Rubén Salvador-Clavell - Academia.edu (original) (raw)
Papers by Rubén Salvador-Clavell
International Journal of Molecular Sciences, Jan 10, 2024
This article is an open access article distributed under the terms and conditions of the Creative... more This article is an open access article distributed under the terms and conditions of the Creative Commons Attribution (CC BY
Stem Cells International, Mar 4, 2022
Bone tissue provides support and protection to different organs and tissues. Aging and different ... more Bone tissue provides support and protection to different organs and tissues. Aging and different diseases can cause a decrease in the rate of bone regeneration or incomplete healing; thus, tissue-engineered substitutes can be an acceptable alternative to traditional therapies. In the present work, we have developed an in vitro osteogenic differentiation model based on mesenchymal stem cells (MSCs), to first analyse the influence of the culture media and the origin of the cells on the efficiency of this process and secondly to extrapolate it to a 3D environment to evaluate its possible application in bone regeneration therapies. Two osteogenic culture media were used (one commercial from Stemcell Technologies and a second supplemented with dexamethasone, ascorbic acid, glycerol-2-phosphate, and BMP-2), with human cells of a mesenchymal phenotype from two different origins: adipose tissue (hADSCs) and dental pulp (hDPSCs). The expression of osteogenic markers in 2D cultures was evaluated in several culture periods by means of the immunofluorescence technique and real-time gene expression analysis, taking as reference MG-63 cells of osteogenic origin. The same strategy was extrapolated to a 3D environment of polylactic acid (PLA), with a 3% alginate hydrogel. The expression of osteogenic markers was detected in both hADSCs and hDPSCs, cultured in either 2D or 3D environments. However, the osteogenic differentiation of MSCs was obtained based on the culture medium and the cell origin used, since higher osteogenic marker levels were found when hADSCs were cultured with medium supplemented with BMP-2. Furthermore, the 3D culture used was suitable for cell survival and osteogenic induction.
Journal of Biomedical Materials Research Part A, Jul 5, 2016
Stem Cells International, 2022
Bone tissue provides support and protection to different organs and tissues. Aging and different ... more Bone tissue provides support and protection to different organs and tissues. Aging and different diseases can cause a decrease in the rate of bone regeneration or incomplete healing; thus, tissue-engineered substitutes can be an acceptable alternative to traditional therapies. In the present work, we have developed an in vitro osteogenic differentiation model based on mesenchymal stem cells (MSCs), to first analyse the influence of the culture media and the origin of the cells on the efficiency of this process and secondly to extrapolate it to a 3D environment to evaluate its possible application in bone regeneration therapies. Two osteogenic culture media were used (one commercial from Stemcell Technologies and a second supplemented with dexamethasone, ascorbic acid, glycerol-2-phosphate, and BMP-2), with human cells of a mesenchymal phenotype from two different origins: adipose tissue (hADSCs) and dental pulp (hDPSCs). The expression of osteogenic markers in 2D cultures was evalua...
[EN] Implant dentistry has become an important event for people. However, waiting times of proces... more [EN] Implant dentistry has become an important event for people. However, waiting times of processes associated witch this surgery are still long. Nowadays it affects investigate by this way, finding ways to deal with these implants, whether dental, trauma surgery, etc., which can accelerate osseointegration. This project aims to study how it can affect a coating with hydroxyapatite microdomains dental implants in adhesion, cell proliferation and differentiation. In several studies this coating has been deposited from the proposal of Kokubo on polymers and cellulose, corroborating that facilitates the adhesion and cell proliferation. Once studied the times of hydroxyapatite coating on the material used in this work, based on titanium alloy (Ti6Al4V), four times of coating for subsequent assays were determined: 96, 192 and 288 hours and time control (uncoated). Dental pulp mesenchymal cells where seeded on these surfaces, and adhesion, cell proliferation and differentiation were studies using histological techniques (DAPI, eosin staining and rhodamine phalloidin staining); cellular morphology from images taken by scanning electron microscope was also determined. For adhesion, cell culture time was 6 hours, resulting in shorter times than hydroxyapatite coating (96 hours), the adhesion of cells on the coated titanium alloy was important. To study cell proliferation, a 7 days culture was performed. The cells tended to detach from the surface of the coating over time, and those that had been deposited on “cauliflower” hydroxyapatite, proliferated in them, forming large cell clusters. Finally, it was preferred not cause differentiation, but if studied hydroxyapatite itself allowed differentiation of the plated cells to osteoblasts. The cell culture was maintained 15 days, but the results showed no differentiation.[ES] La implantología dental se ha convertido en un hecho importante para las personas. No obstante, los tiempos de espera de los procesos que conlleva esta cirugía aún son largos. Hoy en día se incide en investigar por esta vía, encontrándose formas para tratar estos implantes, ya sean dentales, para cirugía traumática, etc., que puedan acelerar su osteointegración. Este proyecto pretende estudiar cómo puede afectar un recubrimiento con microdominios de hidroxiapatita sobre implantes dentales en la adhesión, proliferación y diferenciación celulares. Se ha visto en bibliografía que la hidroxiapatita es osteoinductiva. En diversos estudios se ha depositado a partir de la propuesta de Kokubo sobre polímeros y celulosa, corroborándose que facilita la adhesión y proliferación celulares. Una vez estudiados los tiempos de recubrimiento de hidroxiapatita sobre el material utilizado en este trabajo, una aleación basada en titanio (Ti6Al4V), se determinaron cuatro tiempos de recubrimiento para los ensayos posteriores: 96, 192 y 288 horas y un tiempo control (sin recubrimiento). Se sembraron células mesenquimales de pulpa dentaria sobre estas superficies y se estudiaron la adhesión, proliferación y diferenciación celulares, a partir de técnicas histológicas (DAPI, tinción por eosina y tinción por rodamina faloidina); también se determinó la morfología celular a partir de imágenes tomadas al microscopio electrónico de barrido. Para la adhesión, el tiempo de cultivo celular fue de 6 horas, obteniéndose como resultado que a tiempos cortos de recubrimiento con hidroxiapatita (96 horas), la adhesión de las células sobre la aleación de titanio recubierta era importante. Para estudiar la proliferación celular, se realizó un cultivo de 7 días. Las células tendían a despegarse de la superficie del recubrimiento a lo largo del tiempo, y aquéllas que se habían depositado sobre las “coliflores” de hidroxiapatita, proliferaban en ellas, formándose grandes cúmulos celulares o clusters. Finalmente, se prefirió no provocar la diferenciación, sino estudiar si la hidroxiapatita por sí misma permitía la diferenciación de las células sembradas a osteoblastos. El cultivo celular se mantuvo 15 días, pero los resultados obtenidos no demostraron una diferenciación celular.[CA] La implantologia dental ha esdevingut un fet important per a les persones. No obstant, els temps d’espera dels processos que porta esta cirurgia encara són llargs. Hui en dia s’incideix en investigar per esta via, trobant-se formes de tractar estos implants, ja siguen dentals, per a cirurgia traumàtica, etc., que poden accelerar la seua osteointegració. Este projecte pretén estudiar com pot afectar un recobriment amb microdominis d’hidroxiapatita sobre els implants dentals en l’adhesió, proliferació i diferenciació cel·lulars. S’ha vist a bibliografia que la hidroxiapatita és osteoinductiva. En diversos estudis s’ha depositat a partir de la proposta de Kokubo sobre polímers i cel·lulosa, corroborant-se que facilita l’adhesió i proliferació cel·lulars. Una vegada estudiats els temps de recobriment d’hidroxiapatita sobre el material utilitzat en este treball, una…
[EN] Implant dentistry has become an important event for people. However, waiting times of proces... more [EN] Implant dentistry has become an important event for people. However, waiting times of processes associated witch this surgery are still long. Nowadays it affects investigate by this way, finding ways to deal with these implants, whether dental, trauma surgery, etc., which can accelerate osseointegration. This project aims to study how it can affect a coating with hydroxyapatite microdomains dental implants in adhesion, cell proliferation and differentiation. In several studies this coating has been deposited from the proposal of Kokubo on polymers and cellulose, corroborating that facilitates the adhesion and cell proliferation. Once studied the times of hydroxyapatite coating on the material used in this work, based on titanium alloy (Ti6Al4V), four times of coating for subsequent assays were determined: 96, 192 and 288 hours and time control (uncoated). Dental pulp mesenchymal cells where seeded on these surfaces, and adhesion, cell proliferation and differentiation were studies using histological techniques (DAPI, eosin staining and rhodamine phalloidin staining); cellular morphology from images taken by scanning electron microscope was also determined. For adhesion, cell culture time was 6 hours, resulting in shorter times than hydroxyapatite coating (96 hours), the adhesion of cells on the coated titanium alloy was important. To study cell proliferation, a 7 days culture was performed. The cells tended to detach from the surface of the coating over time, and those that had been deposited on “cauliflower” hydroxyapatite, proliferated in them, forming large cell clusters. Finally, it was preferred not cause differentiation, but if studied hydroxyapatite itself allowed differentiation of the plated cells to osteoblasts. The cell culture was maintained 15 days, but the results showed no differentiation.[ES] La implantología dental se ha convertido en un hecho importante para las personas. No obstante, los tiempos de espera de los procesos que conlleva esta cirugía aún son largos. Hoy en día se incide en investigar por esta vía, encontrándose formas para tratar estos implantes, ya sean dentales, para cirugía traumática, etc., que puedan acelerar su osteointegración. Este proyecto pretende estudiar cómo puede afectar un recubrimiento con microdominios de hidroxiapatita sobre implantes dentales en la adhesión, proliferación y diferenciación celulares. Se ha visto en bibliografía que la hidroxiapatita es osteoinductiva. En diversos estudios se ha depositado a partir de la propuesta de Kokubo sobre polímeros y celulosa, corroborándose que facilita la adhesión y proliferación celulares. Una vez estudiados los tiempos de recubrimiento de hidroxiapatita sobre el material utilizado en este trabajo, una aleación basada en titanio (Ti6Al4V), se determinaron cuatro tiempos de recubrimiento para los ensayos posteriores: 96, 192 y 288 horas y un tiempo control (sin recubrimiento). Se sembraron células mesenquimales de pulpa dentaria sobre estas superficies y se estudiaron la adhesión, proliferación y diferenciación celulares, a partir de técnicas histológicas (DAPI, tinción por eosina y tinción por rodamina faloidina); también se determinó la morfología celular a partir de imágenes tomadas al microscopio electrónico de barrido. Para la adhesión, el tiempo de cultivo celular fue de 6 horas, obteniéndose como resultado que a tiempos cortos de recubrimiento con hidroxiapatita (96 horas), la adhesión de las células sobre la aleación de titanio recubierta era importante. Para estudiar la proliferación celular, se realizó un cultivo de 7 días. Las células tendían a despegarse de la superficie del recubrimiento a lo largo del tiempo, y aquéllas que se habían depositado sobre las “coliflores” de hidroxiapatita, proliferaban en ellas, formándose grandes cúmulos celulares o clusters. Finalmente, se prefirió no provocar la diferenciación, sino estudiar si la hidroxiapatita por sí misma permitía la diferenciación de las células sembradas a osteoblastos. El cultivo celular se mantuvo 15 días, pero los resultados obtenidos no demostraron una diferenciación celular.[CA] La implantologia dental ha esdevingut un fet important per a les persones. No obstant, els temps d’espera dels processos que porta esta cirurgia encara són llargs. Hui en dia s’incideix en investigar per esta via, trobant-se formes de tractar estos implants, ja siguen dentals, per a cirurgia traumàtica, etc., que poden accelerar la seua osteointegració. Este projecte pretén estudiar com pot afectar un recobriment amb microdominis d’hidroxiapatita sobre els implants dentals en l’adhesió, proliferació i diferenciació cel·lulars. S’ha vist a bibliografia que la hidroxiapatita és osteoinductiva. En diversos estudis s’ha depositat a partir de la proposta de Kokubo sobre polímers i cel·lulosa, corroborant-se que facilita l’adhesió i proliferació cel·lulars. Una vegada estudiats els temps de recobriment d’hidroxiapatita sobre el material utilitzat en este treball, una…
Review of Scientific Instruments
International Journal of Molecular Sciences, Jan 10, 2024
This article is an open access article distributed under the terms and conditions of the Creative... more This article is an open access article distributed under the terms and conditions of the Creative Commons Attribution (CC BY
Stem Cells International, Mar 4, 2022
Bone tissue provides support and protection to different organs and tissues. Aging and different ... more Bone tissue provides support and protection to different organs and tissues. Aging and different diseases can cause a decrease in the rate of bone regeneration or incomplete healing; thus, tissue-engineered substitutes can be an acceptable alternative to traditional therapies. In the present work, we have developed an in vitro osteogenic differentiation model based on mesenchymal stem cells (MSCs), to first analyse the influence of the culture media and the origin of the cells on the efficiency of this process and secondly to extrapolate it to a 3D environment to evaluate its possible application in bone regeneration therapies. Two osteogenic culture media were used (one commercial from Stemcell Technologies and a second supplemented with dexamethasone, ascorbic acid, glycerol-2-phosphate, and BMP-2), with human cells of a mesenchymal phenotype from two different origins: adipose tissue (hADSCs) and dental pulp (hDPSCs). The expression of osteogenic markers in 2D cultures was evaluated in several culture periods by means of the immunofluorescence technique and real-time gene expression analysis, taking as reference MG-63 cells of osteogenic origin. The same strategy was extrapolated to a 3D environment of polylactic acid (PLA), with a 3% alginate hydrogel. The expression of osteogenic markers was detected in both hADSCs and hDPSCs, cultured in either 2D or 3D environments. However, the osteogenic differentiation of MSCs was obtained based on the culture medium and the cell origin used, since higher osteogenic marker levels were found when hADSCs were cultured with medium supplemented with BMP-2. Furthermore, the 3D culture used was suitable for cell survival and osteogenic induction.
Journal of Biomedical Materials Research Part A, Jul 5, 2016
Stem Cells International, 2022
Bone tissue provides support and protection to different organs and tissues. Aging and different ... more Bone tissue provides support and protection to different organs and tissues. Aging and different diseases can cause a decrease in the rate of bone regeneration or incomplete healing; thus, tissue-engineered substitutes can be an acceptable alternative to traditional therapies. In the present work, we have developed an in vitro osteogenic differentiation model based on mesenchymal stem cells (MSCs), to first analyse the influence of the culture media and the origin of the cells on the efficiency of this process and secondly to extrapolate it to a 3D environment to evaluate its possible application in bone regeneration therapies. Two osteogenic culture media were used (one commercial from Stemcell Technologies and a second supplemented with dexamethasone, ascorbic acid, glycerol-2-phosphate, and BMP-2), with human cells of a mesenchymal phenotype from two different origins: adipose tissue (hADSCs) and dental pulp (hDPSCs). The expression of osteogenic markers in 2D cultures was evalua...
[EN] Implant dentistry has become an important event for people. However, waiting times of proces... more [EN] Implant dentistry has become an important event for people. However, waiting times of processes associated witch this surgery are still long. Nowadays it affects investigate by this way, finding ways to deal with these implants, whether dental, trauma surgery, etc., which can accelerate osseointegration. This project aims to study how it can affect a coating with hydroxyapatite microdomains dental implants in adhesion, cell proliferation and differentiation. In several studies this coating has been deposited from the proposal of Kokubo on polymers and cellulose, corroborating that facilitates the adhesion and cell proliferation. Once studied the times of hydroxyapatite coating on the material used in this work, based on titanium alloy (Ti6Al4V), four times of coating for subsequent assays were determined: 96, 192 and 288 hours and time control (uncoated). Dental pulp mesenchymal cells where seeded on these surfaces, and adhesion, cell proliferation and differentiation were studies using histological techniques (DAPI, eosin staining and rhodamine phalloidin staining); cellular morphology from images taken by scanning electron microscope was also determined. For adhesion, cell culture time was 6 hours, resulting in shorter times than hydroxyapatite coating (96 hours), the adhesion of cells on the coated titanium alloy was important. To study cell proliferation, a 7 days culture was performed. The cells tended to detach from the surface of the coating over time, and those that had been deposited on “cauliflower” hydroxyapatite, proliferated in them, forming large cell clusters. Finally, it was preferred not cause differentiation, but if studied hydroxyapatite itself allowed differentiation of the plated cells to osteoblasts. The cell culture was maintained 15 days, but the results showed no differentiation.[ES] La implantología dental se ha convertido en un hecho importante para las personas. No obstante, los tiempos de espera de los procesos que conlleva esta cirugía aún son largos. Hoy en día se incide en investigar por esta vía, encontrándose formas para tratar estos implantes, ya sean dentales, para cirugía traumática, etc., que puedan acelerar su osteointegración. Este proyecto pretende estudiar cómo puede afectar un recubrimiento con microdominios de hidroxiapatita sobre implantes dentales en la adhesión, proliferación y diferenciación celulares. Se ha visto en bibliografía que la hidroxiapatita es osteoinductiva. En diversos estudios se ha depositado a partir de la propuesta de Kokubo sobre polímeros y celulosa, corroborándose que facilita la adhesión y proliferación celulares. Una vez estudiados los tiempos de recubrimiento de hidroxiapatita sobre el material utilizado en este trabajo, una aleación basada en titanio (Ti6Al4V), se determinaron cuatro tiempos de recubrimiento para los ensayos posteriores: 96, 192 y 288 horas y un tiempo control (sin recubrimiento). Se sembraron células mesenquimales de pulpa dentaria sobre estas superficies y se estudiaron la adhesión, proliferación y diferenciación celulares, a partir de técnicas histológicas (DAPI, tinción por eosina y tinción por rodamina faloidina); también se determinó la morfología celular a partir de imágenes tomadas al microscopio electrónico de barrido. Para la adhesión, el tiempo de cultivo celular fue de 6 horas, obteniéndose como resultado que a tiempos cortos de recubrimiento con hidroxiapatita (96 horas), la adhesión de las células sobre la aleación de titanio recubierta era importante. Para estudiar la proliferación celular, se realizó un cultivo de 7 días. Las células tendían a despegarse de la superficie del recubrimiento a lo largo del tiempo, y aquéllas que se habían depositado sobre las “coliflores” de hidroxiapatita, proliferaban en ellas, formándose grandes cúmulos celulares o clusters. Finalmente, se prefirió no provocar la diferenciación, sino estudiar si la hidroxiapatita por sí misma permitía la diferenciación de las células sembradas a osteoblastos. El cultivo celular se mantuvo 15 días, pero los resultados obtenidos no demostraron una diferenciación celular.[CA] La implantologia dental ha esdevingut un fet important per a les persones. No obstant, els temps d’espera dels processos que porta esta cirurgia encara són llargs. Hui en dia s’incideix en investigar per esta via, trobant-se formes de tractar estos implants, ja siguen dentals, per a cirurgia traumàtica, etc., que poden accelerar la seua osteointegració. Este projecte pretén estudiar com pot afectar un recobriment amb microdominis d’hidroxiapatita sobre els implants dentals en l’adhesió, proliferació i diferenciació cel·lulars. S’ha vist a bibliografia que la hidroxiapatita és osteoinductiva. En diversos estudis s’ha depositat a partir de la proposta de Kokubo sobre polímers i cel·lulosa, corroborant-se que facilita l’adhesió i proliferació cel·lulars. Una vegada estudiats els temps de recobriment d’hidroxiapatita sobre el material utilitzat en este treball, una…
[EN] Implant dentistry has become an important event for people. However, waiting times of proces... more [EN] Implant dentistry has become an important event for people. However, waiting times of processes associated witch this surgery are still long. Nowadays it affects investigate by this way, finding ways to deal with these implants, whether dental, trauma surgery, etc., which can accelerate osseointegration. This project aims to study how it can affect a coating with hydroxyapatite microdomains dental implants in adhesion, cell proliferation and differentiation. In several studies this coating has been deposited from the proposal of Kokubo on polymers and cellulose, corroborating that facilitates the adhesion and cell proliferation. Once studied the times of hydroxyapatite coating on the material used in this work, based on titanium alloy (Ti6Al4V), four times of coating for subsequent assays were determined: 96, 192 and 288 hours and time control (uncoated). Dental pulp mesenchymal cells where seeded on these surfaces, and adhesion, cell proliferation and differentiation were studies using histological techniques (DAPI, eosin staining and rhodamine phalloidin staining); cellular morphology from images taken by scanning electron microscope was also determined. For adhesion, cell culture time was 6 hours, resulting in shorter times than hydroxyapatite coating (96 hours), the adhesion of cells on the coated titanium alloy was important. To study cell proliferation, a 7 days culture was performed. The cells tended to detach from the surface of the coating over time, and those that had been deposited on “cauliflower” hydroxyapatite, proliferated in them, forming large cell clusters. Finally, it was preferred not cause differentiation, but if studied hydroxyapatite itself allowed differentiation of the plated cells to osteoblasts. The cell culture was maintained 15 days, but the results showed no differentiation.[ES] La implantología dental se ha convertido en un hecho importante para las personas. No obstante, los tiempos de espera de los procesos que conlleva esta cirugía aún son largos. Hoy en día se incide en investigar por esta vía, encontrándose formas para tratar estos implantes, ya sean dentales, para cirugía traumática, etc., que puedan acelerar su osteointegración. Este proyecto pretende estudiar cómo puede afectar un recubrimiento con microdominios de hidroxiapatita sobre implantes dentales en la adhesión, proliferación y diferenciación celulares. Se ha visto en bibliografía que la hidroxiapatita es osteoinductiva. En diversos estudios se ha depositado a partir de la propuesta de Kokubo sobre polímeros y celulosa, corroborándose que facilita la adhesión y proliferación celulares. Una vez estudiados los tiempos de recubrimiento de hidroxiapatita sobre el material utilizado en este trabajo, una aleación basada en titanio (Ti6Al4V), se determinaron cuatro tiempos de recubrimiento para los ensayos posteriores: 96, 192 y 288 horas y un tiempo control (sin recubrimiento). Se sembraron células mesenquimales de pulpa dentaria sobre estas superficies y se estudiaron la adhesión, proliferación y diferenciación celulares, a partir de técnicas histológicas (DAPI, tinción por eosina y tinción por rodamina faloidina); también se determinó la morfología celular a partir de imágenes tomadas al microscopio electrónico de barrido. Para la adhesión, el tiempo de cultivo celular fue de 6 horas, obteniéndose como resultado que a tiempos cortos de recubrimiento con hidroxiapatita (96 horas), la adhesión de las células sobre la aleación de titanio recubierta era importante. Para estudiar la proliferación celular, se realizó un cultivo de 7 días. Las células tendían a despegarse de la superficie del recubrimiento a lo largo del tiempo, y aquéllas que se habían depositado sobre las “coliflores” de hidroxiapatita, proliferaban en ellas, formándose grandes cúmulos celulares o clusters. Finalmente, se prefirió no provocar la diferenciación, sino estudiar si la hidroxiapatita por sí misma permitía la diferenciación de las células sembradas a osteoblastos. El cultivo celular se mantuvo 15 días, pero los resultados obtenidos no demostraron una diferenciación celular.[CA] La implantologia dental ha esdevingut un fet important per a les persones. No obstant, els temps d’espera dels processos que porta esta cirurgia encara són llargs. Hui en dia s’incideix en investigar per esta via, trobant-se formes de tractar estos implants, ja siguen dentals, per a cirurgia traumàtica, etc., que poden accelerar la seua osteointegració. Este projecte pretén estudiar com pot afectar un recobriment amb microdominis d’hidroxiapatita sobre els implants dentals en l’adhesió, proliferació i diferenciació cel·lulars. S’ha vist a bibliografia que la hidroxiapatita és osteoinductiva. En diversos estudis s’ha depositat a partir de la proposta de Kokubo sobre polímers i cel·lulosa, corroborant-se que facilita l’adhesió i proliferació cel·lulars. Una vegada estudiats els temps de recobriment d’hidroxiapatita sobre el material utilitzat en este treball, una…
Review of Scientific Instruments