Способ получения вещества, обладающего литическим действием — SU 1692144 (original) (raw)
Формула
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ЛИТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ на патогенные множественно устойчивые к антибиотикам микроорганизмы, отличающийся тем, что штамм Xanthomonas campestris ВКПМ В-4102 культивируют на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, и выделяют целевой продукт после культивирования известными приемами.
Описание
Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способам получения литического препарата, используемого в медицине.
Пример выполнения способа.
Культуру Xanthomonas campestris выращивают на среде, содержащей 1,5% дрожжевого экстракта "Difeo", рН 7,6, в течение 26-28 ч при 28оС на качалках в медицинских колбах объемом 750 мл.
Клетки отделяют центрифугированием на холоду при 45000 g в течение 40 мин. Полученную культуральную жидкость подвергают ультрафильтрации. В сконцентрированный раствор на холоду добавляют сульфат аммония, осадок удаляют центрифугироавнием (1 ч при 45000 g).
К супернатанту добавляют сульфат аммония до 80% насыщения и выпавший в осадок белок собирают центрифугированием на холоду (1 ч при 45000 g). Осадок ресуспендируют в небольшом объеме 0,01 М Трис-HCl буфера, рН 8,5 и диализуют против 0,001 М Трис-HCl буфера на магнитной мешалке в течение 12-18 ч с частой сменой буфера.
Полученный штамм характеризуется следующими свойствами.
Морфологические и культуральные признаки.
Грамотрицательные палочки, не образующие спор, 0,5-0,7х2,0-5,0 мкм при росте на агаризованных средах. При культивировании в жидких питательных средах с аэрацией образует нитеподобные клетки от 10 до 20 мкм. Жгутики отсутствуют. Клетки неподвижны.
Образует пигмент двух типов: бледный зеленовато-желтый каротиноидной природы, не выделяющийся в среду, и бурый, меланиноподобный, диффундирующий в среду.
Штрих на МПА зеленовато-желтый, блестящий, слизистый. Рост хороший. Бактериальная масса плохо захватывается петлей.
Колонии на МПА через 18-24 ч 2-3 мм в диаметре, выпуклые круглые с ровным краем, в проходящем свете не просвечивают.
При росте в МПБ образует пленку, осадок, муть.
Физиолого-биохимические свойства. В качестве источника азота использует аммонийные соли, пептон.
В качестве источников углерода углеводы, органические кислоты, хорошо растет на богатых органических средах.
Метаболизм углеводов окислительный. Образует кислоту в минеральных средах с арабинозой, глюкозой, галактозой, фруктозой, сахарозой, лактозой, трегалозой, целлобиозой. Не использует уксусную и щавелевую клетчатку, агар не разрушает, крахмал не гидролизует, желатину разжижает, молоко свертывает и пентонизирует, сероводород на средах с пептоном не образует, нитриты из нитратов не образует. Каталазная активность слабая, 0,1% тетразолий бромистый ингибирует рост. Температурный оптимум 28оС. Не растет при 37оС. Оптимум рН 7,0. Растет в интервале рН 6,6-9,0 строгий аэроб. Процентное содержание Г+Ц в ДНК 66,0. Хранится на МПА. Из-за энергичного автолиза требует частых пересевов через 3-5 сут.
Литическое действие выделенного препарата проведено на 99 непатогенных культурах грамположительных и грамотрицательных бактерий и 39 представителях дрожжей из коллекции ИБФМ АН СССР. Препарат оказывает активное литическое действие на все отобранные для испытания грамположительные бактерии и на некоторые дрожжи.
Штамм Xanthomonas campestris ВКПМ В-4102 культивируют на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, и выделяют целевой продукт после культивирования известными приемами. При этом получают вещества, обладающие лептическим действием на патогенные множественно устойчивые к антибиотикам микроорганизмы.
Заявка
2210686/13, 26.10.1976
Институт биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР
Абрамочкин Г. В, Бароян О. В, Беликова В. Л, Бобык М. А, Генчиков Л. А, Кулаев И. С, Ламбина В. А, Новик С. Н, Скрябин Г. К, Чувильская Н. А, Чуркина Л. Г
МПК / Метки
МПК: C12N 1/20
Метки: вещества, действием, литическим, обладающего
Опубликовано: 20.11.1995