Способ получения иммобилизованных бактерий-биодеструкторов bacillus suвтilis к1 — SU 1671692 (original) (raw)
(5 ПИСАНИЕ БРЕ ЕНИЯ ДЕТЕЛЬС АВТО титут советскоиа и Лецинградчьнои и легко(54) СПОСОБ НЫХ БАКТЕРИЙ БоВТП.18 К 1 (57) Изобрет ной микробиол ИМ 1"10 БИЛИЗОВАНОРОВ ВАС 11,ЖБ ЛУЧ ЕНИЯ ИОДЕСТР бретение относитс к получениюх клеток,и иммобилизованц в частности кл капроамида и и могут длительн микробн ток-дестру делий из це кторов поли го, которые и затем ис хранит нки биодеструкцииериалов . является у ющей активн кения билизованн Вас 111 иянкубациц к имм яцЬлео лична ного оли име полотна его тони 4 текс, с послехрацением цеи ицкубируют ГОСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ П 1 НТ СССР(53) 577.15(088.8) ие относится к приклад гии - получению иммобипользоваться для оц поликапроамидных мат Целью изобретени чение биодеструктир при повышении срока Способ получения бактерий-биодеструк С 111 я К 1 заключаетс ток (водная суспецз 0,5 - 1,0) 10 едини капроамидцого цеткаЩ цу волокон дующим высушиванием левого продукта. Кце 71692 А 1 12 И 11/08//(С 12 л 1 11/0812 К 1:25) лизовацных микробных клеток, в частности бактерий-деструкторов поликапроамида. Целью изобретения является поФ вышение биодеструктирующей активности при повышении сроков хранения. Изобретение состоит в том, что суспензию клеток Вас 111 оя яиЪт 111 я К 1 в кпличеостве 0,5 - 1 10единиц на 1 мг волокнистого носителя в стерильных условиях выдерживают с поликапроамидным нетканым полотном, имеющим тонину волокна 0,4 текс, в течсние 1 - 3 недель при 35 - 37 С. Способ позволяет в 3о1 О раз увеличить биодеструктирующую активность целевого продукта при повышении сроков хранения. 1 з.п. Ь-лы, 1 табл с носителем при 35 - 370 С в течение3 недель. При длительном хранени полученного препарата возрастает би деструктирующая активность клеток в 3 - 10 раз.П р и м е р 1. Поликапроамидный волокнистый материал (ПКА) обрабаты вают водкой суспензией микробной кул туры Вас 111 оя яиЬС 111 я К 1 с концентрацией клеток 1,1 млрд. в 1 мл и выдерживают в течение 1 недели при 35 С при 1007-ной влажности. Волокн высушивают в стерильных условиях на воздухе и хранят в чашках Петри или стерильных бумажных пакетах в течени 5 лет. Затем осуществляют восстанов ление клеток из состояния акабиоза, для чего образнЬ волокон с иммобили зоваццыми клетками помещают в мясо1611692 Бйодеструктнруннда активность нтанна, краиивнегосн в иниобилизованноб форме Срок краненин, енперяту- ренн год а, С ел Условнл изечабилнзадии Пример Колнче с тНоситель К, ед. Ек, 2 М ед. Ен во клетокед 101 иа1 нг носитела Комплексная ПКЬ нить,15,6 таксТо ае 4,2 5,1 5,6 з,а аэ,5 53, 7 55,5 ао,о,эа О,ЬВ 0,55 О, 19 0,9 12 1,5 1,3 37 37 36 0,5 0,5 0,5 0,5 Штапельное ПКА волокна,0,1 тексНетвнос иглапрабивноеПул полотно, 250 гlн0,4 тексТа ве 2,39,5 6,2 0,19 36 0,5 4 О,З ао,7 5 1,2 5,6 5,5 з,а 1,9 1,в 1,6 о,го,з0,59 36 эо 40 г3 лня4 0,5 0,5 05 1 е сзюлсзнае валакяа(лвестныд способ)Пеллопознае волокноТа кеПтапельное ПКЬ волокно,0,7 тексТо ае О,2 О,7 0,20 36,5 39,3 40,1 5,2 4,7 5,1 1,9 1,5 37 37 0,5 0,5 0,5 о 11 12 0,57 0,71 О,В 9 1,з 1,7 1,5 53,6 57,3 64,9 5,3 5,6 5,5 37 37 З 7 0,5 0,5 0,5 э 14 15 Нетканое пглопробнвнаеПК 4 полотно, 250 гlиО,а тексТа ве 49,5 56,0 65,В 69,3 71, 1 0,56 0,60 о,вэ 1,24 1,26 2,1 1,1 1,7 2,7 1,9 З,7 а,9 5,7 4,26,1 35 36 35 З 7 37 О, 05 0,5 0,5 1,о 16 17 в 19 П р и и е ч а я н е. К - гакязатель бналеструксаи; И - обнес количество павреаленна; се, С и - атносительнне г.гренности результатов изнереяид. пептонный бчл.он, куэтьт 111 и 1 эуют в течение 24 - 48 ч при 35 - 37 С и делают высев на мясопептонный агар. Дляоценки биодсструктирующей способностиклеток готовят счспензию клеток в1 мл стерильной воды и инокулируют20 мг поликапроамидного волокна, Испытания проводят при 352 С, относительной влажности воздуха, близкой 10к 1007.з в течение 1 мес. 5 пя оценкибиодеструкции ПКА-волокон под микроскопом выявляют типы повреждений волокон в зависимости от нарушения мик -роструктуры и рассчитывают по совтэг 15купности абсолютных и относительныхповреэзщений показатель биостойкости,характеризующий степень деструкцииволокон,Примеры и результаты опытов сведены в таблицу.Анализ получен 1 ых данных показывает, что наибольшую биодеструктируюччщую активность после 5-летнего хранения имеет культура, иммобилизация которой осуществлена на нетканом ПКАматериале, имеющем тонину 0,4 текс(масса в г 1000 м нити или волокна).Увеличение этого параметра (до 0,7и 15,6 текс) приводит к уменьшению 30активности. Полотен с тониной волокна менее 0,4 текс (из поликапроайзща) нет. Увеличение температуры и сроков инкубации (пример 8) не приводит к повышению активности, а снижение этих параметров (пример 7) вызывает уменьшение активности.Таким образом, использование предлагаемого способа позволяет получить целевой продукт с повышенной при хранении активностью в 3 - 10 раз по сравнению с известными способами. Формула изобретения 1. Способ получения иммобилизованных бактерий-биодеструкторов Васз.11 цв зтзЬ 111 в К 1 з включающий инкубацию водной суспензии бактерий в присутствии волокнистого носителя и высушивание целевого продукта, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью увеличения биодеструктирующей активности при повышении сроков хранения, в качестве волокнистого носителя используют поликапроамидное нетканое полотно, имеющее тонину волокон 0 у 4 текс.2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю" щ и й с я тем, что инкубацию проводят при 35 - 37 С в течение 1 - 3 неодель.
Способ получения иммобилизованных бактерий-биодеструкторов bacillus suвтilis к1