Способ получения галогенированных производных флуоресцеина, меченных радиоизотопом йода — SU 792878 (original) (raw)
ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республ)кк(45) Дата опубликования описания 07.02.82Государстееииый как) итет по делам изооретений и открытий(71) Заявитель Ленинградский институт ядерной физики им, Б. П, Константинова54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГАЛОГЕНИРОБАННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ФЛУОРЕСЦЕИНА,МЕЧЕННЫХ РАДИОИЗОТОПОМ ЙОДА 1.,ов или Изобретение относится к усовершенствованному способу получения галогенированных производных флуоресцеина, меченных радиоизотопом йода, формулы где К), К Я, и К 4 - атом водородахлора;К 5, ЙБ и Й 7 - атом водорода или 15йода;Х - атом щелочного металла или аммоний.Известен способ получения галогенированного производного флуоресцеина - 20 Бенгальского розового, меченного изотопом 1-131, заключающийся в том, что к раствору соответствующего галоге пиров а нного производного флуоресцеина, - тетрайодтетрахлорфлуоресцеина в фосфатном буфе ре при рН 5,5 - 6,6 добавляют солянокислый раствор йодата калия и йодистого натрия, содержащего радиоизотоп йода без носителя, при комнатной температуре с последующей промывкой раствором соляной ЗО кислоты и извлечением целевого продуктащелочью или переводом его в основание обработкой кислотой. Способ включает следующие операции: 1, Прибавление при комнатной темпсратуре раствора, содержащего 0,7 мл йодистого натрия - 131) без носителя с удельной активностью не ниже 50 мк/мл, 0,1 мл 1%-ного раствора К 10 з и 0,4 мл концентрированной соляной кислоты, к раствору 50 мг Бенгальского.2. Добавление к реакционной смеси 10 мл 1 н раствора ХаОН, 10 мл 10%-ного раствора Ха,ЬО, и 10 мл 5%-ного раствора К 1 и перемешивание,3, Осаждение Бенгальского розового 7 мл концентрированной НС 1 и фильтрование,4. Промывание осадка 3 раза по 10 мл 2%-ного раствора по К 1, 2,5%-ного раствора по ХаЯОз, 0,5%-ного раствора по ИаС 1, подкисленного соляной кислотой до рН 4 - 5.5. Растворение осадка в 10 мл 0,1 н МаОН.6. Добавление 2 мл 10%-ного Ха,с)О, и 2 мл 5%-ного К 1 и перемешивание.7, Осаждение БР 4 мл 1 н НС и фильтрование.40 50 55 60 6 8, Промывание осадка 10 мл 2% -ного раствора по К 1, 2,5%-ного раствора по Ма 50 з, 0,5%-ного раствора по ИаС 1, подкисленного соляной кислотой до рН 4 - 5.9. Растворение осадка в 10 мл 0,1 н ХаОН.10, Добавление 2 мл 10%-ного раствора Ха 80 з и 2 мл 5%-ного раствора К 1 и перемешивание.11. Осаждение БР 4 мл 1 н НС 1 и фильтрование,12. Промывание осадка 2 раза по 5 мл 0,5% -ного раствора ХаС 1, подкисленного НС 1 до рН 4 - 5.13. Растворение осадка БР в 25 мл 2%-ного раствора бикарбоната натрия.Однако этот способ трудоемок и требует больших затрат времени (более 4 часов). Хотя он приводит к большим выходам (90%) конечного продукта в случае йода (период полураспада 8 дней), в случае короткоживущего изотопа йод(период полураспада 13 часов) выходы значительно уменьшатся за счет распада изотопа йодв процессе длительного синтеза, а именно, к концу синтеза его остается меньше, чем 81% (по закону радиоак 0,6931тивного распада А = Аоехр ---- 1, гдеТ 12 ( А - активность йодав момент времени 1, Ао - активность йодав начальный момент времени или исходная активность, Т 1/2 - период полураспада "1 0,693 1К 100% =ехр -- 1-1,2К 100 Ы = 0,693 Х 4 1 Из 81% нераспавшихся атомов д 1 войдут в состав Бенгальского розового только 90%. Поэтому радиохимический выход Бенгальского розового в пересчете на исходное коли 81)(90 чество д 1 составит меньше, чем ---- .=- 100= 73%,Изотоп йодв силу свежих ядернофизических характеристик считается идеальным изотопом для целей медицинской диагностики 1 п что и в настоящее время заменяет в медицинской практике долгоживущий изотоп йод,Кроме того, для этого способа необходимы растворы натрия йодистого с радиоизотопом йода с удельной активностью не ниже 50 мк/мл. Получение растворов Ха"1 с такой удельной активностью является сложной задачей и в большинстве случаев невозможно,Причем этим способом получают только одно галогенированное производное флуоресцеина - бенгальский розовый (3,4,5,15 20 25 30 25 6-тетрахлор,4,5,7 - тетрайодфлуоресцеин),Целью изобретения является ускорение и упрощение процесса получения галогенированных производных флуоресцеина и расширение ассортимента целевых продуктов и, как следствие, ускорение процесса, повышение радиохимического выхода в случае использования короткоживущих изотопов йода, например, йода. Поставленная цель достигается тем, что соответствующее галогенированное производное флуоресцеина, нанесенное на пористый носитель, обрабатывают при температуре 90 - 100 С 0,04 н - 0,3 н солянокислым раствором йодата калия и йодистого натрия, содеркащего радиоизотоп йода без носителя, с последующей промывкой раствором соляной кислоты и извлечением целевого продукта раствором щелочи.Отличие этого способа от известного состоит в том, что используют соответствующее галогенированное производное флуоресцеина, нанесенное на пористый носитель, а солянокислый раствор йодата калия и йодистого натрия, содержащего радиоизотоп йода без носителя, - в концентрации 0,04 н - 0,3 н, и процесс проводят при температуре 90 - 100 С. Этот способ позволяет вместо реакции гомогенного изотопного обмена, идущей при рН ) 5, применяемой в известном способе, использовать реакцию гетерогенного изотопного обмена (рН 5). Возмокность использования гетерогенного изотопного обмена в производных флуоресцеина обусловлена их свойством не растворяться при рН 5. Это свойство и позволяет обрабатывать производное флуоресцеина, нанесенное на инертный носитель, 0,04 - 0,3 н солянокислым раствором, содержащим радиоизотоп йода в виде 1 С 1, а после окончания синтеза отмывать препарат 0,001 н раствором НС 1 от непрореагировавшего йода. Солянокислый раствор, содержащий радиоизотоп йода 1- в виде 1 С, получается внесением раствора йодистого натрия без носителя в раствор йодата калия в соляной кислоте. Снятие производного флуоресцеина с инертного носителя производится обработкой его раствором щелочи. При этом целевой продукт выделяется в виде соли.Этот способ состоит из следующих операций:1. Пропускание раствора, содержащего Ма"1, К 10, и НС 1 (С = 0,04 - 0,3 н), через колонку с производным флуоресцеина, нанесенным на инертный носитель для введения метки.2. Промывание разбавленным раствором НС 1 полученного меченного производного рН 4 - 5 (Сне = 0,001 н);3, Смывание, меченного производного флуоресцеина с носителя раствором ИаОН5 20 25 примерами.П р и м е р 1. 5 мг Бенгальского розового (3,4,5,6-тетрахлор - 2,4,5,7 - тетрайодфлуоресцеина) наносят на стеклянную вату, находящуюся в У-образной стеклянной колонке (длина слоя стеклянной ваты 180 мм, диаметр 4 мм). К 8 мл йодистого натрия - 1 (1) без носителя с удельной активностью 1 мКи/мл и радио- химической чистотой 96% прибавляют 2 мл 0,4 н НС 1, содержащей К 10 з с концентрацией 20 мг/мл, так что конечный раствор имеет концентрацию по НС 1 0,08 н и по К 10 з - 4 мг/мл. Полученный раствор перемешивают и пропускают через колонку с Бенгальской розовой при температуре 90 - 100 С со скоростью 0,5 - 0,6 мл/мин. Далее колонка промывается 15 мл раствора НС 0,001 н и Бенгальский розовый вымывается из колонки 4 мл раствора ИН 40 Н рН 11. Полученная аммониевая соль 3,4,5,6- тетрахлор,4,5,7-тетрайодфлуорецеина, меченная "1 (1), анализируется методом хроматографии на бумаге Ватман1, подвижная фаза - ИН, (а = 0,886) - СН,ОН - Н,О (1; 2: 17). Выход целевого продукта составляет (85 й 5) %, радиохимическая чистота 95%, а удельная активность 1,7 мКи/мл.П р и м е р 2. 5 мг Бенгальского розового (3,4,5,6-тетрахлор,4,5,7 - тетрайодфлуоресцеина) наносят на стеклянную вату, находящуюся в1-образной стеклянной колонке (длина слоя стеклянной ваты 180 мм, диаметр 4 мм). К 8 мл зо 35 40 45 50 55 60 йодистого натрия дз 1 (д 1) без носителя с(т. е. переведение конечного продукта в раствор),Из сопоставления данного способа с известным способом видно, что принципиальное отличие данного способа от известногосостоит в обработке производного флуоресцеина, нанесенного на инертный носитель, раствором, содержащим радиоизотоп йода в соляной кислоте С = 0,04 - 0,3 н; Таким образом, нанесение производного флуоресцеина на инертный носитель упрощает иуменьшает время синтеза. Важным в данном способе является возможность использования растворов йодистого натрия срадиоизотопом йода с низкой удельной активностью, что невозможно в известном способе. При этом конечный продукт можно получить с большей удельной активностью, чем удельная активность исходного йодида натрия (иногда в десятки раз). Это обусловлено тем, что данный способ можно осуществлять в динамическом режиме, т. е. наносить производные флуоресцеина на инертный носитель, находящийся в ко,лонке. Через эту колонку можно пропускать большие объемы исходного раствора радио- изотопа йода, а вымывать конечный продукт значительно меньшим объемом,Способ иллюстрируется следующими удельной активностью 1 мКи/мл и радио- химической чистотой 96% прибавляют 2 мл 0,2 н НС 1, содержащей К 10, с концентрацией 20 мг/мл, так что конечный раствор имеет концентрацию по НС 0,04 н и по К 10, - 4 мг/мл. Полученный раствор перемешивают и пропускают через колонку с Бенгальским розовым при температуре 90 - 100 С со скоростью 0,5 - 0,6 мл/мин. Далее колонка промывается 15 мл раствора НС рН 2(0,01 н) и Бенгальский розовый вымывается из колонки 5 мл раствора ХаОН рН 12. Полученная натриевая соль 3,4,5, 6-тетрахлор,4,5,7- тетрайодфлуоресцеина; меченная д 1 (д 1), анализируется методом хроматографии на бумаге Ватман1, подвижная фаза ХН (а = 0,886) - .СНОН - НО (1: 2: 17). Выход целевого продукта составляет (78+ 5) %, радиохимическая чистота 95%, а удельная активность 1 2 мКимлП р и м е р 3, 5 мг Бенгальского розового (3,4,5,6-тетра хлор,4,5,7 - тетрайодфлуоресцеина) наносят на стеклянную вату, находящуюся в 11-образной стеклянной колонке (длина слоя стеклянной ваты 180 мм, диаметр 4 мм), К 6 мл йодистого натрия - д 1 (д 1) без носителя с удельной активностью 1 мКи/мл и радиохимической чистотой 96% прибавляют 2 мл 1,2 н НС 1, содержащей К 10 З с концентрацией 20 мг/мл, так что конечный раствор имеет концентрацию по НС 0,3 н и по К 10, - 5 мг/мл. Полученный раствор перемешивают и пропускают через колонку с Бенгальским розовым при температуре 90 - 100 С со скоростью 0,5 - 0,6 мл/мин. Далее колонка промывается 15 мл раствора НС рН 4 (0,0001 н) и Бенгальский розовый вымывается из колонки 4 мл раствора МН,ОН рН = 10,5. Полученная аммсниевая соль 3,4,5,6-тетрахлор,4,5,7 - тетрайодфлуоресцеина, меченная 1 ("Ч), анализируется методом хроматографии на бумаге Ватман1, подвижная фаза Х-з (а = 0,886) СНЕОН - НО (1: 2: 17), Выход целевого продукта составляет (79-5) %, радиохимическая чистота 95%, а удельная активность 1,2 мКи/мл.П р и м е р 4. 5 мг 4,5-дийодфлуоресцеина наносят на стеклянную вату, находящуюся в .1-образной стеклянной колонке (длина слоя стеклянной ваты 180 мл, диаметр 4 мм). К 8 мл йодистого натрия - "1 ("Ч) без носителя с удельной активностью 1 мКи/мл и радиохимической чистотой 96% прибавляют 2 мл 0,4 н НС 1, содержащей К 10 З с концентрацией 20 мг/мл,так что конечный раствор имеет концентрацию по НС 0,08 н и по К 10 э - 4 мг/мл. Полученный раствор перемешивают и пропускают через колонку с 4,5-дийодфлуоресцеином при температуре 90 - 100 С со скоростью 0,5 - 0,6 мл/мин. Далее колонка промывается 15 мл раствооа НС пНl х1 20 Зу но ха о хб 25где К СССР протоСоставитель И. Дьяченко Текрсд Л. Куклина,"орректор С. Файн Титова Речакч оде;:с аое ткныгив аказ 25/33 Изд Р 104 Тираж 447ПО Поиск Государственного комитета СССР по делам нзобретенн113035, Москва, Ж, Раушскав наб., д. 4/5 Тип, Харьк. фил. пред. сПатентэ 3 (0,001 н) и 4,5-дийодфлуоресцеин вымывается из колонки 4 мл раствора .ХН 40 Н рН 11. Полученная аммониевая соль 4,5- дийодфлуоресцеина, меченная дз 1 (дз 1), анализируется методом хроматографии на бумаге Ватман1, подвижная фаза - МН, (а = 0,886) - С,Н,ОН - Н,О (1: 2: 17). Выход целевого продукта составляет (70-1-5) %, радиохимическая чистота 95%, а удельная активность 1,4 мКи/мл,П р и м е р 5. 5 мг 3,6-дихлор,4, 5,7-тетрайодфлуоресцеина наносят на стеклянную вату, находящуюся в Б-образной стеклянной колонке (длина слоя стеклянной ваты 180 мм, диаметр 4 мм). К 8 мл йодистого натрия - "1 (д 1) без носителя с удельной активностью 1 мКи/мл и радиохимической чистотой 96% прибавляют 2 мл 0,4 н НС 1, содержащей К 10 з с концентрацией 20 мг/мл, так что конечный раствор имеет концентрацию по НС 1 0,08 н и по КОз - 4 мг/мл. Полученный раствор перемешивают и пропускают через колонку с 3,6-дихлор - 2,4,5,7 - тетрайодфлуоресцеином при температуре 90 в 1 С со скоростью 0,5 - 0,6 мл/мин. Далее колонка промывается 15 мл раствора НС 1 рН 3 (0,001 н) и 3,6-дихлор,4,5,7-тетрайодфлуоресцеина вымывается из колонки .4 мл раствора ХН 4 ОН рН 11. Полученная аммониевая соль 3,6-дихлор,4,5,7 - тетрайодфлуоресцеина, меченная цз 1 (1 е 1), анализируется методом хроматографии на бумаге Ватман1, подвижная фаза - 1 чНз (а = 0,886) СН 5 ОН - Н,О (1: 2; 17). Выход целевого продукта составляет (85 5) %, радиохимическая чистота 95%, а удельная активность 1,7 мКи/мл,Использование этого способа получения галогенированных производных флуоресцеин, содержащего радиоизотоп йода, обеспечивает по сравнению с существующими способами следующие преимущества:1. Существенно упрощается и ускоряется процесс (0,5 - 1 час) получения меченного соединения за счет исключения длительных операций выделения и очистки конечного продукта,2. Существенно повышается выход при использовании короткоживущих изотоповйода (до 85+.5) %.3. Способ дает возможность работать с растворами с низкой удельной активностью(до 1 мКи/мл) и получать конечный продукт с более высокой удельной активностью вследствие использования реакции гетерогенного изотопного обмена в динамическом 5 режиме4, Позволяет получить кроме Бенгальского розового и другие галогенированные производные флуоресцеины, меченные радиоизотопом йода - 4,5-дийодфлуорес- О цеин и неописанный ранее 3,6-дихлор 2,4,5,7-тетрайодфлуоресцеин,Формула изобретения 15 Способ получения галогенированных производных . флуоресцеина, меченных. радиоизотопом йода, общей формулы К 2 Кз и К 4 - атом водорода илихлора;К 5, Ъ и К 7 - атом водорода илийода;30 Х - атом щелочного металла или аммоний,обработкой галогенированного производного флуоресцеина солянокислым раствором йодата калия и йодистого натрия, содержаз 5 щего радиоизотоп йода без носителя, с последующей промывкой раствором соляной кислоты и извлечением целевого продукта раствором щелочи, от л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и упрощения 40 процесса, а также расширения ассортимента целевых продуктов, используют соответствующее галогенированное производное флуоресцеина, нанесенное на пористый носитель, а солянокислый раствор йодата ка лия и йодистого натрия, содержащегорадиоизотоп йода без носителя, - в концентрации 0,04 - 0,3 н и процесс проводят при температуре 90 - 100 С. Источник информации, принятый ввнимание при экспертизе:1. Авторское свидетельство340227, кл. А 61 К 43/00, 03.07,69 (тип),
Способ получения галогенированных производных флуоресцеина, меченных радиоизотопом йода