Способ получения гаплоидов ячменя — SU 1662443 (original) (raw)
СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 51)5 А 01 Н 4/00, С 12 ЫО 4 -ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ВИДЕТЕЛЬСТВУ К АВТОРСКО ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР"Подмосковье" Отделения по Нечерноземной зоне ВАСХНИЛ(56) .пукьянюк С.ф., Игнатова С,А. Получение гаплоидов ячменя с помощью гаплопродюссеров. - Методические рекомендации,Одесса, ВСГИ, 1983, с, 1 - 21. Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии и может быть использовано в селекционно-генетических программах при получении гаплоидных растений методом селективной злиминации хромосом в сочетании с эмбриокультурой.Цель изобретения - увеличение выхода гаплоидных регенерантов,Способ осуществляют следующим образом. Исходные растения Ногсеое но 9 аге (внутривидовые гибриды Г 1 или других поколений) кастрируют и опыляют пыльцой гаплопродюсера Н.ЬоЬозощ. Из завязавшихся зерновок вычленяют дифференцированные зародыши, эксплантируют их на искусственную питательную среду и культивируют п иТго до получения гаплоидных растений, В течение первых 8 - 9 дней после опыления исходные материнские растения выращивают в обычных условиях: при температуре воздуха 25-27 С, относительной влажности 70-80 О, освещенности 30 - 35 501662443 А 1(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГАПЛОИДОВ ЯЧМЕНЯ(57) Изобретение относится к биотехнологии и касается получения гаплоидов ячменя методом гаплопродюсера для работы в области селекционно-генетических исследований растений. Цель изобретения повышение выхода гаплоидных регенерантов, Исходные растения опыляют пыльцой гаплопродюсера, выращивают в течение 8 - 9 сут и подвергают холодовой предобработке в течение 12 - 14 сут при 10 С, после чего эксплантируют зародыши и культивируют их и и 1 го до пблучения регенерантов. 2 з,п, ф-лы, 3 табл,тыс, люкс и 18 часовом фотопериоде, Через 8-9 дней (по истечении критического периода в развитии зародышей, когда полностью завершен процесс элиминации хромосом гаплопродюсера) растения Н, но 9 аге, опыленные пыльцой Н.ЬоЬозОв О подвергают холодовой предобработке при СЬ 10 С. Влажность воздуха в этот период со- Я ставляет 70 - 800. освещенность 3 - 5 тыс, ф люкс при 18-часовом фотопериоде. Холодо- Д, вая предобработка зародышей и ино продолжается в течение 12 - 14 дней, после чего дифференцированные зародыши эксплантируют на питательную среду п нто, недифференцированные - выбраковывают. ф Исходный материал для получения гаплоидов выращивают при этом в вегетационных сосудах, Колосья Н. нодаге, опыленные пыльцой гаплопродюсера, через один и два дня после опыления обрабатывают раствором гибберелловой кислоты (75 мг/л), Вычленение и пересадку зародышей на искусственную питательную среду произво 1662443дят в асептических условиях. Используютсреду РЛукьянюк и Игнатовой.П р и м е р 1. Как указано выше, производят опыление внутривидовых гибридовярового ячменя Н, чцдаге пыльцой гаплопродюсера Н, ЬцЬозщп и двукратное опрыскивание опыленных колосьев гибберелловой кислотой через один и два дня послеопыления. Опыленные растения выращивают при 26 С в течение 8 дней - до полной 10элиминации хромосом гаплопродюсера,После этого осуществляют холодовуюпредобработку опыленных растений при10 С в течение 9-11 дней, вычленяют дифференцированные зародыши иэ зерновок и 15культивируют их и чего с получением гаплоидных регенерантов,Примеры 2,3 осуществляют аналогичнопримеру 1, при этом холодовую предобработку проводят в течение 12 - 14 и 15 - 17, 20дней.Результаты исследований представлены в табл. 1 - 3. Зависимость частоты гаплоидных регенерантов ярового ячменя вэмбриокультуре и чтго от продолжительности холодовой предобработки зародышей иччо (суммарные данные по 7 исходным гибридам Е 1 Н.чцдаге) приведена в табл. 1.Результаты гибридизации Е 1 Н.чцдаге хН.ЬоЬозце и последующей эмбриокультуры и чего с применением холодовой предобработки зародышей и ччо в течение12-14 дней (опыт) и без нее (контроль) приведены в табл,2.Влияние холодовой предобработки зародышей и ччо (экспозиция 12 - 14 дней) навыход гаплоидов и чго приведено в табл.3.Таким образом, холодовая предобработка зародышей и ччо при 10 С в течение12-14 дней до эксплантации на питательную среду существенно повышает частотуполученных в эмбриокультуре гаплоидов ячменя (см. табл. 1 и 3), Процент гаплоидов отТаблица 1Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль Таблица 3 Частота пол енных в эмб иок льт е гаплои ов ячменя,от числа Исходнаяматеринская формавысаженных за о ышей Опыт Опыт Контроль Опыт Контроль Контроль Составитель В.ДемкинТехред М,Моргентал Корректор И.Муска Редактор А.Долинич Заказ 2209 Тираж 365 Подписное ВНИИПИ Государственногд комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж"35, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Исходная ма- теринская форма (гибрид Е 1) Н 339 Н 340 Н 343 Н 362 Н 364 Н 365 Н 375 С мма Н 339 Н 340 Н 343 Н 362 Н 364 Н 365 Н 375 В с е нем 233 404 279 332 402 360 517 2527 30,0 20,1 17,9 22,6 21,6 22,5 21,5 22,0 345 315 597 448 345 397 484 2931 158 253 233 259 376 316 481 2076 10,7 14,9 10,1 15,0 14,2 7,1 16,5 12,6 256 178 511 373 321 358 450 2447 44,3 32,0 21,5 29,0 23,1 25,6 23,1 26,7 132 117 58 138 125 121 153 844 14,4 26,4 1 1,7 18,0 15,3 7,8 17,8 15,0 92 97 116 189 121 74 139 828 53,0 69.2 86,2 54,4 69,6 66,9 72,6 65,8 70 81 50 75 87 81 111 555 37 47 60 67 49 28 80 368 40,2 48,4 51,7 35,4 40,5 37,8 57,6 44,4