Гидрохлорид 3-этилтио-5-(2-морфолино)-этил-1, 2, 4-триазино5, 6-виндола, обладающий противовоспалительной, противогипоксической активностью и способностью повышать устойчивость к повторной черепно-мозговой травме (original) (raw)
Формула
Гидрохлорид 3-этилтио-5-(2-морфолино) -этил-1,2,4-триазино(5,6-в)индола формулы
обладающий противовоспалительной, противогипоксической активностью и способностью повышать устойчивость к повторной черепно-мозговой травме.
Описание
Изобретение относится к классу триазино[5,6-b] индолов, конкретно к гидрохлориду 3-этилтио-5-(2-морфолино)-этил-1,2,4-триазино[5,6-b] индола формулы I (препарат N 58)
обладающему противовоспалительной, противогипоксической активностью и способностью повышать устойчивость к повторной черепно-мозговой травме.
Наиболее близкими к предлагаемым соединениям по структуре являются дигидрохлорид 3-этилтио-5-(2-диэтиламиноэтил)-1,2,4-триазино[5,6-b]индола формулы II [1] и гидрохлорид 3-(2-диэтиламиноэтилтио)-1,2,4-триазиноиндола формулы III [2]
обладающие аналогичными видами активности. Однако эти соединения имеют достаточно высокую токсичность.
Целью изобретения является расширение ассортимента веществ, воздействующих на живой организм и обладающих противовоспалительной, противогипоксической активностью и способностью повышать устойчивость к повторной черепно-мозговой травме.
Указанная цель достигается новым соединением - гидрохлоридом 3-этилтио-5-(2-морфолино)этил-1,2,4-триазино[5,6-b]индола, обладающим данными видами активности. Это соединение представляет собой бледно-желтое кристаллическое вещество с т. пл. 223oС (из бутанола). Трудно растворяется в воде, устойчиво при хранении, не гигроскопично, pH 1%-ного водного раствора 3,4. Раствор выдерживает стерилизацию при 100oC.
Вещество однородно по данным тонкослойной хроматографии. Адсорбент - силуфол, растворитель для нанесения - метиловый спирт, подвижный растворитель - этилацетат - гептан (3:2), Rf = 0,05; метиловый спирт - 3н. водный аммиак (10:1), Rf = 0,84. Растворитель для нанесения - спирт, подвижный растворитель - спирт - 3н. водный аммиак (10:1), Rf = 0,81; подвижный растворитель - этилацетат, насыщенный аммиаком - хлороформом (10:1), Rf = 0,66. Вещество как в видимом, так и в УФ-свете не содержит примесей, в том числе исходных веществ. При опрыскивании реактивом Драгендорфа обнаруживается в виде розового пятна.
Строение вещества подтверждается данными элементного анализа, потенциометрического титрования щелочью, а также УФ-спектров.
Соединение формулы I получают обычным методом. 3-Этилтио-1,2,4-триазино[5,6-b] индол превращают в натриевую соль действием этилата натрия в безводном спирте. Полученную соль обрабатывают гидробромидом морфолиноэтилбромида в диметилформамиде, к которому предварительно прибавляют гидрид натрия для превращения в свободное основание.
Аминоалкилирование проводят при нагревании с использованием небольшого избытка морфолиноэтилбромида. При этом получают свободное основание 3-этилтио-5-(2-морфолино)этил-1,2,4-триазино[5,6-b] индола, которое затем обрабатывают хлористым водородом и превращают в гидрохлорид. Так как на стадии моногидрохлорида реакцию трудно остановить, удобнее пропускать хлористый водород до насыщения с образованием дигидрохлорида. Последний при действии эквимолекулярного количества щелочи превращают в гидрохлорид 3-этилтио-5-(2-морфолино)этил-1,2,4-триазино[5,6-b] индола. Выход 57 - 61% по отношению к 3-этилтио-1,2,4-триазино[5,6-b]индолу.
Пример. Смешивают 51,7 г (0,224 моль) 3-этилтио-1,2,4-триазино[5,6-b] индола с раствором этилата натрия, полученным из 5,17 г (0,225 г-атом) натрия в 172 мл безводного спирта, и полученный раствор выпаривают досуха под вакуумом при нагревании на водяной бане (температура бани 35oC). Остаток сушат под вакуумом при 110oC. Получают 53 г (93,6%) натриевой соли 3-этилтио-1,2,4-триазино[5,6-b] индола в виде ярко-желтого кристаллического порошка.
44 г (0,16 моль) гидробромида 2-морфолиноэтилбромида смешивают с 44 мл безводного диметилформамида, при охлаждении и перемешивании постепенно прибавляют 4 г (0,167 моль) гидрида натрия. Перемешивают до прекращения выделения водорода, смесь фильтруют и смешивают фильтрат с раствором 35 г (0,139 моль) натриевой соли 3-этилтио-1,2,4-триазино[5,6-b]индола в 61 мл безводного диметилформамида.
Нагревают на кипящей водяной бане 1,5 ч и после охлаждения выливают в 650 мл воды. При этом продукт реакции выпадает в осадок, pH суспензии 8 - 9 (по универсальному индикатору). Фильтруют, осадок отжимают, снимают с фильтра и перемешивают с 200 мл воды, снова фильтруют и промывают водой (50 мл), отжимают и сушат в вакуум-экстракторе над фосфорным ангидридом. Получают основание в виде кристаллов зеленовато-серого цвета, трудно растворяющихся в изопропиловом спирте на холоде и легко - при нагревании.
Вещество растворяют при нагревании в 688 мл изопропилового спирта и при наружном охлаждении поддерживают температуру 60oC, насыщают раствор безводным хлористым водородом ( в течение 20 мин). При этом окраска раствора переходит из темно-коричневой в желтую. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и оставляют на 1 ч. Фильтруют, осадок промывают малым количеством изопропилового спирта, эфиром и сушат под вакуумом над фосфорным ангидридом. Получают дигидрохлорид 3-этилтио-5-(2-морфолино)-1,2,4-триазино[5,6-b] индола, выход 40,9 г (64% по отношению к исходной натриевой соли), желтые кристаллы, т.пл. 207oC.
К 40,9 г (0,0982 моль) гидрохлорида прибавляют 154 мл воды и к полученной суспензии при перемешивании (температура 20oC) прибавляют 1 н. раствор едкого натра до pH 3,42 (потенциометрически, 100,7 мл). При этом окраска изменяется от ярко-желтой до бледно-желтой; суспензию выдерживают в бане со льдом 2 ч, фильтруют, осадок промывают ледяной водой (2 х 30 мл) и сушат под вакуумом над фосфорным ангидридом. Получают моногидрохлорид 3-этилтио-5-(2-морфолино)этил-1,2,4-триазино[5,6-b] индола, выход 37,1 г (99,1% по отношению к дигидрохлориду, 59,5% по отношению к исходному 3-этилтио-1,2,4-триазино[5,6-b] индолу). После перекристаллизации из бутилового спирта (10,6 мл/г) выход при кристаллизации 98% (бледно-желтые кристаллы, т.пл. 223oC). При последующей перекристаллизации из смеси изопропилового спирта с водой (10:1, 15 мл/г), выход 68%, температура плавления не изменяется.
Найдено, %: C 53,91, 54,07; H 5,88, 5,67; Cl 9,56, 9,35; N 18,84, 18,91; S 8,35, 8,28, мол. вес 385 (потенциометрическое титрование водного раствора щелочью).
C17H22ClN5OS
Вычислено,%: C 53,74; H 5,84; Cl 9,33; N 18,43; S 8,44, мол. вес 388.
УФ-спектр, 
макс , нм (lg 
) : 224 пл (4,162), 269 (4,162), 354 (3,933). Уф-спектр снят для раствора в воде на приборе СФ-20.
Определение острой токсичности соединения I проводили на мышах массой 18 - 20 г при внутрибрюшинном введении вещества в виде 2%-ного водного раствора; крысам массой 180 - 190 г препарат N 58 вводили внутривенно и внутрибрюшинно. В данных условиях опыта ЛД50 для мышей составляет 970 мг/кг; для крыс при внутривенном введении 29 мг/кг, при внутрибрюшинном 350 мг/кг, что в 6 раз больше, чем у соединения II, и в 3 раз больше, чем у соединения III. Кролики без летального исхода переносят внутривенное введение вещества в дозе 100 мг/кг. Внутрибрюшинное введение вещества в дозе 40 мг/кг в течение 6 дней мышам не сопровождалось какими-либо видимыми токсическими реакциями со стороны желудочно-кишечного тракта, а также общего состояния животных. Изъязвлений слизистой желудка и кишечника отмечено не было.
Ежедневное внутривенное ведение крысам, кроликам и собакам соединения I в дозе 10 - 15 мг/кг в течение 30 дней не сопровождалось изменениями в общих анализах крови и мочи, не наблюдалось также изменений в показателях трансаминаз, щелочной фосфатазы, холестерина, билирубина, остаточного азота, креатинина, глюкозы, натрия, калия и хлорида, определяемых в сыворотке крови кроликов и собак. Установлено, что вещество не обладает мутагенным действием на хромосомный аппарат мышей.
Противовоспалительную активность соединения I изучали на крысах-самцах массой 170 - 180 г, по 10 животных в группе, на модели асептического воспаления по методу "ватная гранулема".
В табл. 1 приводятся данные, показывающие во сколько раз уменьшилось выделение жидкости во влажной гранулеме и разрастание соединительной ткани в сухой гранулеме по отношению к контролю.
Испытывали влияние соединений I - III на развитие воспалительного процесса (гистаминовый отек, крысы-самцы массой 170 - 180 г, в группе по 10 животных). Результаты приведены в табл. 2.
На модели "адреналиновый отек" легких соединение I значительно превосходит по противовоспалительному эффекту известные соединения.
Испытывали влияние соединений I - III в дозе 1/10 LD50 на развитие воспалительного процесса на модели "адреналиновый отек" легких на мышах массой 18 - 20 г: соединение II 31,2%, соединение III 25,6%, соединение I 12%.
Преимущества препарата N 58 установлены и при изучении противогипоксической активности на мышах, крысах и кроликах.
Достоинство этого соединения состоит в том, что оно проявляет противогипоксическое действие при гипоксической гипоксии в ранние сроки после внутрибрюшинной инъекции, о чем свидетельствуют данные табл. 3 и 4.
Длительность жизни кроликов на "высоте" 10,5 км на фоне внутривенной инъекции препарата N 58 составила 18,3 
1,1 мин, в то время как после введения соединений II и III она равнялась контрольным данным.
Результаты экспериментов, представленные в табл. 3 и 4, а также испытания на кроликах свидетельствуют о наличии у предлагаемого соединения более выраженной противогипоксической активности, чем у соединений I и II. В дополнение к найденным противовоспалительной и противогипоксической активностям препарат N 58 обладает способностью повышать устойчивость организма к повторной черепно-мозговой травме, которая сопоставлена с активностью соединений II и III в табл. 5. В качестве аналога использована ГАМК, которая применяется в клинике для лечения последствий острой черепно-мозговой травмы.
Таким образом, соединение I превосходит соединения II и III по противовоспалительному эффекту на модели "адреналиновый отек" легких, по гипоксической активности и по способности повышать устойчивость к черепно-мозговой травме.
Гидрохлорид 3-этилтио-5-(2-морфолино) -этил-1,2,4-триазино[5,6-b] индола формулы
обладающий противовоспалительной, противогипоксической активностью и способностью повышать устойчивость к повторной черепно-мозговой травме.
Рисунки
Заявка
3393081/04, 11.02.1982
Ленинградский химико-фармацевтический институт
Томчин А. Б, Пономарева М. М, Пастушенков А. Л, Гатчина Т. А, Баллюзек Ф. В, Селезнев Л. Г, Степных Ю. П, Пастушенков В. Л, Налимов Ю. Д, Пастушенков Л. В
МПК / Метки
МПК: A61K 31/53, C07D 487/04
Метки: 3-этилтио-5-(2-морфолино)-этил-1, 4-триазино5, 6-виндола, активностью, гидрохлорид, обладающий, повторной, повышать, противовоспалительной, противогипоксической, способностью, травме, устойчивость, черепно-мозговой
Опубликовано: 20.02.1998