram que Jaburetox 2Ec, mas não JBU, alteram a ação de uma H+-ATPase presente na membrana dos túbulos, causando um desequilíbrio no transporte iônico e, como consequência, alteração na secreção de fluídos. Os dados obtidos não mostram que JBU e Jaburetox 2Ec desencadeiam rotas distintas nos túbulos de Malpighi, ambos culminando em antidiurese. Assim como nos túbulos de Malpighi, JBU diminui o transporte de fluídos pelo epitélio do estômago de R. prolixus. Jaburetox 2Ec e JBU causam um aumento na frequência de contrações do estômago estimuladas por serotonina. No intestino posterior, observamos que JBU também causa um aumento na frequência e amplitude das contrações, e mudança no tônus basal do tecido. No vaso dorsal, nenhuma alteração significativa nas contrações foram observadas. Também avaliamos por microscopia o efeito da alimentação com JBU na liberação de serotonina, hormônio envolvido em diversos processos fisiológicos. Não observamos nenhuma alteração significativa na liberação desse hormônio a partir das células do sistema nervoso, assim como nos órgãos controlados por serotonina. A liberação de fragmento(s) entomotóxico(s) a partir de ureases vegetais, assim como o mecanismo de ação dessas ureases e fragmentos, são processosbastante complexos. Nessa tese tivemos êxito em caracterizar várias etapas desses processos, esclarecendo pontos chaves e levantando evidências para guiar trabalhos futuros.Ureases (E.C. 3.5.1.5) are metalloenzymes widespread in plants, fungi and bacteria. Two isoforms of Canavalia ensiformis urease, (canatoxin - CNTX and jack bean urease – JBU), are toxic to insects from different orders. The toxicity of these proteins is due to the release of a 10 kDa peptide from…

Research paper thumbnail of Caracterização parcial das enzimas digestivas de ninfas de Dysdercus peruvianus, um Hemiptera susceptível a canatoxina

A canatoxina (CNTX) é uma proteína tóxica presente nas sementes de Canavalia ensiformis, que é le... more A canatoxina (CNTX) é uma proteína tóxica presente nas sementes de Canavalia ensiformis, que é letal para mamíferos por via intraperitoneal, mas inócua se administrada oralmente. Um papel defensivo da CNTX em C. ensiformis foi proposto uma vez que a proteína também é letal quando ingerida por insetos que apresentam catepsinas digestivas capazes de ativar proteoliticamente a CNTX. Nenhum efeito foi observado em insetos com enzimas digestivas do tipo tripsina. Neste trabalho nós estudamos os efeitos entomotóxicos da CNTX sobre ninfas de terceiro estágio de Dysdercus peruvianus (Hemiptera: Pyrrhocoridae), uma praga do algodão, e caracterizamos parcialmente as enzimas digestivas presentes no intestino. Ninfas de terceiro estágio foram alimentadas com sementes artificiais contendo CNTX em diferentes concentrações (0.003% e 0.01% p/p) e acompanhadas por 20 dias. Verificou-se uma mortalidade de 80% para ninfas alimentadas com 0.003% de CNTX e 90% para as alimentadas com 0.01%, indicando que o efeito é dose-dependente. Os ensaios enzimáticos foram feitos com homogenatos de intestino de ninfas de terceiro estágio em um intervalo de pH 2.6-9.0, utilizando-se caseína como substrato. O efeito de inibidores/ativadores foi ensaiado sobre esta atividade caseinolítica. Observou-se inibição por E-64 e Pepstatina-A, na faixa de pH 3.0-5.0. Também foi observada estimulação da atividade caseinolítica por cisteína, principalmente em pH 4.6. Tais resultados indicam a presença de cisteíno e aspártico-proteinases no intestino de ninfas de Dysdercus peruvianus, as quais podem ser responsáveis pela ativação proteolítica da CNTX neste inseto, como já descrito para outro Hemiptera, Rhodnius prolixus, e também para o bruquídeo Callosobruchus maculatus. Financiado por: CNPq e PRONEX.

Research paper thumbnail of Estudos morfológicos do trato digestório de formas jovens de Dysdercus peruvianus (Hemiptera; Pirrhocoridae) : efeitos da ingestão de Canatoxina

Research paper thumbnail of Atividade entomotóxica de canatoxina em insetos modelos : Nezara viridula (Hemiptera) E. Spodoptera frugiperda (Lepidoptera)

A canatoxina (CNTX) é uma proteína tóxica presente nas sementes de Canavalia ensiformis que promo... more A canatoxina (CNTX) é uma proteína tóxica presente nas sementes de Canavalia ensiformis que promove convulsões e morte em mamíferos quando injetada intraperitonealmente. Um papel defensivo da CNTX em C. ensiformis foi proposto uma vez que a proteína também é letal quando ingerida por insetos que apresentam catepsinas digestivas capazes de ativar proteoliticamente a CNTX. Nenhum efeito foi observado em insetos com enzimas digestivas do tipo tripsina. Neste trabalho nós estudamos os efeitos entomotóxicos da CNTX sobre Nezara viridula (percevejo-verde da soja) e Spodoptera frugiperda (lagarta-do-cartucho do milho, também uma praga da soja). Ninfas (2 º instar) de N. viridula foram alimentadas com soluções contendo CNTX em diferentes concentrações em intervalos de 24h. A ingestão de CNTX a [0.182] A280 promoveu uma letalidade de ~65% em 72h e a [0.6] A280 promoveu 100% de letalidade em 48h. Quando foi oferecida dieta normal aos insetos após a ingestão de CNTX, a mortalidade foi significativamente reduzida. Surpreendentemente (por se tratar de um Lepidoptero), uma única dose de CNTX a [0.082] A280 adicionada a dieta de Spodoptera frugiperda resultou em um acentuado efeito tóxico em larvas de 3 º instar, com redução do peso e morte das larvas. Homogenatos de intestino mostraram um pH de ~6.3 para N. viridula e ~6.5 para S. frugiperda. Atividade proteásica do homogenato de S. frugiperda foi ensaiada sobre N-t-Boc-Gly-Arg-Arg-7-MCA com um pH ótimo de 8.0. Esta atividade foi inibida por cisteína e p-HMB em concentrações milimolares. Leupeptina (100µM) também mostrou ser um ótimo inibidor, enquanto E-64 (100µM) e Cistatina (1µM), inibidores clássico de tiol-proteinases, não mostraram nenhum efeito. CNPq, PRONEX.