Статистические сополимеры в качестве низкотоксичных веществ, обладающих пролонгированным гипотензивным действием, и способ их получения (original) (raw)
Формула
1. Статистические сополимеры формулы
с мол.м. 2000 6500, где m n 1 1 1 3,
в качестве низкотоксичных веществ, обладающих пролонгированным гипотензивным действием.
2. Способ получения статистических сополимеров взаимодействием в ограническом растворителе производного L-лизина с производным дофамина и последующей обработкой продуктов реакции кислотой, отличающийся тем, что с целью снижения токсичности при сохранении пролонгированного гипотензивного эффекта, в качестве исходных реагентов используют N-карбоксиангидрид 
-Z-L лизина и карбонат дофамина, взятые в мольном соотношении 1 1 31, взаимодействие проводят в присутствии эквимольного карбонату дофамина количества триэтиламина и обработку продуктов реакции осуществляют 4 6 н. раствором НВч в ледяной уксусной кислоте при комнатной температуре в течение суток.
Описание
Изобретение относится к высокомолекулярным соединениям, конкретно к статистическим сополимерам на основе L-лизина и дофамина, и способам их получения, которые могут быть использованы в биохимической практике в качестве низкотоксичных веществ, обладающих пролонгированным гипотензивным действием.
Целью изобретения является синтез статистических сополимеров формулы
HN 
CH 
-CO 
NH 
с мол.м. 2000-6500, где m:n 1:1 1:3, способных применяться в качестве низкотоксичных веществ, обладающих пролонгированным гипотензивным действием, и способ получения таких статистических сополимеров.
П р и м е р 1. 0,87 г (0,0027 моль) N-карбоксиангидрида -Z-L-лизина растворяют в 8 мл безводного диоксана. К раствору добавляют 0,62 г (0,0027 моль) раствора карбоната дофамина в 17 мл сухого диметилформамида, содержащего 0,38 г (0,0027 моль) триэтиламина.
Смесь оставляют на сутки при комнатной температуре, затем отфильтровывают хлоргидрат триэтиламина.
Фильтрат выливают в 200 мл сухого эфира. Выпавшее масло трижды переосаждают из метанольного раствора в эфир. Выход сырого продукта 1,32 (98%).
Сырой продукт фракционируют на колонке (30,4 см2), заполненной сефадексом ЛШ-60, в растворе диметилформамида. В результате фракционирования отделяют гомополимер L-лизина (10%), вторая фракция целевой сополимер и третья гомополимер дофамина (5%).
Для определения состава сополимера его подвергают кислотному гидролизу в избытке 6 н. HCl (32 ч, 110оС). Количество лизина, рассчитанного в молях, оказалось равным количеству взятого дофамина. Таким образом, можно считать, что молярное соотношение лизина и дофамина равно 50:50, что соответствует соотношению производных лизина и дофамина, введенных в реакцию сополимеризации. Найденное соотношение мономерных звеньев подтверждено данными элементного анализа и спектрофотометрическим определением дофамина по реакции Паули на волне 520 нм по результату цветной реакции с сульфаниловой кислотой.
Из второй реакции сополимера отгоняют растворитель в вакууме, остаток переосаждают из раствора метанола в безводный эфир. Остаток отделяют центрифугированием и обрабатывают 10 мл 4-6 н.раствора HBr в ледяной уксусной кислоте с добавкой 0,5 мл безводного бензола в течение 24 ч при комнатной температуре.
Целевой продукт трижды переосаждают из метанольного раствора в эфир. Остаток растворяют в воде и лиофизируют, выход 0,32 г.
Молекулярную массу определяют гель-фильтрацией на сефадексе Ж-75 (колонка калибрована стандартами фирмы "Сигма"). Найденная мол.масса составляет 3000-6000.
ИК-спектры вещества характеризуются полосами в области 3400-3200 см-1, соответствующими валентным колебаниям NH2-групп, в области 1654 см-1, соответствующей уретановой группе, в области 1715 см-1 карбонильной группе, 1602 см-1 фенольному остатку.
Определение гемодинамического действия синтезированных сополимеров проводились в ЛенНИИ кардиологии Минздрава РСФСР. За 1-2 дня до проведения исследований крысам под общим наркозом вживляли полиэтиленовые катетеры в бедренную артерию и вену для регистрации артериального давления и введения испытуемых веществ.
Эксперименты выполняли в период полного восстановления поведенческой активности животных при отсутствии послеоперационных осложнений.
Исследуемые сополимеры вводили внутривенно в дозах 2-5 мг/кг (в расчете на действующее начало) пяти наркотизированным (уретан, 800 мг/кг, и оксибутират натрия, 800 мг/кг) и девяти ненаркотизированным крысам.
Исходный уровень артериального давления (АД) составляет 100 мм рт.ст. Данные по изменению АД представлены в табл. 2.
Найденное действие предлагаемых сополимеров было подтверждено исследованием влияния сополимеров на сосуды микроциркуляторного русла кроликов. Кроликам давали наркоз (нембутал из расчета 40 мг/кг). Через небольшой разрез передней брюшной стенки извлекали петлю тонкой кишки, которую помещали в термостатируемую ячейку с растворами Рингера-Локка с температурой 38оС, таким образом, чтобы брызжейка легла на световод, находящийся в центре ячейки.
С помощью телевизионного микроскопа ТМ-2 изображение проектируется на экран видеоконтрольного устройства. Диаметр исследуемых микрососудов измеряют методом расщепления телевизионного изображения. Получаемый аналоговый сигнал обрабатывают на ПЭВМ Искра-226 (60-е исполнение).
Исследуемые сополимеры наносили с помощью микроинъектора непосредственно в микрососуды. В качестве контроля изучали действия дофамина (ДА).
Действие всех соединений исследовали на 48-50 сосудах 3-7 животных. Статистически достоверные данные представлены в табл.3. (оптимальная доза 0,2 мг или 0,2 
10-6 моль/л).
П р и м е р ы 2-3. Получение сополимеров осуществляют по методике примера 1. Свойства приведены в табл. 1, 2 и 3.
Изобретение относится к высокомолекулярным соединениям, конкретно к статистическим сополимерам на основе L-лизина и дофамина, и способам их получения, которые могут быть использованы в биохимической практике в качестве низкотоксичных веществ, обладающих пролонгированным гипотензивным действием. Изобретение позволяет снизить токсичность при сохранении пролонгированного гипотензивного эффекта за счет синтеза статистических сополимеров формулы 
с мол.м. 2000-6500, где m:n 1:1-1:3, и способа их получения взаимодействием в органическом растворителе N-карбоксиангидрида- -Z-L- -лизина с карбонатом дофамина, взятых в мольном соотношении 1:1 3:1, в присутствии эквимольного карбонату дофамина количества триэтиламина с последующей обработкой продуктов реакции 4,0 6,0 н.раствором HBr в ледяной уксусной кислоте при комнатной температуре в течение суток. Согласно изобретению предлагаемые сополимеры характеризуются ЛД50, равной 37-140 мг/кг, и при дозе 2-5 мг/кг снижают артериальное давление на 21-46% при продолжительности гипотензивного действия 70-240 мин. 2 с.п. ф-лы, 3 табл.
Рисунки
Заявка
4757924/05, 20.07.1989
Институт высокомолекулярных соединений АН СССР, Ленинградский научно-исследовательский институт кардиологии, Институт эволюционной физиологии им. И. М. Сеченова
Власов Г. П, Надеждина Л. Б, Харина М. А, Андреева Е. Н, Сыренский А. В, Рубанова Н. С, Манкаускене Н. В, Балашов Н. В, Добрынин А. А
МПК / Метки
МПК: C08G 69/10
Метки: веществ, гипотензивным, действием, качестве, низкотоксичных, обладающих, пролонгированным, сополимеры, статистические
Опубликовано: 20.08.1995