Способ получения антрациклингликозидов — SU 1017173 (original) (raw)
1 К 317 5 ЗЮС 0 АРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЦТЮОПИС ИЗОБРЕТЕНИЯ ПАТЕЙ о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,11-деоксидаунорубицин псдвергаютвзаимодействию с ангидридом трифторуксусной кислоты в безводном хлоро,форме, полученное при этом соответствующее М-трифторацетильное произ.водное обрабатывают иодистым метилом:в присутствии окиси серебра, отделяютполученный таким образом 4-0-метилп.А. -11-деокси-Й-трифторацетилдаунорубицин от одновременно образукицегося4 б-ди-метил".11-деокси-М-трифторацетилдаунорубицина посредствомхроматографии на колонке с силикагелемс использованием градиентного раствора смеси хлороформа с метанолом,,отдельно удаляют из каждого соедине- Ения защитные И-трифторацетильныегруппы с йомощью мягкого щелочногогидролиэа с получением свободного.гликозидногооснования 1 Й-Н ), кото.рое выделяют с помощью обработкираствором хлористого водорода в ме-таноле в виде хлористоводородной солиили в случае необходимости подверга-:и полученное соответствующее 14-бром- (,производное гидролизуют при комнатной.температуре раствором муравьинокислого натрия с получением производного ас)доксорубицнна общей Формулы ( 1 ),(Й-ОН), которое также выделяют в ви-.де хлористоводородной соли.м(72) Джузеппе Кафренэа, Мария Клниэла Руджиэри(54)(57) СПОСОБЛИНГЛИКОЗИДОВ об9 4 Бюл. В 17ссинелли, Сара РипамонИталия)Карло Эрба альваторе и и Да 088.8) ША Е 380312 блик. 1974 . ПОЛУЧЕНИЯ А щей формулы УТРАЦИКи 2нй (ц В 20 ф е Я 1 - Водород и Я- независводород условииявляютс дородом или гидроксил)мо друг от другаили метил, причто й и й неодновременно во.вых полезных соединений, расширяарсенал средств воздействия на жорганизм.Известен способ, получения антлингликозидов путе синтеза послоснованный на известных реакцияхщиты аминогруппы, алкилкрования,-бромирования производных антрацлина и гидролиэа Ц.Указанная цель достигается тчто согласно способу получения ациклингликоэидов общей формулы 2-1.бХ ( 40 0 120 Ж 2вадород или гидрокскл;независкмО друг от друга.водород кли метил при условии, что % и ЙЗ не являются одновременно водородом, 11-деокскдаунорубицкн подвергают взаимодействию с ангидридом трифторуксусной кислоты в безводном хлороформе, полученное при,этом. соответствующее 14-тркфторацетильное производное .обрабатывают иодистым метилом. в присутствии окиси серфбра, отделяют полученный таким образм 4-0-метил-де окск-Й-трифторацетклдаунорубицин от. одновременно образующегося 4-б-ди- -метил-деокси-я-,трифторацетилдаунорубицина посредствфм хроматографии на колонке с окликгелем с испольэо ванием градиентногф раствора смеси хлохлороформа с метанлом, отдельно удаляют из каждого соединения защитные .й-трифторацетильные группы с помощью . мягкого щелочного гидролиза с получе кием свободного глккозидного основания ( Я-Н), которое выделяют с помощью обработки раствором илоркстого водоро-. да в метаноле в виде хлористоводородной соли или в случае необходимости . подвергают реакции,с бромом в хлороформе, и полученное соответствующее 14-бром-производное гидролизуют при комнатной температуре раствором мурьвьинокислого натрия с получением прои водйого доксорубкцина общей б 0 фоГчулы (1)(Р"ОН ), которое также выделяют в виде хлористоводородной соли.П р и м е р 1. Раствор 0,600 г 1,09 ммоль) хлористоводородного 11-, 65 где Йк Йбу - деоксидаунорубицина в безводномацик- хлороформе (60 мл 7 обрабатывают при0 С ангидридом трифторуксусной кислоты. Через 1 ч полученный раствор выно- паривают до сухого состояния при пониющих 5 женном давлении, и остаток суспенивой дируют в воде ( 50 мп), доведеннойдо рН Й с помощью насыщенного воднорацик- го раствора бикарбоната натрия, иедних, экстрагкруют хлороформом ( 2 х 50 мл).за Органическую Фазу отделяют, высуши 14- вают над безводным сульфатом натрияик- и доводят до небольшого объема( 3 5 мл), Затем к ней добавляютем, 100 мп метанола. Через 2 ч полученнтра ный раствор выпаривают до сухого состояния, остаток растворяют в мини".мальком необходимом количестве хлороформа, после чего в результате добавления достаточного количества петролейного эфира осаждают 0,630 гф (1,05 ммоль) 11-деокси-Я-трифтораце 1) тилдаунорубицина (111) в виде желтогокристаллического порошка (выход 96%);т пл 147 149 оС; ЫЗэ= +140 а(с0,1 в МеОН); В/е 607 (М+). Спектр25 протонного магнитного резонансаСЭСМ 3)показывает наличке поглощения привеличинах 129 ( д , СН-5) у 2,37(50 мл 3 в присутствии окиси серебра(1,3 г ) в течение 2 ч при 40 С и постоянном перемешквании. Реакционнуюсмесь фильтруют, твердое веществопромывают хлороформом (Зх 100 мп),после чего соединенные фильтратывыпаривают до сухого состояния припониженном давлении. Неочищенную реакционную смесь очищают в колонке ссиликагелем, элюируют градиентным раствором хлороформа и метанола, чтоприводит к получению 4 ф-метил-деокск-Я-.трчфторацетилдаунорубидина(1 Ч 1 (0,250 г 041 ммоль) ( выход 40) и 4 ф,б-ди-О-метил-деокси-М-трифторацетилдаунорубицина (М(6,200 гу 0,31 ммоль) (выход 30).Соединение(й) (элюированное.хлоро.Формом). имеет температуру плавления128-131 СГсК 3 р = +140 ( с = О, 1. вСНЗОН); Е/е 621 ( М). Спектр протон;ного магнитного резонанса(СэС ФЗ)показывает наличие поглощения при величинах 1,371 сС , СНз-5 ф) у 2,40 (5,СН-СО)р 3,57 (3, С-ОСН ) 4,08(й, С-ОСНОВ) 5,30 (широкйй сигнал,С-Н/р 5 р 53 (широкий сигнал, С-Й)и 13,70, д(Б, С-б-ОН),Соединение(М элюированное раствором хлороформа и метанола (99:1) имеет температуру плавления 124-127 фС;р 3 э= +25 ф. (с = 0,1 в СНЗОН); ъи/е635 (М+), Спектр протонного магниткого резонансЫСЭСВз) показывает наличие поглощения при величинах 1,37Я, СН -Сф); 2,38 (З, СНСО3,55 ( ф, С-ОСЙь); 4,02,(е;, двеароматические группы ОСН ); 5,33( широкий сигнал, Сф-н),Раствор соедийенияОУ), 10,230 г0,37 ммоль) в 0.,25 И водной раствореедкого натра25 мл) выдерживают втечение 30 мин при комнатной температуре к перемешивании. Полученный раствор разбавляют водой (30 мл), доводят до рН 3 при помощи О,25 М раствора соляной кислоты и экстрагкруютхлороформом с целью, удаления загряз няющих примесей. Водную Фазу, доведенную до рН 8,2 с помощью насыщен-ного водного раствбра бикарбонатанатрия, экстрагируют хлороформом(Зх 100 мл; Соединенные органическиеэкстракты высушивают. над безводнымсульфатом натрия, доводят до небольшого объема и подКксляют до достижения значения рН 4,5 о помощью 0,5 Мраствора хлористого водорода в метаноле. Добавление достаточного количества петролейного эфира позволяетосадить 4-0-метил-деоксидаунорубицин (11) в виде его хлористово"дородной соли ( 0,200 г; 036 ммоль)выход 97,28; т.пл. 194-197 С (с разложением); масс-спектр в условияхполевой десорбции, юе/е 525 (,м+).Спектр инфракрасного излучения (КВг)показывает наличие поглощения .при .величинах 1710 (СОЮЗ); .1670, 1620 35и 1590 см "(полосы поглощения хинона ), Видимая часть спектра ультрафиолетового излучения показываетналичие максимального. поглощенияпри значениях 227, 260, 284, 417 40и 434(5%) .нм (Е500, 330, 173(6,9 мл),:н этиловом эфире ортоиура- .вьиной кислоты ( 0,18 мл) обрабатывают 1 рЗ М раствором брОма в хлОРО" 50Форме.,Спустя 2 ч при 10 С полученный раствор выливают в петролейныйэфир (18 мл) и простой диэтиловыйэфир (Зб мл) . Осадок отфильтровывают прОмывают простым диэтиловымэфйром и высушивают в условиях вакуумаПолченный таким образом продуктрастворяют в ацетоне .(5,8 мл) и до"бавляют 0,25 М водный раствор".бромистого водорода (5,8 мл). Эту. реакционную смесь выдерживают и тече,ние ночи при комнатной температуре,затем к ней добавляют 20-ный водный раствор муравьинокислого натрия( 1,35 мл), Этот раствор выдерживают 65 в течение 24 ч при 30"С. Полученную смесь экстрагируют хлороформом с целью удаления загряэнярщих примесей, а затем доводят до рН 7,5 с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют хлороформом. Органическую Фазу проливают водой, высушивают над безводным сульфатом натрия, растворяют в н-пропаноле и доводят до небольшого объема. Добавление 2,1 н,раствора хлористого водорода в метаноле к простого диэтнлового эфира в достаточном количестве для того, чтобы вызвать осаждение, позволяет получить 0,135 г (0,23 ммоль) выход 67,68) 4 -0-метил-деоксидоксору бицнна (,ЧР) в виде его хлористоводородной смолы; т.пл. 189-193 С, масс-спектр, в условиях полевой десорбции, Ь/е (М ). Спектр инфракрасного излучения (КВ) показывает наличие поглощения при величинах 1725 (СОСНтОН)1670 1630 и 1590 см-"(полосы поглощения хннона). Видимая часть спектра ультраф;.олетового излучения в(СНОН) показывает наличие максимального поглощения при величинах.227, 259, 285 5 Ы, 418 и 436 (5 Ь) ( Е673,424, 221, 177 и 151).П р и м е р 3. 4 , б-Ди-О-меткл- -11-деоксидаунорубицин(ЧИКСЕ/20302)Щелочной гндролиз 4, ч-ди-О-метил-деокси-й-тркфторацетилдаунорубицнна ( Ч ) 0,180 г; 0,23 ммоль), произведенный вслед .за процедурой, описанной в примере 1, позволяет получить 4 , б-ди-метил-деоксидаунорубицин в виде его хлористоводородной .соли ЧИ) (О 030 г; 0,05 ммоль) (выход 18), т.пл. 182-185 фС с разложением ; масс-спектр, в условиях полевой десорбции, не 539 МФ). Спектр инфракрасного излучения Ев . показывает наличие поглощения при величинах 1710 (СОСНз) 1670 к 1590 см (полосы поглощения хинона). Видимая часть спектра ультрафиолетового .излучения (в СВЕОН) показывает каличие максимального поглОщения при величинах 223, 260 и 382 нм (Е 353, 326 и 109) .Новые соединения испытывали а на клетках Хела в отношении эффек тивности клонирования в лабораторными условиях и при лечении асцитной лей-. кемии Ру иааей по сравнению с даунорубицином.к доксорубицином,Данные, Представленные в табл. 1, показывают, что 11-деокск 4 -0-метильные производные даунорубицина (р) и даунорубицина (%) являются менее цитотокснчными, чем их исходные соединения; Таким образом, они также являютсяменее токсичными в естественных усло.3 1017173 бвиях и при максимальной допустимой (табл. 2). Особый интерес представдозе показали наличий противоо;ухо- ляет соединение (ч), которое отлича"левой активности, сравнимой с этой ется широким диапазоном активных иактивностью у исходных соединений . нетоксичных дозТаблица 1Влиянйе на эффективность клонирования клетокХела в лабораторных условиях Инг/мп Соединение Даунорубицин Нср 7,2 9,5 бб 4 "0-Метил-деоксидоксорубицинНС М)224 -б-Ди-О-метил 11-деоксидаунорубицинНС 1 (Ч) 1000 П р и м е ч а н и е: Клетки Хела подвергали воздействию лекарственных препаратов в"течение 24 ч, а затем высез вали на чашки. Число колоний определяли 5 дней спустя.Таблица 2 Противоопухолевая активность при лечении асцитнойлейкемии Ру мааей 2,9 аунору бицин 7512 О/10, О/8 3/10, О/б 4,801 6 1651-0-Метилаунорубиц 2/8 б,10, 4 -О-Метил-деокси,6доксорубицинНС %)15 2 214 али лекарственным пр опухолевыми клетками аратом в 1-й й х 100 о ь ни едо/52Т 387 Подписно ул. Проектная,4 Уж Доксорубийин - НСВ (адриамицин )4 -0"Метил-деоксидаунорубицин НС 1 На иааей, воздействов день после заражения Среднее Мремя выжива . Данные пслучены на о кого аутопсического и Данные днух эксперимеВНИИПИ Заказ 340 филиал ППП фПатент 0 4/85 О/8 9 О/8 8 О/7