Способ выявления антител против блестящей оболочки яйцеклетки у женщин — SU 1292778 (original) (raw)

(594 А 39 00 ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН СВИДЕТЕЛЬСТВУ Н АВТОРСКО(56) 1 оцгпа о 1 Ехрепгп204, р. 181 - 184. о-исследовательский шерства и гинеколоИ. К. Галанина та 1 Хоо 1 оду, 1978,ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ ПРОТИВ БЛЕСТЯЩЕЙ ОБОЛОЧКИ ЯЙЦЕКЛЕТКИ У ЖЕНЩИН(57) Изобретение позволяет повысить точность способа. Свиные эритроциты, используемые для абсорбции исследуемых сывороток, типируют по групповым антигенам с помощью панели антисывороток к следующим антигенам эритроцитов, Ас, Еа, Ег 1, Е 1, Ед, Е 1, Ек, Егп, РЬ, Рс, К 1 ХЬ, ВЬ, ЕЬ, Ее,В,Ка, КЬ, 1 1.1, 13 а 1.1 да, дЬ. Затем к 0,5 мл исследуемой сыворотки крови человека добавляют 2 капли отмытых свиных эритроцитов, содержащих минимальное число эритроцитарных антигенов Ед, Е 1, Ек, К 1, 1.Ь, встряхивают, инкубируют 1 ч при 37 С, затем центрифугируют 20 мин при 500 д. Каплю адсорбированной сыворотки наносят на мазок их взвеси свиных яйцеклеток, инкубируют 30 мин во влажной камере при комнатной температуре, трижды отмывают забуференным физиологическим раствором, высушивают и наносят каплю моноспецифической люминесцентной сыворотки против иммуноглобулинов человека классов д,М, А.Инкубируют 1 ч во влажной камере при комнатной температуре, трижды отмывают за- р буференным физиологическим раствором, высушивают,ааосят каплю аабуфереггкого Щ глицерина и исследуют с помощью люминесцентного микроскопа.1292778 формула изобретения Составитель М. Г 1 ознякРедактор А. Лежнина Техред И. Верес Корректор А. ТяскоЗаказ 38(б Тираж 596 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий13035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5Производственно. полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при лабораторной иммунологической диагностике бесплодия. Целью изобретения является повышение точности способа путем проведени абсорбции сыворотки свиными эритроцитами, содержащими минимальное число эритроцитарных антигенов типа Ер, Е 1, Е 1 с, К 1, 1.Ь. Способ осугцествляют следующим образом.Свиные эритроциты, используемые для абсорбции исследуемых сывороток, типируют по групповым антигенам с помощью панели антисывороток к следующим антигенам эритроцитов Ас, Еа, Ед, Е 1, Ед, Е 1, Е 1 с, Егп, ЕЬ, Гс, К 1, 1.Ь, ВЬ, ЕЬ, Ее, Ра, Ка, КЬ, 1.1, 1.1, Ыс, 1 ь, Яа, Ь.Затем к 0,5 мл исследуемой сыворотки крови человека добавляют 2 капли отмытых свиных эритроцитов, содержаших минимальное число эритроцитарных антигенов Ер, Е 1, ЕК К 1, 1.Ь, встряхивают, инкубируют 1 ч при 37 С, затем центрифугируют 20 мин при 500 д. Полученную абсорбированную сыворотку используют для определения антител против блестящей оболочки яйцеклетки. Каплю абсорбированной сыворотки наносят на мазок из взвеси свиных яйцеклеток, инкубируют 30 мин во влажной камере при комнатной температуре, трижды отмывают забуференным физиологическим раствором, высушивают и наносят каплю моноспецифической люминесцентной сыворотки против иммуноглобулинов человека классов ф,М, А. Инкубируют 1 ч во, влажной камере при комнатной температуре, трижды отмывают забуференным физиологическим раствором, высушивают, наносят каплю забуференного глицерина, накрывают покровным стеклом и учитывают результат с помощью люминесцентного микроскопа, отмечая наличие или отсутствие свечения блестящей оболочки яйцеклетки. Свечение блестящей оболочки свидетельствует о наличии антител против нее. Пример. К 0,5 мл сыворотки крови больной В. добавляют 2 капли эритроцитов с минимальным содержанием эритроцитарных антигенов Ед, Е 1, Е 1 с, К 1, 1 Ь. Пробирку встряхивают, инкубируют 1 ч при 37 С, центрифугируют 20 мин при 500 д. 1 каплю надосадоч ной жидкости, представлявшую собой абсорбированную сыворотку, наносят на мазок из взвеси свиных яйцеклеток. Мазок инкубируют 30 мин во влажной камере при комнатной температуре, трижды отмывают забуференным физиологическим раствором, высушивают. На мазок наносят моноспецифичес кую люминесцентную антисыворотку против иммуноглобули нов человека классов , М, А. Мазок инкубируют 1 ч во влажной камере при комнатной температуре, трижды отмывают забуференным физиологическим раствором и высушивают. При люминесцентной микроскопии выявляют интенсивное (+ + + + ) свечение блестящей оболочки яйцеклетки, что свидетельствует о наличии в сыворотке крови исследуемой больной антител против блестящей оболочки яйцеклетки.При использовании эритроцитов, содер жаших антигены ЕЛ, Ед, Ек, К 1, 1 Ь, частота неопределенных результатов составила 89 /о, в то время как при использовании эритроцитов, содержащих антигены Ед, Е 1 с, К 1, 1 Ь, - 22%, а эритроцитов, содержащих антигены Е 1 с, К 1 или Е 1, 1 Ь, или Ед, Е 1 с - 0% ЗО Способ выявления антител против блестящей оболочки яйцеклетки у женшин пучтем абсорбции исследуемои сыворотки эритроцитами свиньи, инкубации ее с яйцеклетками свиньи с последующим выявлением связавшихся антител при помощи реакции непрямой иммунофлуоресценции, отличаю и 4 ийся тем, что, с целью повышения точности способа, абсорбцию проводят эритроцитами свиньи, содержащими минимальное число эритроцитарных антигенов типа Ед, Е 1, Е 1 с, К 1, 1.Ь.

Смотреть

Способ выявления антител против блестящей оболочки яйцеклетки у женщин