Растворитель для живых бактерийных вакцин — SU 1490739 (original) (raw)
Формула
РАСТВОРИТЕЛЬ ДЛЯ ЖИВЫХ БАКТЕРИЙНЫХ ВАКЦИН, содержащий стабилизатор на основе пептона и фосфатный буферный раствор, отличающийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности микроорганизмов, стандартизации состава растворителя, упрощения технологии его изготовления, стабилизатор дополнительно содержит трилон Б при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Пептон 2 - 5
Трилон Б 0,2 - 0,5
Фосфатный буферный раствор Остальное
Описание
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в ветеринарной практике для растворения сухих бактерийных вакцин, например, против рожи свиней, пастереллеза птиц и бруцеллеза крупного рогатого скота.
Целью изобретения является повышение стабилизирующей эффективности растворителя, стандартизация его состава, упрощение технологии его изготовления и замена ценного пищевого сырья на непищевое.
П р и м е р 1. Для изготовления растворителя пептон и трилон Б растворяют в калийфосфатном буферном растворе (0,925 г КН2РО4 и 5,4 г К2НРО на 1 л дистиллированной воды) и определяют величину рН, которая должна быть в пределах 7,2-7,5. Приготовленный растворитель стерилизуют автоклавированием, расфасовывают во флаконы, закрывают резиновыми пробками, откатывают металлическими колпачками и этикетируют.
Пептон и буферный компонент создают изотоническую среду и обеспечивают близкую к 100%-ной выживаемости микробных тел (пастерелл, бруцелл, бактерий рожи и др.) как при растворении сухих вакцин, так и в регидратированном состоянии в течение времени, необходимого для вакцинации (1-3 ч).
Введение в состав растворителя трилона Б предотвращает образование осадка фосфорнокислых солей при изготовлении и хранении растворителя за счет образования водорастворимых комплексов трилона Б - катионы металлов, образующих нерастворимые соли фосфатов, увеличивает буферную емкость растворителя.
П р и м е р 2. Для оценки эффективности действия растворителя приведены результаты исследования сохраняемости живых микробных тел в вакцине против рожи свиней (штамм ВР-2), разведенной растворителем на калийфосфатном буфере с концентрацией пептона и трилона Б соответственно 1, 2, 3, 4, 5 и 6% и 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6% и выдержанной 45 мин при 20 
2оС (см. табл.1).
Из табл.1 видно, что при возрастании содержания в составе растворителя пептона в пределах 1-3% и трилона Б в пределах 0,1-0,3% возрастает концентрация живых бактерий рожи в разведенной вакцине и при концентрации пептона выше 3%, трилона Б выше 0,3% остается практически постоянной, поэтому концентрация пептона 3% и трилона Б 0,3% является оптимальной.
П р и м е р 3. Исследована сохраняемость количества живых микробных тел в вакцинах против рожи свиней и пастереллеза птиц, растворенных в растворителе, содержащем 3% пептона, 0,3% трилона Б и КФБ. Разведенные вакцины выдерживают при 20 2оС в течение 0,5-1; 1,5; 2 ч. Определяют через каждые 0,5 ч количество живых микробных тел. Предлагаемый растворитель сравнивают с физиологическим раствором NaCl (ФР) и растворителем, содержащим МПБ.
Результаты исследований (см. табл.2 и 3) показывают, что МПБ и растворитель на основе пептона обеспечивают практически одинаковую сохраняемость живых микробных тел в растворенной вакцине против пастереллеза птиц в интервале 0,5-2 ч и в вакцине против рожи свиней в интервале 0-4 ч, что существенно превышает сохраняемость живых микробных тел в вакцинах, разведенных физиологическим раствором.
Наряду с практически одинаковой выживаемостью микробных клеток в растворителях на основе МПБ и пептона с трилоном Б последний растворитель имеет ряд преимуществ: технологичнее, дешевле, более стандартен и не требует использования при его изготовлении ценного пищевого сырья.
П р и м е р 4. Для подтверждения возможности использования предлагаемого растворителя для других сухих бактерийных вакцин исследована его эффективность для живой сухой вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота (штамм 82 и 19). Вакцину растворяют в физиологическом растворе и в предлагаемом растворителе.
Результаты исследований (см. табл.4) свидетельствуют об эффективности предлагаемого растворителя для сухой вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота и возможности его применения для целого ряда сухих бактерийных вакцин.
П р и м е р 5. Для подтверждения стандартности состава предлагаемого растворителя исследованы 3 серии растворителя, изготовленные с трилоном Б и без него, на содержание общего и аминного азота, величину сухого остатка и буферной емкости. Результаты исследований (см. табл.5) показывают стандартность состава растворителя, что обеспечивается введением в состав растворителя трилона Б.
П р и м е р 6. Безвредность растворителя для животных испытывают на цыплятах суточного и 15-суточного возраста и белых мышах массой 18-20 г. Цыплятам растворитель вводят внутримышечно и интраназально (в дозе 0,5 и 0,2 см3 соответственно), белым мышам - по 0,5 см3 растворителя подкожно в область спины. Контролем служит физиологический раствор. В течение 10-суточного наблюдения цыплята и мыши остаются клинически здоровыми, и на месте введения растворителя не наблюдается местной реакции, абсцессов и некрозов, что свидетельствует о безвредности предлагаемого растворителя.
Таким образом, растворитель для сухих живых бактерийных вакцин обеспечивает хорошую выживаемость микробных клеток, является стандартным, более дешевым и безвредным.
Изобретение относится к биологической промышленности и может быть использовано в ветеринарной практике. Растворитель предназначен для растворения сухих живых бактерийных вакцин (против рожи свиней, пастереллеза птиц, бруцеллеза крупного рогатого скота) перед их применением. Цель изобретения - повышение жизнеспособности микроорганизмов, стандартизации состава растворителя, упрощения технологии его изготовления. Растворитель позволяет отказаться от используемого в практике физиологического раствора - хлористого натрия -, не обеспечивающего сохраняемости необходимого для успешной вакцинации количества живых микробных тел, а также позволяет заменить мясо-пептонный бульон на пептон, трилон Б и буферный компонент. Для изготовления растворителя навески пептона в концентрации 2 - 5% и трилона в концентрации 0,2 - 0,5% растворяют в калийфосфорном буферном растворе с pH 7,2 - 7,5. Стерилизуют автоклавированием в течение 30 мин под давлением 1 атм. Новый растворитель обеспечивает близкую к 100%-ной выживаемость микроорганизмов (пастерелл, бруцелл, бактерий рожи и др.), как при растворении сухих вакцин, так и в регидратированном состоянии в течение 3 ч. Растворитель технологичен, стандартен и не требует использования при его изготовлении ценного пищевого сырья. 5 табл.
Рисунки
Заявка
4350381/13, 25.12.1987
Всесоюзный научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности
Токарик Э. Ф, Ковальская Л. А, Иванова Н. А, Ярцев М. Я, Сапегина Е. П, Шишов В. П, Елисеева Л. А, Александрова М. Л, Анисимова Л. В, Чудинова А. Д
МПК / Метки
МПК: A61K 39/00, C12N 1/04
Метки: бактерийных, вакцин, живых, растворитель
Опубликовано: 15.11.1994