Способ получения винбластина, винлейрозина и винкристина — SU 448649 (original) (raw)
Реслублик 61) Зависимый от патента 51) М. Кл. С 07 д 5/00А 611 27/14(22) Заявлено 29.09.71 (21) 1703450/31-16 2) Приоритет3) Государственный комитет Совета 1 Яинистров СССР ла делам изобретений 3) УДК 615,45:615.7(088,8) Опубликовано 30.10.74. Бюллетень4 Дата опубликования описания 20.01,76 крыт(72) Авторы изобретения Иностранцы ла Еванович, Эмил Биттнер, Эстер Дешери,и Кальман Шашле Иностранное предприятиеРихтер Гедеон Вегешети Дьяр Р 71) Заявит Нжна, выИзобретение относится к области медицины, а именно к производству лекарственныхпрепаратов.Известен способ получения алкалоидов израстительного сырья (Ипса гозеп), согласно 5которому сырье предварительно обрабатывают кислотой, экстрагируют 50 - 70%-ным водным раствором метанола, упаривают, подкисляют, фильтруют, повторно обрабатывают несмешивающимся с водой растворителем, выпаривают. Остаток, содержащий сумму алкалоидов, обрабатывают бензолом, хроматографируют на окиси алюминия, элюируют смесьюбензол - метиленхлорид, фракционируют с последующей перекристаллизацией целевых 15продуктов из этанола,Однако технология такого способа слоа выход целевых продуктов недостаточносок.Целью изобретения является разработка 20способа, позволяющего упростить технологиюполучения винбластина, винлейрозина и винкристина и повысить выход целевых продуктов.Достигается это тем, что сырье экстрагируют 90%-ным метанолом с последующей обработкой суммы алкалоидов, например, этанолом, содержащим серную кислоту (рН 4 - 5),кристаллизацией, растворением в смеси хлористый метилен - хлороформ (2: 1), хрома Зз тографированием и элюированием тем же растворителем и дальнейшим ведением процесса известными приемами.П р и м е р 1. 100 кг высушенного, состоящего в основном из листьев, измельченного растения %пса гозеа 1 Сап 111 агап 111 пэ гозецэ 6. Роп выщелачивают три раза 90%-ным водным раствором метанола: один раз - порцией 600 л, и дважды - порциями по 400 л. Отфильтрованные и объединенные метанольные экстракты сгущают при пониженном давле. нии до 140 - 150 л, после чего подкисляют одинаковым объемом 5%-ного раствора серной кислоты в воде до рН - 2 и отфильтровывают образовавшийся осадок темного цвета, Отфильтрованный кислый водный раствор трижды выщелачиван т бензолом порциями по 500 л.После этого при помощи концентрированного водного раствора гидроокиси аммония устанавливают рН 8,5 - 9,0. Затем выщелачивают щелочной водный раствор три - четыре раза бензолом порциями по 600 л. Соединенный бензольный раствор сушат на безводном сульфате натрия или карбонате кальция, отфильтровывают и выпаривают при пониженном давлении. Получают около 700 г коричневой смеси алкалоидов с рыхлой структурой,Алкалоидную смесь растворяют в этаноле, содержащем 10% серной кислоты, величинарН раствора должна быть 4,0 - 5,0, Раствор выпаривают, выпадение кристаллов сульфата виноластина начинается после обработки щеткой стенки сосуда. Кристаллизацию продолжают в течение двух дней при комнатной тем. пературе, а затем отфильтровывают осажденные кристаллы на стеклянном фильтре. В зависимости от качества лекарственного растительного сырья выход составляет 20 - 100 г смеси кристаллов, состоящей из сульфата винбластина, винлейрозина, винкристина и сульфатов сопутствующих алкалоидов. Смесь кристаллов сырых алкалоидных сульфатов растворяют в смеси, содержащей хлористый метилен и хлороформ в соотношении 2: 1, а именно 7 мл на 1 г. Этот раствор хроматографируют на колонке, наполненной стократным количеством А 190 частично дезактивированной водой, и после этого элюируют смесью, содержащей хлористый метилен и хлороформ в соотношении 2: 1. Улавливают фракции по 30 - 50 мл, Первые три фракции содержат преобладающую часть сопутствующих алкалоидов. Винбластин и винлейрозин получают во второй в девят фракциях. Винкристин начинает появляться в 9-й фракции и элюируется до 18-й фракции. Содержащие винбластин, винлейрозин и вин кристин фракции, идентифицированные методом хроматографии на бумаге и тонкослойной хроматографии, отдельно выпаривают досуха, Выход 15 - 5 г винбластина и винлейрозина и 0,6 - 3,0 г винкристина в аморфном сухом остатке. Содержащий винбластин и винлейрозин сухой остаток растворяют в 15-кратном количестве водного этанола. Винлейрозин выкристаллизовывают и отфильтровывают, промывают и сушат. Выход в зависимости от качества сырого продукта 5 - 17 г винлейрозина. Точка текучести 202 - 205 С а + 72" СНС 1 з).Маточный раствор винлейрозина, который содержит только винбластин, разбавляют безводным этанолом до двукратного объема и рН раствора устанавливают 4 при помощи раствора серной кислоты в этаноле. Кристаллизацию сульфата винбластина начинают во время добавки раствора серной кислоты в этаноле. Затем проводят кристаллизацию 16 час в холодильном шкафу. Выход, в зависимости от качества сырья, 15 - 70 г сырого сульфата винбластина.Высушенный и распыленный сырой сульфат винбластина растворяют при комнатной температуре в 20-кратном количестве безводного метанола и к фильтрованному раствору добавляют четырехкратный объем безводного этанола. Для полной кристаллизации винбластина раствор выдерживают в течение 16 час в холодильнике. При перекристаллизации можно достигнуть 90-ного выхода, Выход, в зависимости от качества сырья, 13 - 63 г сульфата винбластина; 1 а = - 28 (СНС 1 з). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4С целью идентифицирования виноластин переводят в основание, и из него перекристаллизацией из эфира получают эфират винбластина. 1 очка текучести: 201 в 2 С; а + 42 (ЫЩ.Отделенный методом хроматографии, содержащий винкристин аморфный сухой остаток 10,6 - 3,0 г) растворяют в 10-кратном количестве безводного этанола и при помощи раствора серной кислоты в этаноле устанавливают рН раствора 4. Для полной кристаллизации сульфата винкристина раствор выдерживают 16 час в холодильнике. Количество отфильтрованного сырого сульфата винкристина составляет 60 - 70"/о от растворенного, содержащего винкристин, аморфного сухого остатка.Для перекристаллизации растворяют сырой сульфат винкристина в небольшом количестве этанола, добавляют затем четырехкратное количество этанола, выдерживают раствор для выкристаллизовывания 16 час в холодильнике и фильтруют, Выход 0,3 - 1,5 г сульфата винкристина. Точка текучести 218 в 2"С.11 р и м е р 2. Полученную по примеру 1 сырую кристаллическую смесь, состоящую, в зависимости от качества лекарственного растительного сырья, из 20 в 1 г сульфатов ьинлейрозина, винбластина, винкристина и сопутствующих алкалоидов, растворяют в воде, и рН раствора доводят до 8 - 9 при помощи аммиака, Алкалоиды четыре раза экстрагируют из раствора встряхиванием каждый раз с 1 л хлороформа. Соединенные растворы хлороформа сушат на безводном сульфате натрия и фильтруют, а затем выпаривают при пониженном давлении досуха, Выход 16 - 80 г смеси алкалоидных оснований. Эту массу растворяют в 3 - 4-кратном количестве смеси, состоящей из бензола и хлороформа в соотношении 1: 1, и после этого хроматографируют на колонке, наполненной 40-кратным количеством А 10 з, частично дезактивиров анной водой. В качестве элюирующей смеси применяют бензол - хлороформ в соотношении 1: 1.11 осле сливания первых 2 - 10 л элюата улавливают фракции 0,6 - 3,0 л. Фракции 1 - 10 содержат винбластин и винлейрозин, фракции 11 и 12 не содержат винбластина и винлейрозина. После этого, в зависимости от количества поданной смеси кристаллов, производят дальнейшее элюирование с 3 - 18 л смеси, состоящей из бензола и хлороформа в соотношении 1: 1, причем улавливают фракции 0,6 - 3,6 л, Фракции 13 - 17 содержат винкристин.Переработку фракций, содержащих винбластин, винлейрозин и винкристин, идентифицированных методом хроматографии на бумаге и методом тонкослойной хроматографии, производят способом, описанным в примере 1,П р едм ет изобретенияСпособ получения винбластина, винлейрозина и винкристина путем экстракции расти448649 Составитель С. Щенева Редактор Н, Спиридинова Техред Н. Куклина Корректор 3. Тарасова Заказ 285/17 Изд. М 1381 Тираж 506 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 тельного сырья (у 1 пса гозеа) водным раствором метанола, сгущением экстракта, подкисления, повторной обработки несмешивающимся с водой органическим растворителем, выпаривания, обработки остатка, содержащего сумму алкалоидов, органическим растворителем, хроматографирования, фракционирования и перекристаллизацией целевых продуктов из этанола, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевых продуктов и упрощения технологии, сырье экстрагируют 90%-ным метанолом с последующей обработкой суммы алкалоидов, например, этанолом, содержащим серную кислоту (рН 4 - 5), кри сталлизацией, растворением в смеси хлористого метилена - хлороформа (2: 1), хроматографированием и элюированием тем же растворителем и дальнейшим ведением процесса известными приемами,