Рнс312 — Метка (original) (raw)
Способ конструирования плазмидного вектора рнс314 или рнс312, или рнс624
Номер патента: 1443806
Опубликовано: 07.12.1988
МПК: C12N 15/00
Метки: вектора, конструирования, плазмидного, рнс312, рнс314, рнс624
...геле,Концы молекулы содержащей однотяжевые участки, пслуча.ные при расщеплении ферментами ВашН 1 и НпГ 1,превращают в тупые концы субфрагмен з144380 том Кленова с помощью ДНК полимеразы 1,а затем рециркуляризируют Т индуцированной полинуклеотидной лигазой. Легированные ДНК трансфор 5 мируют в клетки НВ 101 и выделяют един:чные .:олонии. Получают плазмиду рНС 312, которую нельзя расщепитьэндонуклеазой ВашН 1, но можно линеаризировать ЕсоК 1 и получить фрагменты 10 1495 вр и )1 э вр после расщепления НпГ 1. Для получения вектора с большим числом копий подходящего для клонирования ДНК фрагментов с тупыми концами, плазмиду рНС 312 расщепля ют рестрикционными эндонуклеазами ЕсоК 1 и Нпй 111, а затем из агарозного геля выделяют фрагмент...