Гидролазы эфиров карбоновых кислот — C12N 9/18 — МПК (original) (raw)
Способ выделения ацетилхолинэстеразы из эритроцитов теплокровных животных
Номер патента: 181980
Опубликовано: 01.01.1966
МПК: C12N 9/18
Метки: ацетилхолинэстеразы, выделения, животных, теплокровных, эритроцитов
...Затем эритроциты отмывают шесть-семь раз 0,9%-ным раствором поваренной соли. К 1 л отмытых эритроцитов для гемолиза их добавляют 6 л воды и 68 лл 1 М раствора уксусной кислоты. Получающаяся при этом строма оседает в течение 10 - 24 час. Гемолизат над осадком стромы декантируют с помощью сифона, а осевшую внизу строму взмучивают в 10 л 0,01 М раствора ХаНРО, После оседания стромы через 10 - 24 час жидкость удаляют. Для удаления ХаН,РО к осадку добавляют 2 л дистиллированной воды и центрифугируют. Плотный осадок стромы смешивают с 500 лл фосфатного буфера, и полученную смесь подвергают лиофильной сушке. К сухой строме добавляют октиловый спирт и через 10 лиц центрифугируют, Из осадка стромы фермент экстрагируют 0,01 М фосфатным...
Способ получения псевдохолинэстеразы
Номер патента: 187238
Опубликовано: 01.01.1966
Авторы: Бейлинсон, Домбровска, Макарова, Торбан
МПК: A61K 38/46, C12N 9/18
Метки: псевдохолинэстеразы
...и диализуот в течение 48 час. К диализату, разбавленному до содержания в нем белка не более 5%, добавляют 0,2 объема 2/о-ного раствора уксуснокнслого свинца, отстаивают 30 мин и отделяют выпавший балластный белок центрифугированием. К прозрачному раствору добавляют 320 г/л сернокислого аммония, отделяют белок центрифугированием, промывая его 0,6 объема 32%-ного раствора сернокислого аммония, к центрифугату вместе с промывными водами добавляют 40 г/л сульфата аммония и отфильтровывают выпавший осадок, содержащий некоторое количество псевдохолинэстеразы. Осадок промывают 0,6 объема 36%-ного раствора сульфата аммония, диализуют и сублимируют. Получают холинэстеразу с невысокой активностью, используемую для специальных целей. К...
Штамм arthrobacter simplex инми-6 продуцент ацетилхолинэстеразы
Номер патента: 395435
Опубликовано: 01.01.1973
Авторы: Имшенецкий, Кириллова, Попова
МПК: C12N 1/20, C12N 9/18
Метки: arthrobacter, simplex, ацетилхолинэстеразы, инми-6, продуцент, штамм
...мочевину и пелтон, хуже использует нитраты; ооразует о ацетилхолинэстер азу и уреазу, активностьацетилхолинэстеразы после :вгх с,ток культивирования на синтетической среде с глюозой составляет 60 ед.П р и м е р. Г 1 редложенный штамм выращивают на среде следующего ссстава (в %):К 2 НР 0 - 0 1, КНеР 04 0,01, ГМН 4);НР 00,2; Мд 504 - 0,03; Са С 1 - 0,01; Ма С 1 - 0,01; Мп 504 и Ге 504 - следы, дрожжевой экстракт 0,01, глюкоза - 1,0; в качестве индуктора до бавляют ацетилхолин - 0,01 Ч 0, рН - 7,0.395435 П р ед м е т,из об р е ген ия Составитель С. ЩеневаТехред Е. Борисова Редактор Д. Пинчук Корректоры Е, Михееваи Е. Миронова Заказ 693/2275 Изд. ЛЪ 944 Тираж 467 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам...
Способ получения иммобилизованной липазы
Номер патента: 883173
Опубликовано: 23.11.1981
Авторы: Авлянова, Землянская, Рахимов
МПК: C12N 9/18
Метки: иммобилизованной, липазы
...трижды дистиллированной водой (по 5 мл). Осадок полиамида отделяют декантацией или центрифугированием (5 мин, 2000 об/мин). К влажномуосадку добавляют 2 мп раствора госсипола в 0,1 М Ооратном буфере с рН8,8 с концентрацией 0,05 мг/мп и вьдер.живают при 80 С в течение 1 ч. Избытокгоссипола удаляют центрифугированием(5 мин, 2000 об/мин) с последующим про.мыванием осадка ацетоном(3 х 2 мл),Для подсоединения фермента к модифицированному таким образом полиамидному порошку, его промывают 0,1 М боратным буфером с рН 8,8 (2 х 5 мп) и добавляют 1 мп раствора липазы с концентрацией 10 кг/мл и инкубируют в течение,6 ч при 4 С. Полученный целевой Из таблицы видно, что применениегоссипола при прочих равных условияхпозволяет повысить каталитическую...
Способ очистки микробных липаз методом аффинной хроматографии
Номер патента: 943278
Опубликовано: 15.07.1982
Авторы: Арен, Букбарде, Волкова, Грузин, Лебедева, Лестровая, Рубан
МПК: C12N 9/18
Метки: аффинной, липаз, методом, микробных, хроматографии
...мг экв/г.Активироваиный силохром загружают в колбу с 80 мл амилового спиртаи перемешивают при 100-105 С в течение 1 ч, Фильтруют, промывают этайолом и сушат, Содержание амиловыхгрупп приблизительно 0,05 мг экв/г,Так как алкильные группы не поддаются прямому определению, то ихсодержание определяется из расчета,что степень превращения изоцианатных в алкильные около 80.П р и м е р 2. Очистка липазы насорбенте с октиловой группой с применением при десорбции ступенчатогоградиента концентрации тритона х.Приготовление исходного ферментного препарата.Исходным материалом для очисткислужит ферментный препарат, полученный осаждением сульфатом аммониябелков иэ культуральной жидкостимакроскопического гриба Юео 1 г 1 спщпав 1 егоМев, выращенного.на...
Способ очистки липазы от пигментов
Номер патента: 655150
Опубликовано: 07.06.1984
Авторы: Крахмалец, Крючков, Новикова, Орещенко, Светлов
МПК: A61K 38/46, C12N 9/18
...анионит на основехлорметилированных сополимеров стирола и дивинилсульфида, модифицирвванных триметиламином.Предлагаемый способ очистки липазыАяр. ажащягь с повышенной активностью целевого продукта, заключаетсяв обработке водных растворов фермента адсорбентом, представляющим собой 4 Омакросетчатый сильноосновный анионитна основе хлорметилированных сополимеров стирола и дивинйлсульфида, моддифицированных триметиламином, с последующим ) осаждением целевого продук 45кта ацетойом и высушиванием.Предпочтительно процесс проводятследующим образом.Культуральную жидкость Аяр. ажащо.г 1 обрабатывают макросетчатым сильноосновным анионитом на основе сополимеров стирола и дивинилсульфидамодифицированных триметиламином,(АВС)...
Способ получения микрокапсулированной липазы
Номер патента: 1112056
Опубликовано: 07.09.1984
Авторы: Айсина, Давранов, Демина, Казанская, Лебеденко, Рахимов, Тенцова
МПК: C12N 9/18
Метки: липазы, микрокапсулированной
...парафин.Способ осуществляют следующим образом.Порошок фермента в соотношении 1."0 25-075 смешивают с водорястворимым няполннтелем, в качестве кот ар от о используют желатин, эфиры целлюлозь., крахмал, поливиниловый спирт, растворяют в небольшом количестве воды и высушивают, Полученную пластинку измельчают и диспергивчот в растворе ацетилфталилцеллюлозы в ацетоне: К полученной суспенэии приливают жидкий парафин и раствори- тель испаряют при комнатной температуре и нормальном давлении. Полученные микрокапсулы отделяют, промывают и сушат. В результате липаза полноцтью сохраняет свою активность. Оболочка из ацетилфталилцеллюлозы устойчива к действию желудочного сока и растворима в кишечном соке.Исгользование дпя капсулирования смеси...
Ингибиторы холинэстераз
Номер патента: 1114698
Опубликовано: 23.09.1984
Авторы: Бровко, Жуковский, Колчанова, Розенгарт, Скворцов, Фарцейгер
МПК: C12N 9/18
Метки: ингибиторы, холинэстераз
...реактива Элмана, т.е. 5,5-дитио-бис-(2-нитробензойной кислоты), в 100 мМ фосфатном буфере (РН 7,5) добавляют 1 мл раствора фермента, 1 мл 0,5 М раствора КС 0, 1 мл Н 20 (в контрольной пробе) или 1 мл .раствора ингибитора (в опьггной пробе) и затем 1 мл 2,5 мМ раствора субстра 98 2та ацетилтиохолина (АТХ). В качествефермента используют или АХЗ из эритррцитов крови человека, или БУХЭиз сыворотки крови лошади (серийныеобразцы препаратов). В качестве ингибитора используют или предлагаемоечетвертичное фосфониевое соединение,или известное как ингибитор четвертичное аммониевое соединение.С помощью фотоэлектроколориметраФЭК - 5 ЬМ (светофильтр У 3) измеряютвремя (с) за которое оптическая плотность реакционной смеси возрастаетна величину 0,1. (ск...
Способ получения ферментного препарата нигедазы
Номер патента: 1118673
Опубликовано: 15.10.1984
Авторы: Корчагина, Рудюк, Чернобай
МПК: C12N 9/18
Метки: нигедазы, препарата, ферментного
...липолитическую активность препарата в 2-3 раза.Нигедаза представляет .собой порошок темно-бурого цвета растворимый в воде, обладает выраженным липолитическим действием, которое характеризуется способностью расщеплять природные жиры и масла (кукурузное, подсолнечное, хлопковое, абрикосовое, льняное, оливковое масло и свиной жир).При 2003 влажности липолитическая активность составляет (фиг.1) 110 тыс.ед./г, что соответствует требованиям нормативно-технической документации. Повышение влажности свыше 300 нецелесообразно, так как далее липолитическая активность находится на одном уровне с липолитической активностью при влажности 300 .Экстракцию ферментного препарата можно проводить экстрагентом с рН 9,5- 11,5,так как в интервале этих величин...
Способ получения иммобилизованной липазы
Номер патента: 1696475
Опубликовано: 07.12.1991
Авторы: Давранов, Саттаров, Табак
МПК: C12N 11/08, C12N 9/18
Метки: иммобилизованной, липазы
...количестве 1-2 мг на 1 г носителя, апосле обработки бифункциональным реагентом проводят модификацию носителя пальмитиновой кислотой, устанавливая соотношение 20 - 30 мл пальмитиновой кислоты на 1 г носителя.Использование предлагаемого способа позволяет увеличить удельную активность целевого продукта в 3,0-3,4 раза (от 14 до 42-48 ед,/мг носителя).П р и м е р 1. 1 г порошкообразного полиамида обрабатывают 4 н. НО (100 мл) при 40 С в течение 2 ч, затем промывают трижды бидистиллированной водой (по 500 мл), Осадок полиамида отделяют декантацией или центрифугированием (5 мин, 2000 об/мин). Затем суспендируют в 10 мл диоксана и прибавляют 1 мг 2,4-толуолдиизоцианата, 3 капли триэтиламина. и смесь медленно перемешивают в течение 4 ч при 20 -...
Способ получения ферментного препарата нигедазы
Номер патента: 1740417
Опубликовано: 15.06.1992
Авторы: Гухман, Переяславец, Сушинская, Устинников, Федоренко
МПК: C12N 9/18
Метки: нигедазы, препарата, ферментного
...и концентрирования осуществляют при 5 С и 0,015 МПа до содержания сухих веществ в концентрате 8,1% с переходом в фильтрат растворенных веществ с мол.м. 10 тыс,дальтон, не обладающих липолитической активностью и являющихся балластом, Полученный фильтрат в количестве 1580 см возвращают на стадию экстракции, целевой продукт в количестве 200 см с содержанием сухих веществ 8,1% изактивностью 750 ЛЕ/мг направляют на сублимационную сушку, которую проводят ступенчато при температуре от минус 45 до5 плюс 30 С. Из 700 см исходного экстрактао зполучают 6,7 г готового препарата с активностью 121 Л Е/мг, Из 200 см концентрированного экстракта получают 16,5 г готовогопрепарата с активностью 750 ЛЕ/мг. В10 фильтрат перешло 0,5 г растворенных...
Способ очистки микробной эстеразы
Номер патента: 1839190
Опубликовано: 30.12.1993
Авторы: Алешина, Антипова, Беспалова, Данилова, Карабанова, Молодова, Соловьева, Федорова
МПК: C12N 9/18
...мл) - 80(16,8 гс.а,/40 мл) от насыщения. Полученный осадок растворяют в 20 мл 0,02 М фосфатном35 буфере рН 7,5, содержащем сульфат аммония 400 насыщения и наносят на колонкуобьемом 55 мл с гидрофобным сорбентомВцику-ТЯК 650, уравновешенным тем же буфером, Элюцию балластных белков прово 40 дят 0,02 М фосфатным буфером с сульфатомаммония с 200 насыщения рН 7,5, Ферментдесорбируют градиентом сульфата аммония20 до 0 в 0,02 М фосфатном буфере, соскоростью элюции 16 мл.ч/см, собирают45 фракции обьемом 5,5 мл. Объединяют фракции, содержащие эстеразную активность,получают 30 мл раствора фермента. Этотраствор наносят на колонку объемом 800 млс сефакрилом 3-200, уравновешенным 0,1 М50 Фосфатным буфером рН 7,1. Фракции, содержащие эстеразу,...