Способ получения инсулина — SU 570364 (original) (raw)
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ р) 570364 Ооаз Советскик Социалистических Реслублик(51) М. Кл,е А 61 К 37 30.03.76 (21) единением зая Государственный комитет 3) Г 1 риорите публиковано Совета Министров СССРоо делам изобретенийи открытий 30.08,77.(088.8) етень Ме Дата опуб вания описания 05,09.77 ллер-Рожанская, Т, Н. Орлова, Расильева, В. М, Денисова, М. Фитриенко и Д, И. Островскийдовательский институт мясной про(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИН НА Изобретение относнгся к медицинской промышленности и касается получения биологически-активных веществ из органов и тканейживотных.Известен способ получения инсулина путемобработки измельченной поджелудочной железы спиртом, подкисленным сначала серной,а затем соляной кислотами, с последующейдепротеинизацией смеси и выделением целевого продукта 1. 10Однако известный способ не обеспечиваетвысокого выхода инсулина.Целью изобретения является повышениевыхода инсулина.Это достигается тем, что обработку сырья 15спиртом, подкисленным серной кислотой, проводят не более 8 мин, при температуре 14 -16 С, затем в смесь добавляют соляную кислоту до рН 2,0 - 2,2 и продолжают экстракцию в течение 180 - 210 мин, а депротеинизацию осуществляют при рН 4,2 - 5,5.Способ получения инсулина поясняется следующими примерами,Пр имер 1. 1 кг мелкоизмельченной поджелудочной железы крупного рогатого скота 25заливают 3,0 объемами 80-ного спирта. Вэкстракционной смеси устанавливают исходную температуру 14 - 16 С, добавляют 4,5 млсерной кислоты и экстрагируют инсулин неболее 8 мин (рН 3,5). В экстракционную з 0 2) Авторы изобретения Л, Л, Борткевич, Ф, Н, Г М. Ф. Архипова, Л, В. Л. В.Д ль Всесоюзный научно-иссл2смесь добавляют около 25 мл соляной кислоты, продолжают экстракцию при рН 2,0 - 2,2 в течение 3 час, По окончании экстракции в смесь без разделительной фильтрации добавляют раствор щелочи и устанавливают рН 4,5 - 5,0 (ориентируясь на прозрачность раствора), после чего жмых и выпавшие балластные вещества отделяют от экстракта центрифугированием. Экстракт подкисляют серной кислотой рН 3,0 и направляют на сорбцию инсулина сульфокатионитом КУ. Г 1 осле чего ионит отмывают от жира и балластных белков, а инсулин десорбируют аммиачным буфером рН 9,5, Г 1 олученный элюат обрабатывают ацетоном, осаждают цинк-инсулин и проводят кристаллизацию.Пример 2. 1 кг измельченной поджелудочной железы свиней заливают 3,5 объемами 80-ного спирта, В экстракционной смеси устанавливают исходную температуру 15 - 16"С, добавляют 3,3 мл серной кислоты и экстрагируют инсулин в течение 8 мин (рН 3,8). В экстракционную смесь добавляют 23 - 25 мл соляной кислоты и продолжают экстракцию (рН 2,0). Общее время экстракции 3 час. Последующие операции проводятся так же, как указано в примере 1.П р и м е р 3. 1 кг измельченной поджелудочной железы крупного рогатого скота и свиней заливают 3,5 объемами 80-ного спирта,570364 Формула изобретения Составитель С, Малютина Техред Л. ГладковаКорректор Л. Брахннна Редактор Г. Лановая Заказ 1940/5 Изд. М 728 Тираж 693 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж.35, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 добавляют 4,5 мл серной кислоты (рН 4,0) и проводят экстракцию в течение 8 мин при 16 С. В экстракционную смесь добавляют 20 мл соляной кислоты и продолжают экстракцию до 3,5 час (рН 2,2). Последующие операции проводятся так же, как указано в примере 1.Предлагаемый способ позволяет увеличить выход инсулина (в среднем на 30%) по сравнению с известным способом,Способ получения инсулина путем обработки измельченной поджелудочной железы спиртом, подкисленным сначала серной, а затем соляной кислотами, с последующей депротеинизацией смеси и выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью 5 повышения выхода инсулина, обработку сырья спиртом, подкисленным серной кислотой, проводят не более 8 мин, при температуре 14 - 16 С, затем в смесь добавляют соляную кислоту до рН 2,0 - 2,2 и продолжают экст ракцию в течение 180 - 210 мин, а депротеинизацию осуществляют при рН 4,2 - 5,5,Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1. Патент США Мв 3720657, кл, 260 - 112,7, 15 1975.