Способ получения трии дифосфатов аденозина и гулнозинл — SU 183149 (original) (raw)
О П И С А Н И Е 8349ИЗОБРЕТЕИИЯ Союз Советских Социалистических РесгубликК ПАТЕНТУ Зависимый от патецта Заявлено 05,.1965 1 М 73 црисосдицсцием заявки Мриоритет,Г 11( Г 07 Комитет и лам крыт изобретений и гри Совете М СССРИиостраииая фирма Какова Хакко Когио К явцтсль СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИ- И ДИФОСФАТ АДЕНОЗИНА И ГУАг 1 ОЗИНЛс 1 Изобретение отцосится к способам получения три- и дифосфатов адецозица и гуацозица путем фермеитативцого культивироваиия микрооргдцизмов цд цитдтсльцой среде.Извести способы получеиия ддеиозицтрифосфатд и ддеиозиидифосфдты путем фермецтдтииюго культивирования большого количества дрожжей в среде, содергкдщей аденозиифосфат, Однако выход целевого продукта цри этих способах его получеция весьма низок,По предлагаемому способу, с целью повышения выходы целевого продукты, используюг МИКРООРГДЦИЗМ ШтаММа ВГЕВЬсС 1 ЕПЦП аПИПО- иддепез.В качестве питательной применяют любую среду, содержащуо источники углерода (в ви,е углеводов) и азота, д также цеоргаииче- С 1 СИЕ СОЛИ,П р и м е р 1. 1(ультуру ВгсхсЬас 1 еггцп 1 шшоп 1 арепсэ АТСС М 6872 рызмцожают в среде, содержащей 2 ого гг 1 окозы, 11 пептоцдс 1 оо дрожжевого экстракты, 0,3 соо ГчаС 1 и 30 1 гкг/сг биотица в течеше 24 сай при 30 С.10 огго получеииой культуры засецыктт ц фермецтдтивцую среду следующего состава: глюкоза 100 г, мочевица 6 г, КНРе 01 1 О г, 1(НРОк 10 г, ;1 рожжевой экстракт 10 г, биотиц 30 1 кг, СаС 1, 2 НеО 0,1 г. Все компоцецты растворяют в воде, доводят до 1,г, а р 1-1 ферментативцой среды до стерилизации - до 8 с помоиью Мс 01-1. Г 1 ориии фсрмецгдтиц;ой срс,с 1;20 лл помещают в эрлецмейсровские колбыы 250 .гг и используют после стерилиздпи цыцтоклывс иод давлеием 1 кг/г,г- в гсчеиис5 11) яин, После цырдщивдция культуры ц тсчецие 72 ссс и цее;1 обацляот такое количсстцоддсии;ы, чтооы его коцетрдция состдк 15 лд2,сс/дг,г фврМЕИТдТИ 3 ИОИ СрсдЫ, ПОС:1 С дс 1 Г 1, -ИСЙИ 1 ЕГО 3 ЫращИВдцця В ТЕЧЕНИЕ 24 сгаг В Птд 10 тельной среде получают 2,98 адецозицтрифосфдтд и 0,85,1 г/,л ддеиозицдифосфдтд. Весццццс рН Поддсржц 3 с 1 ОТ аЕжду ПЕйтрдЛЬИОЙ ИС.с 100 КИСГОЙ ПОСЛЕ Доос 113 ГСИИ 51 с;1 ЕЦИцс, Ис 1.ирихер с помощью х 1 ОН, и оиа составляег15 0.,8 13 КОИЦС 13 ЫРсЩИВДЦИ 51, ФИЛЬТРД, ПОГУсСЦ:ый после фильтровдция этой фермеит;пивиой5 сидкости, пропускают через колонку с сцгьИО сгсисииой дииоиообмешой смолой (иИрцМер, 103 СКС 1,сХ 2/ХЛОрцдцОГО тцид). ЦЕЛЕВОЙ20 продукт получают цр 1 элюировдции рдзбдцлецио СО 15 иОЙ кис 10 ОЙ с цейтриз;Иисй с,11 си 1,идтром, обработкой угольным порошком, уцд -ри 3 диие и 0 х.ыждсцием,П р и мер 2. Используют культуру Вгех 11125 сСпцш дшп 10 пагнецев АТСС6872, Рдзмцо.жсиие ведут и среде, содерждц;сй 2 огго глюкоЗЫ, 1,с 3 ПЕПТОцд, 1 гс дрОЖ 51 СЕВОГО ЭКСгрсКТ 11,0,3 о 4 ХаС 1 и 30 гкгг,г биотша, в течение 24 часпри 30 С, 10% полученной культуры здсецд 30 ют ц фсрмецтативцую среду следующего соЧакки 202 о 17 Тираж 626 Форат бум. 60 К 90.к Обьс 0,13 изд. д. ПодписноеЦ 1;Г 1 Коитста по дела изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Цент, пр. Серова, д. 4 Типография, пр. Сапунова, 2 сгава: глюкоза 100 г, мочевипа 6 г, КНвРО О г, КвНРО, 10 г, МАЗО 7 Н О 10 г, биотип 80 дкг, паптетонат кальция 2 лг, Указанные компоненты растворяют в воде и доводят до 1 и. Перед стерилизацией рН фермептативпой среды доводят с помощью ХаОН до 8,0. Поргпи ферментативной среды с внесенным посевом по 20,ил помещают в а 1);енеЙеровске колбы на 250 лл и используют после добавления 3 г/100,л среды СаСОа и стерилизации в автоклаве в течение 10 нин под давлением 1 кг/сага, После выращивания культуры в течение 72 нас в фермептативпую жидкость вносят гупин в количестве 2,цг па 1 дчл фсрмептативной среды. После дальнейшего выращивания в течение 48 час в питательной жидкости получают только 0,26 лглл, рН раино 6,2. Полученный фильтрат после удаления бактериальных клеток из ферментативпой сре ды пропускают через колонку с сильно основной ионообмепной смолой (Довекс 1/х 2/хгоридпого типа). Конечный продукт гуанозипдпфосфат) выделяют элюированием слабой со ляной кислотой. Эту фракцию нейтрализуютводным раствором едкого патра, обрабатыьают угольным порошком, упаривают, охлаждают и выделяют натриевую соль гуанозинди.фосфата,10Предмет пзооретенияСпособ получения три- н дифосфатов аденозина и гуанозипа кульгив;рованпем микроорганизмов на питательной среде с последую щим выделением из среды полученных в результате ишеубации продуктов, отличающийся тем, что, с целью повьппения выхода целевого продукта, используют микроорганизм штамма ВгечЬас 1 егшгп агпгпопадепез.