Способ определения иммуноглобулина j е при аллергических заболеваниях — SU 1753421 (original) (raw)

(56) У а г Ы АеК". 2, р. 231-23 антителСогласно ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ан, Т,А.Прилепина и Н.Б,Сот а, Апп. Аего, 1979, ч, 42,54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИУУУНОГЛОБУЛИНд 9 ЕПРИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗдБОЛЕВДНИЯХ Изобретение относится к медицине, а именно диагностике аллергических заболеваний методом игимуноферментного анализа,Известен способ диагностики аллергических заболеваний иммуноферментньм анализом, включающий в себя сенсибилизацию полистирольного планшета аллергеном с последующим нанесением сыворотки крови больного и антител, меченных пероксидазой хрена против иммуноглобулина Е.Недостатком этого способа является продолжительность анализа (4 ч без учета времени сенсибилизации планшета аллергеном),Цель изобретения - усксрение анализа, Цель достигается тем, что в известном способе диагностики аллергических заболеваний иммуноферментным анализом, включающем в себя сенсибилизацию планшета аллергеном, с последующим нанесением на него сыворотки крови больного, бычьего сы(57) Использование; изобретение относится к области медицины и может использоваться во всех учреждениях Здравоохранения, Цель - ускорение способа, Сущность: иммуноферментный анализ, используемый при диагностике аллергических заболеваний, включает в себя сенсибилизацию планшета аллергеном, нанесение на него сыворотки крови больного и антител, меченных пероксидазой хрена против иммуноглобулина Е, -овизна анализа заключается в обрабогке планшета перед сенсибилизацией аллергеном 1/,-ным раствором глютарового альдегида, Это ускоряет анализ с 4 ч до 40 мин.2 табл. вороточного альбумина анти Емеченных пероксидазой хрена.изобретению перед сенсИбилизацией аллереном планшет обрабатывают 1 раствором глютарового альдегидэ.Влияние концентрации альдегида глютаровой кислоты на сникение времени анализа представлено в табл, 1,Обработка планшета глютаральдегидом позволяет сократить время анализа с 4 ч до 40 мин (без учета сенсибилизации планшета аллергеном),Способ осущеразом,Планшеты обрабатываются 1%-ным раствором глютарового альдегида в течение 18 ч при 4 ОС, Затем в ячейки обработанных планшетов заливают 200 мкл раствора аллергена в концентрации 10-50 мкг/мл в 0,1 У карбонатном буфере, рН 9,6, Сенсибилизация планшета аллергеном проводится в течении 1 ч при 37 ОС, После вытряхивания ствляется следующим об175342,1 Таблица 1 лияние концентрации альдеГида лОтяро 12 ОЙ кислоты н чч 2 стоитель 1 Ость метода ИФА, %, при Да 1 02 Пг 20лерГан, ВЛдаленньй из матагп 2 ала0 1,0 ЯЙЦО 0,34Еда сборная 0,37 0,48 0,48 0,92 ОЯ 2 0,7 0.6, ОЯ 2 2 аблиця Пред 2 агаем 1.й матОц,Результаты ИФА, иоказат ли апти Вской плотность ве я анализа 40 минАллерген, оьделенный из матариаля 4 звестыи мета Результаты 14 Ф,бпоказате т и ОптиВской ГлоГ Ости, ВгзО 1 л аьализа 4 ч Домашняя пыль Молоко Шерсть коцВк Шерсть собаки Перхоть лошади Перо подушкл УакТираж Подписноеосударстоеного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СС113035, Уоскв 2 а, Е, Раущская наб 4/5 Производственно-издательский комбин,.г "Патент", Г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 раствора аллергена в планшет ряскяпыояОт 200 мкл 1%-ным раствора бычьего сыоороточного альбумина на 10 мин при 37 С, По. Сле однократного отмывания планшета 0,002 М ФСБ рН 7,4 с 0,05%. н.м Тв 20 ФСБ 5 Тв) о каждуО лунку планшстя Вносят В разведение 1:100 илл 1;2 и инкубируют прл 37 С в течеьщр 1 Я мь 2,1, а затем отмывэОт 5аФраз (ФСБ То) и добанлгпот соответстоано анти или анти Е АТ, меченные пероксидазой 1 О хрена по 200 мкл), инкубируют 10 мин гри 37 ОС и отмыоаОт 7 разФСБ Тв) и вносят 200 мкл с"бстратой смеси, состоящей из 20 мкг ортофенилендиамин, растворенных в 20 мл 0,02 Л Цитратно-фосфатном буфе ре, рН 4,6, РеакцлО останавливаОт через 5-10 мин, Учет реакции проводится на спектрофотоматре при длина Волны 492 нм,11 редстаоенные 2 езультаты о табл, 2 свидетельствуют о том, что предлагаемый метод снижает время анализа с 4 ч до 40 мин и повышает чувствительность метода по сраонсньво и известным способом в доа и более раз,Формула изобретения Сг 2 особ определения иммуноглобулина 19 Е пд 1 аллергических заболеваниях, вклочаоДий сенсибилизацию полистирольного и л 8 н . ать а л л е р Ге 1 О м с и О с л е д уО щ и ма н е сением сыворотки к 1 эоол Оольиого и антител меченньх пероксидазои хрена проив 19 Г, о г л и ч а о щ и й с я тем, что, с цельО ускорения способа; паоед сенслбилизацией алларгеном планшет обрабятыоаот 1%- ным раствором глоарового альдегида.

Смотреть

Способ определения иммуноглобулина j е при аллергических заболеваниях