Emmanuel Isaiah Smith | University of Dayton (original) (raw)
Papers by Emmanuel Isaiah Smith
Targeted individuals are typically not trained in military combat, war strategy, hand-to-hand com... more Targeted individuals are typically not trained in military combat, war strategy, hand-to-hand combat, advanced self-defense tactics, or the like. The treasonous, traitorous, unconstitutional, politically bumpy, covert frontal lobotomy that are given to targeted individuals that cannot withstand this state-sanctioned assault on them, is nothing but military industrial politically inept, constitutionally illiterate cowardice. There are deceased Australopithecus' that have more common sense than to allow such an misanthropic congressional misadventure. Freedom, democracy, and national security are nonexistent here in the United States of America. In its thuggish gangstalking campaigns against its own citizens, thuggish, inbred, aloof, dull, dummies are mobilized in units against the targeted person with no mission outside the annoyance, harm, or instigation of verbal or physical contact with the target. The United States federal government foolishly continues in spite of this to call itself a democracy and a constitutional republic. It needs to declare itself a fascist state and be honest with its citizens. The "national security" state that America is now, allows for state-enabled thuggery at a cost of $32T for the taxpayer. The gangstalking mechanism has the capacity to go worldwide. This is not something I want to see. I do not want to see other countries, those which have a genuine sense of pride, commonality, and nationalism unlike the United States, to fall prey to the political, legislative, and socioeconomic mud pit known as gangstalking. It's easy-to-follow patterns and its "rewards" system for its participants create an incentive for the emptyheaded thuggish sociopaths that participate in it.
Башкаларга тәэсир итмәгәннәр сугыш, стратегия, кул белән көрәшкә, югары үз-үзен яклауга дучар ите... more Башкаларга тәэсир итмәгәннәр сугыш, стратегия, кул белән көрәшкә, югары үз-үзен яклауга дучар ителмәде. Трезсон, трезсон, конституцион булмаганлык, сәяси күтәрелеш, яшерен фронталь лобэктомия кимсетми, һәм хәрби тармакның компетенциясе һәм конституцион иллюминационлыкның куркаклыгы.
Шуңа күрә, Australopithecus явыз илгә караганда күбрәк.
Азатлык, демократия һәм милли иминлек Америка Кушма Штатларында да бер үк түгел. Үз гражданнарының гангстеризм кампаниясендә хулиганнар, боерык, ваемсызлык, думлык, думлык армиягә җәлеп итү белән дәвалана, һәм тәртипсезлек, җәрәхәт, фаш итү, сүз элемтәсеннән башка бурыч юк.
Шулай да АКШ федераль хакимияте аны акылсыз рәвештә демократик конституцион республика дип атый. Фашист дәүләтен игълан итегез, ватандашлар эчкерсез.
АКШ хәзер "милли иминлек", Сю Гу Сю тага, 32 триллион АКШ доллары.
Төркем механизм көче белән дөньяга китә. Бу минем күргәнем түгел. Министрлар АКШтан аерылып торган башка илләрне күрергә теләми, чын горурлык, уртаклык, милләтчелек, фирка хөкүмәте һәм закон чыгару чокырына корбаннар китерергә теләми.
Аның җиңел генә артыннан бара торган стиле, катнашучылар бүләкли, һәм буш рогаллар аның өчен каршы килә.
Җәмгыятьне күзәтү, җәмгыятьне саклау яки җәмгыятьне саклау протоколлары өчен меңләгән милли иминлек законнарына керү җиңел. АКШның фиркасе һәм трекы – кәнганлыларга ярдәм, федераль дәүләтнең иминлеге халыктан яшерелгән, шуңа күрә саклану департаменты һәм Юстиция идарәсенең мөмкинлекләрен кую кыен. Чен Ю бу офисның илле дәүләт белән килешә дип уйлаган, мондый боегау, үрмәләү, үрчетү һәм констицион булмаган афәтләр бөтен җирдә булырга мөмкинлек бирә, Америка ватандашлары һәм граждан ирекләре хокукларын боза.
ایالات متحده امریکا یک منفور بین المللی است. سفرای خارجی فدرال ان رسما تلاش می کنند، برای و از طر... more ایالات متحده امریکا یک منفور بین المللی است. سفرای خارجی فدرال ان رسما تلاش می کنند، برای و از طرف ایالات متحده، برای نفوذ در کشورهای دیگر، به عنوان بخشی از مجموعه امنیت ملی خود، باندهای گفتگو، از جمله ازار و اذیت جامعه، mobbing محل کار، و قتل قانونی و تلاش برای مکانیسم های قتل به عنوان قانون. ایالات متحده نمی خواهد تنها کشور در جهان باشد که مکانیسم گفتگو با باندهای تبهکار را فعال، تامین مالی و بسیج می کند. این قانون در ۱۱ سپتامبر ۲۰۰۱ اقدامات امنیت ملی را از طریق هزاران علامت نادیده گرفته شده که مخفیانه در قانون امنیت ملی ان قرار داشت، تصویب کرد. به نوبه خود، قوه مقننه فدرال ایالات متحده رسما قانون اساسی ایالات متحده را از دست داد، منشور حقوق ایالات متحده را لغو کرد و خود را به عنوان یک دموکراسی و به عنوان یک جمهوری قانون اساسی رد کرد. در عوض، این یک چک سفید (به لطف مالیات دهندگان امریکایی) به مجتمع صنعتی نظامی، کمک های ان و پروتکل های نظارتی پرداخت به بازی ملی است. مجتمع صنعتی نظامی، مراکز همجوشی ان، و تاثیر ترکیبی انها بر مکانیسم بسیج خیابانی و اراذل و اوباش که توسط فدرال هدایت می شود، در هر شکاف دولت محلی، ایالتی و فدرال، شرکت های امریکایی، هالیوود، رسانه های عمومی امریکا نفوذ کرده است، که همه انها در معرض پروتکل امنیت ملی فاجعه بار است که کنگره ایالات متحده، وحشت زده و وحشت زده در مورد حوادث 11 سپتامبر، احمقانه، حواس پرت، و سهل انگارانه گذشت و رها بر جهان در بزرگ. کنگره ایالات متحده بر جامعه یک واحد بسیج اراذل و اوباش با بودجه مالیات دهندگان خیانتکار به نام gangstalkers راه اندازی کرده است. و انها از یک سیستم سیگنال های فیزیکی و کلامی با یکدیگر برای پیدا کردن، مختل کردن، جلوگیری، اسیب رساندن و / یا ازار و اذیت یک فرد هدف استفاده می کنند. -----------
امریکا، به عنوان یک قلمرو یکپارچه، به عنوان یک کشور مستقل، و به عنوان یک نهاد دولتی سیاسی تاسیس شده، گناهکار جنایات و تخلفات بزرگ، خیانت بزرگ و جنایت علیه بشریت است. این چیزها در مورد ایالات متحده امریکا درست بود حتی قبل از اینکه باندهای تبهکار در اینجا قانونی شوند. هزینه های بالای ماجراجویی های جنگی در خانه و خارج از کشور، این کشور، موسسات شرکتی ان، دولت های فدرال، ایالتی و محلی یا جامعه مذهبی ان را از پیدا کردن شادی در پروژه های دلقک، خیانت، اسراف، هزینه بی اثر و در نهایت بیهوده هزینه های صنعتی نظامی که منجر به تحریک هر تلاش جنگی امریکا از کره شده است، متوقف نکرده است. به ویتنام، به عراق، به افغانستان، باعث ده ها میلیون تلفات انسانی در حالی که تولید تریلیون دلار مالیات دهندگان برای صنعت ماشین جنگی نظامی ایالات متحده است. Gangstalking یکی دیگر از این شرکت های امریکایی اراذل و اوباش است. امریکا معتقد است که به راه انداختن یک جنگ پنهانی علیه شهروندانش به کشورهای دیگر نشان خواهد داد که کنترل» خود را بر مردم دارد. با 32 میلیون دلار بدهی به موسسات بانکی خود، ایالات متحده حتی اقتصاد خود را کنترل نمی کند. دست نشانده های کنگره که بخش های بی کفایتی از قوانین امنیت ملی را تصویب می کنند که اجازه تهدید جنایی توسط یک دسته از باندهای تبهکار را می دهد، امریکا را برای
向人者,未尝受战斗、战略、肉搏战、高自卫也。 叛国、叛人、违宪、政之颠沛、隐额叶切除之术,予之不胜其可者,兵工无能、宪法文盲之懦也。 故南方古猿多于恶人之国。 自由、民主与国安在美利坚合众国... more 向人者,未尝受战斗、战略、肉搏战、高自卫也。 叛国、叛人、违宪、政之颠沛、隐额叶切除之术,予之不胜其可者,兵工无能、宪法文盲之懦也。
故南方古猿多于恶人之国。
自由、民主与国安在美利坚合众国无有也。 于本国公民流氓帮踪运动中,流氓、近亲繁殖、冷漠、迟钝、假人为动员成军所待,自扰扰、伤害、扇动、口体接触之外,无所任务。
虽然,美国联邦政府犹愚称民主宪政共和国。 宣布法西斯国,公民诚之。
美国今之"国安",许国许暴徒,纳税人本为32万亿美元。
群辈随机制有力走向世界。 此非吾所欲见也。 臣不愿见他国,其与美国异,有真自豪感、共性、民族主义之国,为党迹之政,立法泥坑之牺牲。
其易循之式,参与者赏之统,为之空头流氓反者激劝。
甚易入到数千纸国家安立法中,为常社区监控、社区警务或社区护协议。 美国之党与踪计为纳税人助、联邦之国安程隐于众,故难定于国防部司法部之机。 臣愚以为此办公室与五十州合心,许此近亲繁殖、不育种、无宪法之劫无所不在,侵犯美国公民权利公民自由。
美国易劫者,不为恐怖分子顽所胁,可以验美国品牌流氓小丑。 人之所须者,唯以其名、其名之变体、其生统计数据、其生统计数据之变体密输联邦授权、纳税人助之数据库,而许其生徒之助以迹之。
9/11事后国家死亡行军,美国国会于无法仓卒许之,谓之帮党踪迹。 此联邦政府之与同步也,使群默、流氓、烦骚扰者、攻击者,循口、身、车、流氓、蔽,使以罪胁流氓小丑。
联邦、州、地方立法投票管理不善,加以国家安用,已输数万亿美元于军工联合体纳税人资,此一国安兵机器买系统,安法,使流氓小丑最高。
特以故20中,美国联邦政府立法、授权、主议、参赞恐怖主义。
美国士兵常不知其所以击外国兵之细故也。 或者,在美国陆军可支可支可观之钱,有善福利待遇,给养老金致仕者。
美国国会已可公民其恐怖主义合法化。 此恐怖主义文党随之流迎暴徒也。
这些团伙跟随的多少不同包裹。 或富或贫,或受高等教育,或学障碍者,或种或夷,或一,皆联邦暴徒也。
美利坚合众国欠其国中央银行32,000,000,000,000,000.00美元之责,此一怪也,当一国而非公共利益,高度重视其军工综合体,市数万亿美元之兵机器,与汝兵联邦法司不限之权以诉无戒之公民。
党与者,法外之流氓也,政人类学文盲,军工综合体之所入也。 其於渗漏者,兵之暴利也,犹美国与三战之国战也。 若夫美国优先之兵,而增入军工之综合体,损肇事者之命。
当美国寇与欠发达国家战,市美国军工数十亿美元兵机器,以牺牲纳税人之利为公司增非法入。 生之所损,兵之主毫无意义。
当美国因联邦之党而踵之国公民战,伪为国家安全措施,以牺牲纳税人为市数十亿美元之机器,为机器生产国作非法收入。
美国三世界大战之战机器战斗机、陆坦克、飞毛腿导弹、军直升机、榴弹发射器、反坦克弹道兵、 M-16 突步枪。 美国之用兵也机器黄貂鱼设备、定位拦截器、热成像设备、声波拦截器、X 射线设备、生物节间谍机热成像设备。
行帮派跟随的街头或近距离和私人元素的流氓黄鼠狼(所有帮派跟随的踪迹都是流氓黄鼠狼)因事务场所围守、定时阻挠动作、心攻击、生物危害攻击(故意咳嗽、打喷嚏、破风、呕吐、呼吸重和他的恶心、流氓和幼稚的细菌与他人交流)来一点令人讨厌和/或侵入性的强迫 身接以激/散意,近自行车、踏板车、滑板、旱冰鞋、旱冰鞋,车遏/险攻击性驾近人,故污食,试以粗暴恶心个体失食。 粗暴的性情和愤怒的表情也是暴徒跟随的以恐惧的常心刺激策策。
夫党与踪迹者,联邦之兵暴也,美国公民之法也,此公民之姓名、生统计数据、姓名变体、生统计数据之变体输于国家之安数据库,谓之"危"、"颠"、"力"、"危"、"烦"。
美国联邦佐官之体,兼其政治家,无能为也。
他们不但启用了帮派跟踪者,而且为他们的行为和奖励的团伙跟随是无用的白痴。
政无能者,帮踪之源;隐形立法者,帮踪之命;有用痴者,帮踪之卒;冷漠、堕落、害地、政府程序。
美利坚合众国无宪法,美国无最高法院制,美利坚合众国为一主权国家或一能改人之体不内直,反是一直32 478 997 230 654.75美元之战猴,其恶毒、先发制人之公民,永自立为缺陷之物。
所以然者,造也。 Gangstalking者,一数据库之趋利企业,其一人之助者,随事指为特定业所入,最明兵工综合体,而于小者为诸行造入。
美利坚合众国待售。 其每一项立法皆指为百万富翁,不恤不知所以交易,或所以动国家之康公民生命线。
在一个被帮助跟动之前,没有证据程序。
重者,吾甚疑之,而毫发不疑,其粘糊糊的、软弱、懦弱、自恋、妄欺、近亲繁殖之政方试,且可以成功于世无戒之国,各联邦其类而洗之。 地、州、地立法机构。
此其党迹也,此美利坚合众国也,一政溃,一权掮客闹剧,及社会学上狂言人之恶者也。
无美国选民之言,无国会之语,无参议院之辩,无媒体之电视,无施行之报纸,无长市长之辩,无美国最高法院宪之议,惟数千亿美国纳税人之钱投于一严。 不善、懦、违宪、恶、偏执、灭绝主义之仇议,美利坚合众国无效、承、根除、毅力、能。 ----------
无疑,私利益集团、军工复合体、教会分子在朋党之间,利益集团合谋因国会尽可多充国家安专项拨款,以强隐延往 60 年来可与曩时 20 岁中供国防部、司法部之利者,空白支票也。
______________________________________________________
伊曼纽尔·史密斯(E. I. 史密斯)
9天前
< 美国联邦政府、其民选,及诸佐官决策者不资就善治、法治、自由。
数十年来,美国标榜"山上城市"、"全世界自由灯塔"。 皆非也。 反是者,负联邦储之统32,000,000,000,000,000.000美元之国,立法为文盲,至其不复审其前法案。 其不主于侵叛之行,无公民于其断言,则已授权于流古拉格之反对者,其费不负责,有害堕刑,其于至重如此之缓,以至于速滚雪球般地演变成政之难。
美国联邦政府有意无意地(隐形之国)安立法,募全国之堕物、漠暴之徒、易犯之腐败近亲繁殖者爱羊群之心者,享保护,免他公民之流氓、无意识、丑角、类人猿之行。
此国一事,唯一事,军工联合体关行业者筹款人。 夫党与踪迹,非止兵革机器制造商,兼医院行业及临床精神/心行业,凡诸行业,皆将从其党踵致衍生人身伤中得增加收入。
美国之政,一无所用。
至少自2011以来,帮踪恒速。 其所向者,密择之也;其所遇暴者,出于不意,与未发者,有司法程序,无所警告。
美国在2001年11月9日后授权国会、立法及官僚流氓行为等于叛国罪、针美国公民先发犯宪法权利。
美国联邦政府不尽者,置其公民于暴力、侵夺、迎合、破坏性之党。
美利坚合众国成而资国恐怖主义。
帮跟踪者非爱国者也。 其不爱国也,亦不疑其从联邦政府之命也。 唯美国之堕武士,美国已退化为一国性者有以白痴阴谋,其痴迷于能犯暴力犯罪/严重威胁罪,无所追索权。
2001年9月11日之后,国家安恐生严、流氓、不育之民权难,如党与踪迹,即以其间及后会之国安法案长至9,500頔,充限指用之公民自由,国会或总统行政办公室无人穷览也。
诸如围社区骚扰、电子通信遮截、街头剧院、衍生、上演车祸、谋杀、袭袭、入室盗窃、故坏诸暴人,皆帮与暴力剧目之一体,国会立法之无知,已为密合法化。
美国精神病学、专业心理学界为暴、有目所操,指归一人。 若人因其断言而临床诊为精神病,则好色逆人之美国计可不挑战而始。
当此之国,无一精神科医心理学家则可,有一人则堕。 反是,以为取费於人而诊之,可无精神疾病也。
事有激精神病学专业之心,将关精神病精神疾病之约/访获保险金,而群聚踵之。 其党竟以广场恐惧症。
此心医者更多问,各自行业更多收。
帮党踪迹又激刺医院行业,使免于堕流氓拙无教养之人,经历伤害性"事故"。
军事综合体亦得其宜。 军事工事监视,通信遮截技术及趋向人徒踪迹所用不见之兵机器所以用兵者近1,000,000,000,000,000,000.00美元纳税人资金之一也。
美国于买用兵革机器然使善政之集决无所用。 美国每岁军工联合体难题费几1万亿美元,且以无事可击,美国起己公民。
此场密战称为帮踪,多用昂贵无效之机器,机器方闲聚尘。 此所以激刺军工综合体,而不与妖政相高也。 />
美国于买用兵革机器然使善政之集决无所用。 美国每岁军工联合体难题费几1万亿美元,且以无事可击,美国起己公民。
此场密战称为帮踪,多用昂贵无效之机器,机器方闲聚尘。 此所以激刺军工综合体,而不与妖政相高也。
军工联合体者,美国政之大捐助者也,以为报,美国政客以万亿美元政奖之,而收敛机器制造商股价长。
Gangstalk者,兵之暴利企业,所以激刺军工综合体,所以杀公民自由,善治之机,与其宪法权利为价也。
美国今未尝有大兵,十余年未尝有也。 军工联合体及爱合者饥。 渴于军事冲突,以售美国数十亿美元之军事装备。
其党与司法部人合从。 其于美国联邦政府也,助之甚贵。 此一针之密战也。 车、行人、GPS、街角、隐摄像头、飞机/间飞机、舟楫、间谍船、守民不绝其号令、遮手机 ping、电子邮件、短信、电话、语音邮件、用卫星、互联网 24 少跟踪目标、用互联网卫星。 蜂窝、人力资本之术,与百方、州、联邦执法、半法,则控制目标私...... 诸党踪迹之参与者,及执法半执法人员,不知其方与密事街头踪迹破坏协议也。
美利坚合众国,国际贱民也。 其联邦驻外大使正美国正试他国,以党人踪迹为国家安则之一,其社区扰、场围及合法化杀不遂机制为法。 美国不欲为世界一支助动众随机制之国。 2001年9月11日之后,因数千个不见指定之用,密插国家安立法,以帮踪为法。 美国联邦立法机构正除美国宪,废美国权利法案,而弃民主国宪政共和国之位。 此一张空白支票(由美国纳税人供),用于军工综合体,其佐设备及天下恶意付费监视协议。 军工综合体,其融合中心,及其踪迹联邦街头,暴徒动机,已渗透到地方,州联邦政府美国企业好莱坞,凡美国媒体每一隙中,皆受灾难性国安协之约束,美国国会恐惧于9/11事。 愚心不在地,疏忽向世界。 美国国会释叛国纳税人助暴徒,谓之帮踪者。 其用身语信号系统以定位、坏、阻、伤、/扰之人。 -----------
美国为并土,以为一主权国家,为政立政,有大罪,有轻叛国罪害人。 此事在美利坚合众国为真,至于帮派踵此合法化前。 内外冒险之高昂,本非止此国也,其企业司也,其联邦也,州与政府,或其宗教团体也,在丑也,叛国也,费也,成本效下也,卒徒劳军工出项以求快意,此美国起于韩者也。 至越南,至伊拉克,至阿富汗,杀伤数千万人,并为美国兵机器工作作数万亿美元纳税人美元。 其党踪迹如此流氓美国企业。 美国以为公民密兵,将示民以制民。 美国负本国银行责为32,000,000,000,000.00美元,不能自持。 国会傀儡因不能之国安立法,授权群党随暴近亲繁殖之罪胁之,不能保美国之来。 -----------
美国法典易为篡改、操纵、破坏、超越、推覆。 美国之立法,其缺最大。 10,000頔法案,其无一国会或总统宣读,无所不投票,许以签署。
美国草而交国会表决者法案甚于第三方,第三方常用美国立法之隐形附件或指用之法案,附件为美国众毁灭性后患。
街头剧院 《帮派跟踪》之主题:美国暴徒小丑,对其公民战::
在美国密立法暴愚民兵(目前谓之帮派)中
有机曰街头剧场。 街头剧院者,所以供特定息也。 事可一事,人皆见此一奇。 街头戏剧之性,唯趋个体为能得奇。 此奇观者,人之所与踪也。
吾将为子言于子 7 年之党与踪迹之所遇者题。 此等主题及帮派随踪策划者动机,即因2001年9月11日后国家安全法案为此流氓计者指定用度为便。 以吾观之,设计者美国之世,示沮也。 帮派跟随的和他有用的白痴被以此为眼镜中的演员。
亲见街头剧院主题如下。
• 内战之终,非今日之论也。
• 反婚者,上帝之性也。
• 持奴隶制者,上帝之性也。
• 美国退伍军人无足支
• 比屋之教(传教者)不足贵也
• 拉丁美洲人异于上帝之前,不得美国人之尊也。
• 与黑人男子期婚者白人妇人当死系。
• 黑人宜在美国居一州,一与美国别州。
• 黑人行太速。 如在1964年,不得投票南州,多流氓行为针之。 然自1965至2012,美国黑人在电影,电视播,政体育界见名士爆炸式长,终于2008年为首黑人总统。 当是时,黑人法官、医、律师亦急增之。 此黑人于美国世成功摧毁久神学叙事,即黑人以邋遢和不动衷而为上帝所诅也。
•此国非黑人遗产之分也,以黑人为奴而非法移民所携也。
• 黑人为上帝所诅,助行其迹,则其诅证也,"上帝许之"也。
• 警察比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 兵比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 保安人员比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 私家侦候比名人尤可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 私辨承包商甚于名人。 言名人不为其社区冒危也。
• 保密线人比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 赏猎人,视名人尤可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 飞机飞行员比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 州警比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
非法外国人应在此国得赦,上帝之旨也。
• 黑人宜行一美国异货。
• 种分离主义上帝之性也。
• 圣经宜是此土地官法。
• 耶穌基督後期徒教會應被允許行立法權于聯邦層面。
同性恋常也,宜正常化于世,同性恋者有位联邦体育、兵、法,三同性恋者无成功之域也。
• 童子宜被性化(娱乐业许),为性行为备,或口教导性习,然必以联邦道行之,并得二已婚父母之祝,其一方必有酬直之事,皆无罪录。 此宜教子性,而非学校也。
• 美利坚合众国,上帝之选民国也。
• 美国兵者,上帝之私器也。
• 美国之国际主义,上帝之大谋也。
纳税人钱好在兵革、监禁及外国干涉主义上。
• 美国当踪迹传于世界各地,上帝之计也。
• 基督教者,上帝之道也。
• 耶稣基督者,至善之神也。
•人宜善拉丁美洲人,以其将30岁为美国者众也。
• 非生可救也。
• 非人以义有用也。
• 党非联邦政府使也,人自为之也。
• 重罪不可雇者黑人可以为白人保镖。 与其使新从狱归之街,无所得也。
• 无为黑人童正教。 其未来之宜体力劳动(宜咕噜咕噜之事。
• 黑人运动员宜有体育盟,与美国别(自其童年时期始)。
合种则致战。
• 跨种非婚生交配是终极罪过。
• 来世种族隔离也。
• 政治家者,上帝之命也,唯其所司,不主选民。
• 命有在,人不易也。
• 有自生前去天堂者,有人当地狱者; 至耶稣基督不能自救。
• 某脏话、鄙鄙短语、侮辱宜监禁。
• 谋杀以外罪当坐"无期徒刑"。
• 力非一恶也,可以济事。
• 美国法"软",遏罪无效。
• 党者,所以威饰矫谋也。
•但联邦指,当暴徒可也。
• 暴徒者,何人可学,其世背景何如?
• 此流氓立法宜因国会法案,但通密5,000-10000頔法案。
人格非使敌人用,以其新耻取敌意也。 最终目标者,使人背己去官,动之动也,失其脱轨而攻扰之,致其招法戏剧(于党与踪者为最可取,以其为镇言也。 "言办公室","言教",以自名也,以牺牲为贵也。
世纪以来,其怪构在美国常为嫉妒暴怨之人,密谋激怒,以伤名誉,扇动者名故事。
恶意者,党跟踪者、同步、时、行也,其党随之者半代也,而得美国联邦政府全力支持助焉。
喜
论曰
共享
... 蓄废气以应人之兵者,美国公民之暴、懦、国之攻击机制也。 与同步车之阻,与其同步车之袭、同步车之杀人、同步车之过杀人于内流氓应物也,故用废气之于身伤者,计之一也。 招者或坐公共汽车站、商店、餐馆前坐,或车有入口、出口,暴徒驾驶者于他方开车、骑自行车、步、慢跑之跟踪者,得而示之,命之,置诸近距离而平行者,以指其车 排气管朝趋人之大端,以致命毒令人作呕之废气炸开。
与同步车之阻移也,废气之武器化重攻击机制,难征也。 此及他文侵性流氓性帮踪,设计难征。 如用废气难证为暴力犯罪,虽拍摄暴人之照片视频,亦难于庭之操作,故为身伤也。 察官难持,罪自隐令人发指也。 一氧化碳者,致命之药也,久接之,内外皆杀之。 住院治疗一人少于杀一人之药,犹一人之毒烟也。
党与者,法外之流氓也,政人类学文盲,军工综合体之所入也。 其於渗漏者,兵之暴利也,犹美国与三战之国战也。 若夫美国优先之兵,而增入军工之综合体,损肇事者之命。
党与踪迹者,美国国会之立法也,其最终目标者,所以伤身、残残、监禁、以他道收、贫穷、孤杀之也。
此臭美式计之善者,不省察,不读书。 当美国国有安危之问,投票赞成之。 虽自由、民主、宪政、法、公民、气、其集,常识其直损。
党与踪依于暴、匪、犯罪精神错乱者、企业破坏者、特工衅者、煽动者、敌对模仿者、仇雠者、狂妒者、马丁尼特人、腐败者、宗教狂热者、非法外国。 人、敌政者、分离主义者、文盲、半心半意者精神病、重罪、暴罪、助员、民兵,及他害、堕、暴、恐怖主义之美国公民、非公民也。
此国已授权帮踪,此暴徒游行,因2001年9月11他日仓卒立法以为其锚。
计非军工综合体与所向之害为食之外,无所不能。 国会、最高法院、司法部、国防部宜集为之羞。
美国联邦授权之徒踪迹协议,故传疾病、生物攻染之用皆是。
向人一派帮踪,则非公认之美国公民。 发送给司法部(联邦调查局、中央情报局)、国防部、州、联邦、军事告将遭腼腆无礼,驳为"不定"。
余全意所见,余揭帮派踪迹项目正受地方、州、联邦执法、半执法、军事派系者监控。 吾疑其绝大多数之不可,不信,或失望于吾言,而密察/监吾久以省吾道者美国联邦执法人员或踪迹为负面,或反不定。
_______________________________________________________________
美国国会议员,黄鼠狼也。 得六位数薪水于美国纳税人。 有美国纳税人私保镖。 其居公职,与美国纳税人委员会。 乘豪华轿车,预订美国纳税人私飞机航班。 其为美国纳税人何以报? 因违宪、流氓、近亲繁殖、暴力、杀人、糜费、烦人、迎合、愚蠢、令人震惊、私利、思虑不周之工流氓,表为2001年9月11日之"国家安"流氓,指嵌其中,帮踵为古拉格启发之徒。
暴美国联邦政府如沙漠之裘。 其参议院、众议院、最高法院、国防部、司法部、州、地方立法机构,及诸官僚,皆无用麻木暴徒之温床。
此国信心最下。 联邦法司以政命之大法官,因说者、政党、政治家、军工联合体而决之。
此国非人之资,亦非全球之资也。 在32,000,000,000,000,000.00美元债中,不过一台兵机器买,糟粕立法,万亿美元之预算署,喜拍照之会,无投标合同,国际烦恼。
其国立法机构不足于持美国宪法。 事实,我无宪法。 吾非宪法也,恶数百万条、无用、流氓、文盲、治美国之国安立法也。 宪法已为立法所覆。 美国联邦政府已移国于司法部国防部,自2003以来,司法部至于坏生自由追求幸福宪法。
Biochemistry, Jan 12, 2016
CCL21 chemokine binds the G protein-coupled receptor CCR7, aiding not only in immune response but... more CCL21 chemokine binds the G protein-coupled receptor CCR7, aiding not only in immune response but also in cancer metastasis. Compared with other chemokines, CCL21 has a unique extended unstructured C-terminus that is truncated in some naturally occurring variants. We have solved the X-ray crystallographic structure of a truncated CCL21 (residues 1-79) lacking the extended C-terminus, and identified, via 2D NMR, a putative sulfotyrosine-binding site that may recognize such post-translationally modified tyrosine residues on the receptor. Compared to the previously solved NMR structure of full-length CCL21, the crystal structure presents new druggable binding hot spots resulting from an alternative N-loop conformation. In addition, whereas the previous NMR structure did not provide any structural information after residue 70, the C-terminus of the truncated CCL21, ordered up to Ala77 in our crystal structure, is placed near the N-loop and sulfotyrosine-binding site, indicating that the...
Journal of medicinal chemistry, May 8, 2016
CXCL12 is a human chemokine that recognizes the CXCR4 receptor and is involved in immune response... more CXCL12 is a human chemokine that recognizes the CXCR4 receptor and is involved in immune responses and metastatic cancer. Interactions between CXCL12 and CXCR4 are an important drug target but, like other elongated protein-protein interfaces, present challenges for small molecule ligand discovery due to the relatively shallow and featureless binding surfaces. Calculations using an NMR complex structure revealed a binding hot spot on CXCL12 that normally interacts with the I4/I6 residues from CXCR4. Virtual screening was performed against the NMR model, and subsequent testing has verified the specific binding of multiple docking hits to this site. Together with our previous results targeting two other binding pockets that recognize sulfotyrosine residues (sY12 and sY21) of CXCR4, including a new analog against the sY12 binding site reported herein, we demonstrate that protein-protein interfaces can often possess multiple sites for engineering specific small molecule ligands that prov...
Biochemistry, Jan 9, 2015
In Gram-negative bacteria, the first step of lipid A biosynthesis is catalyzed by UDP-N-acetylglu... more In Gram-negative bacteria, the first step of lipid A biosynthesis is catalyzed by UDP-N-acetylglucosamine acyltransferase (LpxA) through the transfer of a R-3-hydroxyacyl chain from the acyl carrier protein (ACP) to the 3-hydroxyl group of UDP-GlcNAc. Previous studies suggest that LpxA is a critical determinant of the acyl chain length found in lipid A, which varies between species of bacteria. In E. coli and L. interrogans, LpxA prefers to incorporate longer R-3-hydroxyacyl chains (C14 and C12 respectively), while in P. aeruginosa the enzyme is selective for R-3-hydroxydecanoyl, a 10-hydrocarbon long acyl chain. We now report three P. aeruginosa LpxA crystal structures; apo protein, substrate complex with UDP-GlcNAc, and product complex with UDP-3-O-(R-3-hydroxydecanoyl)-GlcNAc. A comparison between the apo form and complexes identifies key residues that position UDP-GlcNAc appropriately for catalysis, and supports the role of the catalytic His121 in activating the UDP-GlcNAc 3-hyd...
International journal of oncology, 2013
Casein kinase II (CK2) inhibitors suppress cancer cell growth. In this study, we examined the inh... more Casein kinase II (CK2) inhibitors suppress cancer cell growth. In this study, we examined the inhibitory effects of a novel CK2 inhibitor, hematein, on tumor growth in a murine xenograft model. We found that in lung cancer cells, hematein inhibited cancer cell growth, Akt/PKB Ser129 phosphorylation, the Wnt/TCF pathway and increased apoptosis. In a murine xenograft model of lung cancer, hematein inhibited tumor growth without significant toxicity to the mice tested. Molecular docking showed that hematein binds to CK2α in durable binding sites. Collectively, our results suggest that hematein is an allosteric inhibitor of protein kinase CK2 and has antitumor activity to lung cancer.
Journal of Medicinal Chemistry, 2014
CXCL12 binds to CXCR4, promoting both chemotaxis of lymphocytes and metastasis of cancer cells. W... more CXCL12 binds to CXCR4, promoting both chemotaxis of lymphocytes and metastasis of cancer cells. We previously identified small molecule ligands that bind CXCL12 and block CXCR4-mediated chemotaxis. We now report a 1.9 Å resolution X-ray structure of CXCL12 bound by such a molecule at a site normally bound by sY21 of CXCR4. The complex structure reveals binding hot spots for future inhibitor design and suggests a new approach to targeting CXCL12−CXCR4 signaling in drug discovery.
Current Topics in Medicinal Chemistry, 2013
The chemokine CXCL12 and its G protein-coupled receptor (GPCR) CXCR4 are high-priority clinical t... more The chemokine CXCL12 and its G protein-coupled receptor (GPCR) CXCR4 are high-priority clinical targets because of their involvement in metastatic cancers (also implicated in autoimmune disease and cardiovascular disease). Because chemokines interact with two distinct sites to bind and activate their receptors, both the GPCRs and chemokines are potential targets for small molecule inhibition. A number of chemokines have been validated as targets for drug development, but virtually all drug discovery efforts focus on the GPCRs. However, all CXCR4 receptor antagonists with the exception of MSX-122 have failed in clinical trials due to unmanageable toxicities, emphasizing the need for alternative strategies to interfere with CXCL12/CXCR4-guided metastatic homing. Although targeting the relatively featureless surface of CXCL12 was presumed to be challenging, focusing efforts at the sulfotyrosine (sY) binding pockets proved successful for procuring initial hits. Using a hybrid structure-based in silico/NMR screening strategy, we recently identified a ligand that occludes the receptor recognition site. From this initial hit, we designed a small fragment library containing only nine tetrazole derivatives using a fragment-based and bioisostere approach to target the sY binding sites of CXCL12. Compound binding modes and affinities were studied by 2D NMR spectroscopy, X-ray crystallography, molecular docking and cell-based functional assays. Our results demonstrate that the sY binding sites are conducive to the development of high affinity inhibitors with better ligand efficiency (LE) than typical protein-protein interaction inhibitors (LE ≤ 0.24). Our novel tetrazolebased fragment 18 was identified to bind the sY21 site with a K d of 24 M (LE = 0.30). Optimization of 18 yielded compound 25 which specifically inhibits CXCL12-induced migration with an improvement in potency over the initial hit 9. The fragment from this library that exhibited
Scientific Reports, 2019
The lipid A biosynthesis pathway is essential inPseudomonas aeruginosa. LpxA and LpxD are the fir... more The lipid A biosynthesis pathway is essential inPseudomonas aeruginosa. LpxA and LpxD are the first and third enzymes in this pathway respectively, and are regarded as promising antibiotic targets. The unique structural similarities between these two enzymes make them suitable targets for dual-binding inhibitors, a characteristic that would decrease the likelihood of mutational resistance and increase cell-based activity. We report the discovery of multiple small molecule ligands that bind toP. aeruginosaLpxA and LpxD, including dual-binding ligands. Binding poses were determined for select compounds by X-ray crystallography. The new structures reveal a previously uncharacterized magnesium ion residing at the core of the LpxD trimer. In addition, ligand binding in the LpxD active site resulted in conformational changes in the distal C-terminal helix-bundle, which forms extensive contacts with acyl carrier protein (ACP) during catalysis. These ligand-dependent conformational changes ...
IEEE Transactions on Antennas and Propagation, 2000
James R. Wait was to the manor born in 1924. His father was the highest ranking officer in the Ro... more James R. Wait was to the manor born in 1924. His father was the highest ranking officer in the Royal Canadian Air Force in World War II. Jim received all of his academic degrees from the University of Toronto, Canada, where he received the B.A.Sc. degree in 1948, the M.A.Sc. degree in 1949, and the Ph.D. degree in 1952, all in engineering physics. He spent three years in the Radio Physics Division, Defense Telecommunications Research Establishment (DTRE), before joining the Central Radio Propagation Laboratory, National Bureau of Standards, Boulder, CO, in 1955, where he remained until 1980, weathering several reorganizations. In 1980, he accepted a Professorship at the University of Arizona, Tucson, and was appointed Regents Professor in 1988, retiring in 1989. He died of a brain tumor in 1998. Jim Wait was one of our finest, as well as most prolific, electromagnetic theorists and published over 800 journal papers and eight books.
The Journal of Chemical Physics, 1964
![Research paper thumbnail of Structure-Based Design of Potent and Ligand-Efficient Inhibitors of CTX-M Class A [beta]-Lactamase](https://attachments.academia-assets.com/80019781/thumbnails/1.jpg)
](J Med Chem, 2012
The emergence of CTX-M class A extendedspectrum β-lactamases poses a serious health threat to the... more The emergence of CTX-M class A extendedspectrum β-lactamases poses a serious health threat to the public. We have applied structure-based design to improve the potency of a novel noncovalent tetrazole-containing CTX-M inhibitor (K i = 21 μM) more than 200-fold via structural modifications targeting two binding hot spots, a hydrophobic shelf formed by Pro167 and a polar site anchored by Asp240. Functional groups contacting each binding hot spot independently in initial designs were later combined to produce analogues with submicromolar potencies, including 6-trifluoromethyl-3H-benzoimidazole-4-carboxylic acid [3-(1Htetrazol-5-yl)-phenyl]-amide, which had a K i value of 89 nM and reduced the MIC of cefotaxime by 64-fold in CTX-M-9 expressing Escherichia coli. The in vitro potency gains were accompanied by improvements in ligand efficiency (from 0.30 to 0.39) and LipE (from 1.37 to 3.86). These new analogues represent the first nM-affinity noncovalent inhibitors of a class A βlactamase. Their complex crystal structures provide valuable information about ligand binding for future inhibitor design.
Journal of Biological Chemistry
The androgen receptor (AR) is a ligand-activated transcription factor that is essential for prost... more The androgen receptor (AR) is a ligand-activated transcription factor that is essential for prostate cancer development. It is activated by androgens through its ligand-binding domain (LBD) that consists predominantly of 11 alpha helices. Upon ligand binding, the last helix is reorganized to an agonist conformation termed activator function-2 (AF-2) for coactivator binding. Several coactivators bind to the AF-2 pocket through conserved LXXLL or FXXLF sequences to enhance the activity of the receptor. Recently, a small compound-binding surface adjacent to AF-2 has been identified as an allosteric modulator of the AF-2 activity and is termed binding function-3 (BF-3). However, the role of BF-3 in vivo is currently unknown and little is understood about what proteins can bind to it. Here we demonstrate that a duplicated GARRPR motif at the N-terminus of the cochaperone Bag-1L functions through the BF-3 pocket. These findings are supported by the fact that a selective BF-3 inhibitor or ...
Nature, 1968
Intermolecular forces, which are collectively called van der Walls * forces are electrical in nat... more Intermolecular forces, which are collectively called van der Walls * forces are electrical in nature. These forces can be divided into three categories: (1) Dipole-dipole (2) Dipole-induced dipole (3) Induced dipole-induced dipole (London force**)
Journal of the American Chemical Society, Jan 9, 2015
Ligand binding can change the pKa of protein residues and influence enzyme catalysis. Herein, we ... more Ligand binding can change the pKa of protein residues and influence enzyme catalysis. Herein, we report three ultrahigh resolution X-ray crystal structures of CTX-M β-lactamase, directly visualizing protonation state changes along the enzymatic pathway: apo protein at 0.79 Å, pre-covalent complex with non-electrophilic ligand at 0.89 Å, and acylation transition state (TS) analog at 0.84 Å. Binding of the non-covalent ligand induces a proton transfer from the catalytic Ser70 to the negatively charged Glu166, and the formation of a low-barrier hydrogen bond (LBHB) between Ser70 and Lys73, with a length of 2.53 Å and the shared hydrogen equidistant from the heteroatoms. QM/MM reaction path calculations determined the proton transfer barrier to be 1.53 kcal/mol. The LBHB is absent in the other two structures although Glu166 remains neutral in the covalent complex. Our data represents the first X-ray crystallographic example of a hydrogen engaged in an enzymatic LBHB, and demonstrates th...
Targeted individuals are typically not trained in military combat, war strategy, hand-to-hand com... more Targeted individuals are typically not trained in military combat, war strategy, hand-to-hand combat, advanced self-defense tactics, or the like. The treasonous, traitorous, unconstitutional, politically bumpy, covert frontal lobotomy that are given to targeted individuals that cannot withstand this state-sanctioned assault on them, is nothing but military industrial politically inept, constitutionally illiterate cowardice. There are deceased Australopithecus' that have more common sense than to allow such an misanthropic congressional misadventure. Freedom, democracy, and national security are nonexistent here in the United States of America. In its thuggish gangstalking campaigns against its own citizens, thuggish, inbred, aloof, dull, dummies are mobilized in units against the targeted person with no mission outside the annoyance, harm, or instigation of verbal or physical contact with the target. The United States federal government foolishly continues in spite of this to call itself a democracy and a constitutional republic. It needs to declare itself a fascist state and be honest with its citizens. The "national security" state that America is now, allows for state-enabled thuggery at a cost of $32T for the taxpayer. The gangstalking mechanism has the capacity to go worldwide. This is not something I want to see. I do not want to see other countries, those which have a genuine sense of pride, commonality, and nationalism unlike the United States, to fall prey to the political, legislative, and socioeconomic mud pit known as gangstalking. It's easy-to-follow patterns and its "rewards" system for its participants create an incentive for the emptyheaded thuggish sociopaths that participate in it.
Башкаларга тәэсир итмәгәннәр сугыш, стратегия, кул белән көрәшкә, югары үз-үзен яклауга дучар ите... more Башкаларга тәэсир итмәгәннәр сугыш, стратегия, кул белән көрәшкә, югары үз-үзен яклауга дучар ителмәде. Трезсон, трезсон, конституцион булмаганлык, сәяси күтәрелеш, яшерен фронталь лобэктомия кимсетми, һәм хәрби тармакның компетенциясе һәм конституцион иллюминационлыкның куркаклыгы.
Шуңа күрә, Australopithecus явыз илгә караганда күбрәк.
Азатлык, демократия һәм милли иминлек Америка Кушма Штатларында да бер үк түгел. Үз гражданнарының гангстеризм кампаниясендә хулиганнар, боерык, ваемсызлык, думлык, думлык армиягә җәлеп итү белән дәвалана, һәм тәртипсезлек, җәрәхәт, фаш итү, сүз элемтәсеннән башка бурыч юк.
Шулай да АКШ федераль хакимияте аны акылсыз рәвештә демократик конституцион республика дип атый. Фашист дәүләтен игълан итегез, ватандашлар эчкерсез.
АКШ хәзер "милли иминлек", Сю Гу Сю тага, 32 триллион АКШ доллары.
Төркем механизм көче белән дөньяга китә. Бу минем күргәнем түгел. Министрлар АКШтан аерылып торган башка илләрне күрергә теләми, чын горурлык, уртаклык, милләтчелек, фирка хөкүмәте һәм закон чыгару чокырына корбаннар китерергә теләми.
Аның җиңел генә артыннан бара торган стиле, катнашучылар бүләкли, һәм буш рогаллар аның өчен каршы килә.
Җәмгыятьне күзәтү, җәмгыятьне саклау яки җәмгыятьне саклау протоколлары өчен меңләгән милли иминлек законнарына керү җиңел. АКШның фиркасе һәм трекы – кәнганлыларга ярдәм, федераль дәүләтнең иминлеге халыктан яшерелгән, шуңа күрә саклану департаменты һәм Юстиция идарәсенең мөмкинлекләрен кую кыен. Чен Ю бу офисның илле дәүләт белән килешә дип уйлаган, мондый боегау, үрмәләү, үрчетү һәм констицион булмаган афәтләр бөтен җирдә булырга мөмкинлек бирә, Америка ватандашлары һәм граждан ирекләре хокукларын боза.
ایالات متحده امریکا یک منفور بین المللی است. سفرای خارجی فدرال ان رسما تلاش می کنند، برای و از طر... more ایالات متحده امریکا یک منفور بین المللی است. سفرای خارجی فدرال ان رسما تلاش می کنند، برای و از طرف ایالات متحده، برای نفوذ در کشورهای دیگر، به عنوان بخشی از مجموعه امنیت ملی خود، باندهای گفتگو، از جمله ازار و اذیت جامعه، mobbing محل کار، و قتل قانونی و تلاش برای مکانیسم های قتل به عنوان قانون. ایالات متحده نمی خواهد تنها کشور در جهان باشد که مکانیسم گفتگو با باندهای تبهکار را فعال، تامین مالی و بسیج می کند. این قانون در ۱۱ سپتامبر ۲۰۰۱ اقدامات امنیت ملی را از طریق هزاران علامت نادیده گرفته شده که مخفیانه در قانون امنیت ملی ان قرار داشت، تصویب کرد. به نوبه خود، قوه مقننه فدرال ایالات متحده رسما قانون اساسی ایالات متحده را از دست داد، منشور حقوق ایالات متحده را لغو کرد و خود را به عنوان یک دموکراسی و به عنوان یک جمهوری قانون اساسی رد کرد. در عوض، این یک چک سفید (به لطف مالیات دهندگان امریکایی) به مجتمع صنعتی نظامی، کمک های ان و پروتکل های نظارتی پرداخت به بازی ملی است. مجتمع صنعتی نظامی، مراکز همجوشی ان، و تاثیر ترکیبی انها بر مکانیسم بسیج خیابانی و اراذل و اوباش که توسط فدرال هدایت می شود، در هر شکاف دولت محلی، ایالتی و فدرال، شرکت های امریکایی، هالیوود، رسانه های عمومی امریکا نفوذ کرده است، که همه انها در معرض پروتکل امنیت ملی فاجعه بار است که کنگره ایالات متحده، وحشت زده و وحشت زده در مورد حوادث 11 سپتامبر، احمقانه، حواس پرت، و سهل انگارانه گذشت و رها بر جهان در بزرگ. کنگره ایالات متحده بر جامعه یک واحد بسیج اراذل و اوباش با بودجه مالیات دهندگان خیانتکار به نام gangstalkers راه اندازی کرده است. و انها از یک سیستم سیگنال های فیزیکی و کلامی با یکدیگر برای پیدا کردن، مختل کردن، جلوگیری، اسیب رساندن و / یا ازار و اذیت یک فرد هدف استفاده می کنند. -----------
امریکا، به عنوان یک قلمرو یکپارچه، به عنوان یک کشور مستقل، و به عنوان یک نهاد دولتی سیاسی تاسیس شده، گناهکار جنایات و تخلفات بزرگ، خیانت بزرگ و جنایت علیه بشریت است. این چیزها در مورد ایالات متحده امریکا درست بود حتی قبل از اینکه باندهای تبهکار در اینجا قانونی شوند. هزینه های بالای ماجراجویی های جنگی در خانه و خارج از کشور، این کشور، موسسات شرکتی ان، دولت های فدرال، ایالتی و محلی یا جامعه مذهبی ان را از پیدا کردن شادی در پروژه های دلقک، خیانت، اسراف، هزینه بی اثر و در نهایت بیهوده هزینه های صنعتی نظامی که منجر به تحریک هر تلاش جنگی امریکا از کره شده است، متوقف نکرده است. به ویتنام، به عراق، به افغانستان، باعث ده ها میلیون تلفات انسانی در حالی که تولید تریلیون دلار مالیات دهندگان برای صنعت ماشین جنگی نظامی ایالات متحده است. Gangstalking یکی دیگر از این شرکت های امریکایی اراذل و اوباش است. امریکا معتقد است که به راه انداختن یک جنگ پنهانی علیه شهروندانش به کشورهای دیگر نشان خواهد داد که کنترل» خود را بر مردم دارد. با 32 میلیون دلار بدهی به موسسات بانکی خود، ایالات متحده حتی اقتصاد خود را کنترل نمی کند. دست نشانده های کنگره که بخش های بی کفایتی از قوانین امنیت ملی را تصویب می کنند که اجازه تهدید جنایی توسط یک دسته از باندهای تبهکار را می دهد، امریکا را برای
向人者,未尝受战斗、战略、肉搏战、高自卫也。 叛国、叛人、违宪、政之颠沛、隐额叶切除之术,予之不胜其可者,兵工无能、宪法文盲之懦也。 故南方古猿多于恶人之国。 自由、民主与国安在美利坚合众国... more 向人者,未尝受战斗、战略、肉搏战、高自卫也。 叛国、叛人、违宪、政之颠沛、隐额叶切除之术,予之不胜其可者,兵工无能、宪法文盲之懦也。
故南方古猿多于恶人之国。
自由、民主与国安在美利坚合众国无有也。 于本国公民流氓帮踪运动中,流氓、近亲繁殖、冷漠、迟钝、假人为动员成军所待,自扰扰、伤害、扇动、口体接触之外,无所任务。
虽然,美国联邦政府犹愚称民主宪政共和国。 宣布法西斯国,公民诚之。
美国今之"国安",许国许暴徒,纳税人本为32万亿美元。
群辈随机制有力走向世界。 此非吾所欲见也。 臣不愿见他国,其与美国异,有真自豪感、共性、民族主义之国,为党迹之政,立法泥坑之牺牲。
其易循之式,参与者赏之统,为之空头流氓反者激劝。
甚易入到数千纸国家安立法中,为常社区监控、社区警务或社区护协议。 美国之党与踪计为纳税人助、联邦之国安程隐于众,故难定于国防部司法部之机。 臣愚以为此办公室与五十州合心,许此近亲繁殖、不育种、无宪法之劫无所不在,侵犯美国公民权利公民自由。
美国易劫者,不为恐怖分子顽所胁,可以验美国品牌流氓小丑。 人之所须者,唯以其名、其名之变体、其生统计数据、其生统计数据之变体密输联邦授权、纳税人助之数据库,而许其生徒之助以迹之。
9/11事后国家死亡行军,美国国会于无法仓卒许之,谓之帮党踪迹。 此联邦政府之与同步也,使群默、流氓、烦骚扰者、攻击者,循口、身、车、流氓、蔽,使以罪胁流氓小丑。
联邦、州、地方立法投票管理不善,加以国家安用,已输数万亿美元于军工联合体纳税人资,此一国安兵机器买系统,安法,使流氓小丑最高。
特以故20中,美国联邦政府立法、授权、主议、参赞恐怖主义。
美国士兵常不知其所以击外国兵之细故也。 或者,在美国陆军可支可支可观之钱,有善福利待遇,给养老金致仕者。
美国国会已可公民其恐怖主义合法化。 此恐怖主义文党随之流迎暴徒也。
这些团伙跟随的多少不同包裹。 或富或贫,或受高等教育,或学障碍者,或种或夷,或一,皆联邦暴徒也。
美利坚合众国欠其国中央银行32,000,000,000,000,000.00美元之责,此一怪也,当一国而非公共利益,高度重视其军工综合体,市数万亿美元之兵机器,与汝兵联邦法司不限之权以诉无戒之公民。
党与者,法外之流氓也,政人类学文盲,军工综合体之所入也。 其於渗漏者,兵之暴利也,犹美国与三战之国战也。 若夫美国优先之兵,而增入军工之综合体,损肇事者之命。
当美国寇与欠发达国家战,市美国军工数十亿美元兵机器,以牺牲纳税人之利为公司增非法入。 生之所损,兵之主毫无意义。
当美国因联邦之党而踵之国公民战,伪为国家安全措施,以牺牲纳税人为市数十亿美元之机器,为机器生产国作非法收入。
美国三世界大战之战机器战斗机、陆坦克、飞毛腿导弹、军直升机、榴弹发射器、反坦克弹道兵、 M-16 突步枪。 美国之用兵也机器黄貂鱼设备、定位拦截器、热成像设备、声波拦截器、X 射线设备、生物节间谍机热成像设备。
行帮派跟随的街头或近距离和私人元素的流氓黄鼠狼(所有帮派跟随的踪迹都是流氓黄鼠狼)因事务场所围守、定时阻挠动作、心攻击、生物危害攻击(故意咳嗽、打喷嚏、破风、呕吐、呼吸重和他的恶心、流氓和幼稚的细菌与他人交流)来一点令人讨厌和/或侵入性的强迫 身接以激/散意,近自行车、踏板车、滑板、旱冰鞋、旱冰鞋,车遏/险攻击性驾近人,故污食,试以粗暴恶心个体失食。 粗暴的性情和愤怒的表情也是暴徒跟随的以恐惧的常心刺激策策。
夫党与踪迹者,联邦之兵暴也,美国公民之法也,此公民之姓名、生统计数据、姓名变体、生统计数据之变体输于国家之安数据库,谓之"危"、"颠"、"力"、"危"、"烦"。
美国联邦佐官之体,兼其政治家,无能为也。
他们不但启用了帮派跟踪者,而且为他们的行为和奖励的团伙跟随是无用的白痴。
政无能者,帮踪之源;隐形立法者,帮踪之命;有用痴者,帮踪之卒;冷漠、堕落、害地、政府程序。
美利坚合众国无宪法,美国无最高法院制,美利坚合众国为一主权国家或一能改人之体不内直,反是一直32 478 997 230 654.75美元之战猴,其恶毒、先发制人之公民,永自立为缺陷之物。
所以然者,造也。 Gangstalking者,一数据库之趋利企业,其一人之助者,随事指为特定业所入,最明兵工综合体,而于小者为诸行造入。
美利坚合众国待售。 其每一项立法皆指为百万富翁,不恤不知所以交易,或所以动国家之康公民生命线。
在一个被帮助跟动之前,没有证据程序。
重者,吾甚疑之,而毫发不疑,其粘糊糊的、软弱、懦弱、自恋、妄欺、近亲繁殖之政方试,且可以成功于世无戒之国,各联邦其类而洗之。 地、州、地立法机构。
此其党迹也,此美利坚合众国也,一政溃,一权掮客闹剧,及社会学上狂言人之恶者也。
无美国选民之言,无国会之语,无参议院之辩,无媒体之电视,无施行之报纸,无长市长之辩,无美国最高法院宪之议,惟数千亿美国纳税人之钱投于一严。 不善、懦、违宪、恶、偏执、灭绝主义之仇议,美利坚合众国无效、承、根除、毅力、能。 ----------
无疑,私利益集团、军工复合体、教会分子在朋党之间,利益集团合谋因国会尽可多充国家安专项拨款,以强隐延往 60 年来可与曩时 20 岁中供国防部、司法部之利者,空白支票也。
______________________________________________________
伊曼纽尔·史密斯(E. I. 史密斯)
9天前
< 美国联邦政府、其民选,及诸佐官决策者不资就善治、法治、自由。
数十年来,美国标榜"山上城市"、"全世界自由灯塔"。 皆非也。 反是者,负联邦储之统32,000,000,000,000,000.000美元之国,立法为文盲,至其不复审其前法案。 其不主于侵叛之行,无公民于其断言,则已授权于流古拉格之反对者,其费不负责,有害堕刑,其于至重如此之缓,以至于速滚雪球般地演变成政之难。
美国联邦政府有意无意地(隐形之国)安立法,募全国之堕物、漠暴之徒、易犯之腐败近亲繁殖者爱羊群之心者,享保护,免他公民之流氓、无意识、丑角、类人猿之行。
此国一事,唯一事,军工联合体关行业者筹款人。 夫党与踪迹,非止兵革机器制造商,兼医院行业及临床精神/心行业,凡诸行业,皆将从其党踵致衍生人身伤中得增加收入。
美国之政,一无所用。
至少自2011以来,帮踪恒速。 其所向者,密择之也;其所遇暴者,出于不意,与未发者,有司法程序,无所警告。
美国在2001年11月9日后授权国会、立法及官僚流氓行为等于叛国罪、针美国公民先发犯宪法权利。
美国联邦政府不尽者,置其公民于暴力、侵夺、迎合、破坏性之党。
美利坚合众国成而资国恐怖主义。
帮跟踪者非爱国者也。 其不爱国也,亦不疑其从联邦政府之命也。 唯美国之堕武士,美国已退化为一国性者有以白痴阴谋,其痴迷于能犯暴力犯罪/严重威胁罪,无所追索权。
2001年9月11日之后,国家安恐生严、流氓、不育之民权难,如党与踪迹,即以其间及后会之国安法案长至9,500頔,充限指用之公民自由,国会或总统行政办公室无人穷览也。
诸如围社区骚扰、电子通信遮截、街头剧院、衍生、上演车祸、谋杀、袭袭、入室盗窃、故坏诸暴人,皆帮与暴力剧目之一体,国会立法之无知,已为密合法化。
美国精神病学、专业心理学界为暴、有目所操,指归一人。 若人因其断言而临床诊为精神病,则好色逆人之美国计可不挑战而始。
当此之国,无一精神科医心理学家则可,有一人则堕。 反是,以为取费於人而诊之,可无精神疾病也。
事有激精神病学专业之心,将关精神病精神疾病之约/访获保险金,而群聚踵之。 其党竟以广场恐惧症。
此心医者更多问,各自行业更多收。
帮党踪迹又激刺医院行业,使免于堕流氓拙无教养之人,经历伤害性"事故"。
军事综合体亦得其宜。 军事工事监视,通信遮截技术及趋向人徒踪迹所用不见之兵机器所以用兵者近1,000,000,000,000,000,000.00美元纳税人资金之一也。
美国于买用兵革机器然使善政之集决无所用。 美国每岁军工联合体难题费几1万亿美元,且以无事可击,美国起己公民。
此场密战称为帮踪,多用昂贵无效之机器,机器方闲聚尘。 此所以激刺军工综合体,而不与妖政相高也。 />
美国于买用兵革机器然使善政之集决无所用。 美国每岁军工联合体难题费几1万亿美元,且以无事可击,美国起己公民。
此场密战称为帮踪,多用昂贵无效之机器,机器方闲聚尘。 此所以激刺军工综合体,而不与妖政相高也。
军工联合体者,美国政之大捐助者也,以为报,美国政客以万亿美元政奖之,而收敛机器制造商股价长。
Gangstalk者,兵之暴利企业,所以激刺军工综合体,所以杀公民自由,善治之机,与其宪法权利为价也。
美国今未尝有大兵,十余年未尝有也。 军工联合体及爱合者饥。 渴于军事冲突,以售美国数十亿美元之军事装备。
其党与司法部人合从。 其于美国联邦政府也,助之甚贵。 此一针之密战也。 车、行人、GPS、街角、隐摄像头、飞机/间飞机、舟楫、间谍船、守民不绝其号令、遮手机 ping、电子邮件、短信、电话、语音邮件、用卫星、互联网 24 少跟踪目标、用互联网卫星。 蜂窝、人力资本之术,与百方、州、联邦执法、半法,则控制目标私...... 诸党踪迹之参与者,及执法半执法人员,不知其方与密事街头踪迹破坏协议也。
美利坚合众国,国际贱民也。 其联邦驻外大使正美国正试他国,以党人踪迹为国家安则之一,其社区扰、场围及合法化杀不遂机制为法。 美国不欲为世界一支助动众随机制之国。 2001年9月11日之后,因数千个不见指定之用,密插国家安立法,以帮踪为法。 美国联邦立法机构正除美国宪,废美国权利法案,而弃民主国宪政共和国之位。 此一张空白支票(由美国纳税人供),用于军工综合体,其佐设备及天下恶意付费监视协议。 军工综合体,其融合中心,及其踪迹联邦街头,暴徒动机,已渗透到地方,州联邦政府美国企业好莱坞,凡美国媒体每一隙中,皆受灾难性国安协之约束,美国国会恐惧于9/11事。 愚心不在地,疏忽向世界。 美国国会释叛国纳税人助暴徒,谓之帮踪者。 其用身语信号系统以定位、坏、阻、伤、/扰之人。 -----------
美国为并土,以为一主权国家,为政立政,有大罪,有轻叛国罪害人。 此事在美利坚合众国为真,至于帮派踵此合法化前。 内外冒险之高昂,本非止此国也,其企业司也,其联邦也,州与政府,或其宗教团体也,在丑也,叛国也,费也,成本效下也,卒徒劳军工出项以求快意,此美国起于韩者也。 至越南,至伊拉克,至阿富汗,杀伤数千万人,并为美国兵机器工作作数万亿美元纳税人美元。 其党踪迹如此流氓美国企业。 美国以为公民密兵,将示民以制民。 美国负本国银行责为32,000,000,000,000.00美元,不能自持。 国会傀儡因不能之国安立法,授权群党随暴近亲繁殖之罪胁之,不能保美国之来。 -----------
美国法典易为篡改、操纵、破坏、超越、推覆。 美国之立法,其缺最大。 10,000頔法案,其无一国会或总统宣读,无所不投票,许以签署。
美国草而交国会表决者法案甚于第三方,第三方常用美国立法之隐形附件或指用之法案,附件为美国众毁灭性后患。
街头剧院 《帮派跟踪》之主题:美国暴徒小丑,对其公民战::
在美国密立法暴愚民兵(目前谓之帮派)中
有机曰街头剧场。 街头剧院者,所以供特定息也。 事可一事,人皆见此一奇。 街头戏剧之性,唯趋个体为能得奇。 此奇观者,人之所与踪也。
吾将为子言于子 7 年之党与踪迹之所遇者题。 此等主题及帮派随踪策划者动机,即因2001年9月11日后国家安全法案为此流氓计者指定用度为便。 以吾观之,设计者美国之世,示沮也。 帮派跟随的和他有用的白痴被以此为眼镜中的演员。
亲见街头剧院主题如下。
• 内战之终,非今日之论也。
• 反婚者,上帝之性也。
• 持奴隶制者,上帝之性也。
• 美国退伍军人无足支
• 比屋之教(传教者)不足贵也
• 拉丁美洲人异于上帝之前,不得美国人之尊也。
• 与黑人男子期婚者白人妇人当死系。
• 黑人宜在美国居一州,一与美国别州。
• 黑人行太速。 如在1964年,不得投票南州,多流氓行为针之。 然自1965至2012,美国黑人在电影,电视播,政体育界见名士爆炸式长,终于2008年为首黑人总统。 当是时,黑人法官、医、律师亦急增之。 此黑人于美国世成功摧毁久神学叙事,即黑人以邋遢和不动衷而为上帝所诅也。
•此国非黑人遗产之分也,以黑人为奴而非法移民所携也。
• 黑人为上帝所诅,助行其迹,则其诅证也,"上帝许之"也。
• 警察比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 兵比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 保安人员比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 私家侦候比名人尤可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 私辨承包商甚于名人。 言名人不为其社区冒危也。
• 保密线人比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 赏猎人,视名人尤可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 飞机飞行员比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
• 州警比名人更可关。 言名人不为其社区冒危也。
非法外国人应在此国得赦,上帝之旨也。
• 黑人宜行一美国异货。
• 种分离主义上帝之性也。
• 圣经宜是此土地官法。
• 耶穌基督後期徒教會應被允許行立法權于聯邦層面。
同性恋常也,宜正常化于世,同性恋者有位联邦体育、兵、法,三同性恋者无成功之域也。
• 童子宜被性化(娱乐业许),为性行为备,或口教导性习,然必以联邦道行之,并得二已婚父母之祝,其一方必有酬直之事,皆无罪录。 此宜教子性,而非学校也。
• 美利坚合众国,上帝之选民国也。
• 美国兵者,上帝之私器也。
• 美国之国际主义,上帝之大谋也。
纳税人钱好在兵革、监禁及外国干涉主义上。
• 美国当踪迹传于世界各地,上帝之计也。
• 基督教者,上帝之道也。
• 耶稣基督者,至善之神也。
•人宜善拉丁美洲人,以其将30岁为美国者众也。
• 非生可救也。
• 非人以义有用也。
• 党非联邦政府使也,人自为之也。
• 重罪不可雇者黑人可以为白人保镖。 与其使新从狱归之街,无所得也。
• 无为黑人童正教。 其未来之宜体力劳动(宜咕噜咕噜之事。
• 黑人运动员宜有体育盟,与美国别(自其童年时期始)。
合种则致战。
• 跨种非婚生交配是终极罪过。
• 来世种族隔离也。
• 政治家者,上帝之命也,唯其所司,不主选民。
• 命有在,人不易也。
• 有自生前去天堂者,有人当地狱者; 至耶稣基督不能自救。
• 某脏话、鄙鄙短语、侮辱宜监禁。
• 谋杀以外罪当坐"无期徒刑"。
• 力非一恶也,可以济事。
• 美国法"软",遏罪无效。
• 党者,所以威饰矫谋也。
•但联邦指,当暴徒可也。
• 暴徒者,何人可学,其世背景何如?
• 此流氓立法宜因国会法案,但通密5,000-10000頔法案。
人格非使敌人用,以其新耻取敌意也。 最终目标者,使人背己去官,动之动也,失其脱轨而攻扰之,致其招法戏剧(于党与踪者为最可取,以其为镇言也。 "言办公室","言教",以自名也,以牺牲为贵也。
世纪以来,其怪构在美国常为嫉妒暴怨之人,密谋激怒,以伤名誉,扇动者名故事。
恶意者,党跟踪者、同步、时、行也,其党随之者半代也,而得美国联邦政府全力支持助焉。
喜
论曰
共享
... 蓄废气以应人之兵者,美国公民之暴、懦、国之攻击机制也。 与同步车之阻,与其同步车之袭、同步车之杀人、同步车之过杀人于内流氓应物也,故用废气之于身伤者,计之一也。 招者或坐公共汽车站、商店、餐馆前坐,或车有入口、出口,暴徒驾驶者于他方开车、骑自行车、步、慢跑之跟踪者,得而示之,命之,置诸近距离而平行者,以指其车 排气管朝趋人之大端,以致命毒令人作呕之废气炸开。
与同步车之阻移也,废气之武器化重攻击机制,难征也。 此及他文侵性流氓性帮踪,设计难征。 如用废气难证为暴力犯罪,虽拍摄暴人之照片视频,亦难于庭之操作,故为身伤也。 察官难持,罪自隐令人发指也。 一氧化碳者,致命之药也,久接之,内外皆杀之。 住院治疗一人少于杀一人之药,犹一人之毒烟也。
党与者,法外之流氓也,政人类学文盲,军工综合体之所入也。 其於渗漏者,兵之暴利也,犹美国与三战之国战也。 若夫美国优先之兵,而增入军工之综合体,损肇事者之命。
党与踪迹者,美国国会之立法也,其最终目标者,所以伤身、残残、监禁、以他道收、贫穷、孤杀之也。
此臭美式计之善者,不省察,不读书。 当美国国有安危之问,投票赞成之。 虽自由、民主、宪政、法、公民、气、其集,常识其直损。
党与踪依于暴、匪、犯罪精神错乱者、企业破坏者、特工衅者、煽动者、敌对模仿者、仇雠者、狂妒者、马丁尼特人、腐败者、宗教狂热者、非法外国。 人、敌政者、分离主义者、文盲、半心半意者精神病、重罪、暴罪、助员、民兵,及他害、堕、暴、恐怖主义之美国公民、非公民也。
此国已授权帮踪,此暴徒游行,因2001年9月11他日仓卒立法以为其锚。
计非军工综合体与所向之害为食之外,无所不能。 国会、最高法院、司法部、国防部宜集为之羞。
美国联邦授权之徒踪迹协议,故传疾病、生物攻染之用皆是。
向人一派帮踪,则非公认之美国公民。 发送给司法部(联邦调查局、中央情报局)、国防部、州、联邦、军事告将遭腼腆无礼,驳为"不定"。
余全意所见,余揭帮派踪迹项目正受地方、州、联邦执法、半执法、军事派系者监控。 吾疑其绝大多数之不可,不信,或失望于吾言,而密察/监吾久以省吾道者美国联邦执法人员或踪迹为负面,或反不定。
_______________________________________________________________
美国国会议员,黄鼠狼也。 得六位数薪水于美国纳税人。 有美国纳税人私保镖。 其居公职,与美国纳税人委员会。 乘豪华轿车,预订美国纳税人私飞机航班。 其为美国纳税人何以报? 因违宪、流氓、近亲繁殖、暴力、杀人、糜费、烦人、迎合、愚蠢、令人震惊、私利、思虑不周之工流氓,表为2001年9月11日之"国家安"流氓,指嵌其中,帮踵为古拉格启发之徒。
暴美国联邦政府如沙漠之裘。 其参议院、众议院、最高法院、国防部、司法部、州、地方立法机构,及诸官僚,皆无用麻木暴徒之温床。
此国信心最下。 联邦法司以政命之大法官,因说者、政党、政治家、军工联合体而决之。
此国非人之资,亦非全球之资也。 在32,000,000,000,000,000.00美元债中,不过一台兵机器买,糟粕立法,万亿美元之预算署,喜拍照之会,无投标合同,国际烦恼。
其国立法机构不足于持美国宪法。 事实,我无宪法。 吾非宪法也,恶数百万条、无用、流氓、文盲、治美国之国安立法也。 宪法已为立法所覆。 美国联邦政府已移国于司法部国防部,自2003以来,司法部至于坏生自由追求幸福宪法。
Biochemistry, Jan 12, 2016
CCL21 chemokine binds the G protein-coupled receptor CCR7, aiding not only in immune response but... more CCL21 chemokine binds the G protein-coupled receptor CCR7, aiding not only in immune response but also in cancer metastasis. Compared with other chemokines, CCL21 has a unique extended unstructured C-terminus that is truncated in some naturally occurring variants. We have solved the X-ray crystallographic structure of a truncated CCL21 (residues 1-79) lacking the extended C-terminus, and identified, via 2D NMR, a putative sulfotyrosine-binding site that may recognize such post-translationally modified tyrosine residues on the receptor. Compared to the previously solved NMR structure of full-length CCL21, the crystal structure presents new druggable binding hot spots resulting from an alternative N-loop conformation. In addition, whereas the previous NMR structure did not provide any structural information after residue 70, the C-terminus of the truncated CCL21, ordered up to Ala77 in our crystal structure, is placed near the N-loop and sulfotyrosine-binding site, indicating that the...
Journal of medicinal chemistry, May 8, 2016
CXCL12 is a human chemokine that recognizes the CXCR4 receptor and is involved in immune response... more CXCL12 is a human chemokine that recognizes the CXCR4 receptor and is involved in immune responses and metastatic cancer. Interactions between CXCL12 and CXCR4 are an important drug target but, like other elongated protein-protein interfaces, present challenges for small molecule ligand discovery due to the relatively shallow and featureless binding surfaces. Calculations using an NMR complex structure revealed a binding hot spot on CXCL12 that normally interacts with the I4/I6 residues from CXCR4. Virtual screening was performed against the NMR model, and subsequent testing has verified the specific binding of multiple docking hits to this site. Together with our previous results targeting two other binding pockets that recognize sulfotyrosine residues (sY12 and sY21) of CXCR4, including a new analog against the sY12 binding site reported herein, we demonstrate that protein-protein interfaces can often possess multiple sites for engineering specific small molecule ligands that prov...
Biochemistry, Jan 9, 2015
In Gram-negative bacteria, the first step of lipid A biosynthesis is catalyzed by UDP-N-acetylglu... more In Gram-negative bacteria, the first step of lipid A biosynthesis is catalyzed by UDP-N-acetylglucosamine acyltransferase (LpxA) through the transfer of a R-3-hydroxyacyl chain from the acyl carrier protein (ACP) to the 3-hydroxyl group of UDP-GlcNAc. Previous studies suggest that LpxA is a critical determinant of the acyl chain length found in lipid A, which varies between species of bacteria. In E. coli and L. interrogans, LpxA prefers to incorporate longer R-3-hydroxyacyl chains (C14 and C12 respectively), while in P. aeruginosa the enzyme is selective for R-3-hydroxydecanoyl, a 10-hydrocarbon long acyl chain. We now report three P. aeruginosa LpxA crystal structures; apo protein, substrate complex with UDP-GlcNAc, and product complex with UDP-3-O-(R-3-hydroxydecanoyl)-GlcNAc. A comparison between the apo form and complexes identifies key residues that position UDP-GlcNAc appropriately for catalysis, and supports the role of the catalytic His121 in activating the UDP-GlcNAc 3-hyd...
International journal of oncology, 2013
Casein kinase II (CK2) inhibitors suppress cancer cell growth. In this study, we examined the inh... more Casein kinase II (CK2) inhibitors suppress cancer cell growth. In this study, we examined the inhibitory effects of a novel CK2 inhibitor, hematein, on tumor growth in a murine xenograft model. We found that in lung cancer cells, hematein inhibited cancer cell growth, Akt/PKB Ser129 phosphorylation, the Wnt/TCF pathway and increased apoptosis. In a murine xenograft model of lung cancer, hematein inhibited tumor growth without significant toxicity to the mice tested. Molecular docking showed that hematein binds to CK2α in durable binding sites. Collectively, our results suggest that hematein is an allosteric inhibitor of protein kinase CK2 and has antitumor activity to lung cancer.
Journal of Medicinal Chemistry, 2014
CXCL12 binds to CXCR4, promoting both chemotaxis of lymphocytes and metastasis of cancer cells. W... more CXCL12 binds to CXCR4, promoting both chemotaxis of lymphocytes and metastasis of cancer cells. We previously identified small molecule ligands that bind CXCL12 and block CXCR4-mediated chemotaxis. We now report a 1.9 Å resolution X-ray structure of CXCL12 bound by such a molecule at a site normally bound by sY21 of CXCR4. The complex structure reveals binding hot spots for future inhibitor design and suggests a new approach to targeting CXCL12−CXCR4 signaling in drug discovery.
Current Topics in Medicinal Chemistry, 2013
The chemokine CXCL12 and its G protein-coupled receptor (GPCR) CXCR4 are high-priority clinical t... more The chemokine CXCL12 and its G protein-coupled receptor (GPCR) CXCR4 are high-priority clinical targets because of their involvement in metastatic cancers (also implicated in autoimmune disease and cardiovascular disease). Because chemokines interact with two distinct sites to bind and activate their receptors, both the GPCRs and chemokines are potential targets for small molecule inhibition. A number of chemokines have been validated as targets for drug development, but virtually all drug discovery efforts focus on the GPCRs. However, all CXCR4 receptor antagonists with the exception of MSX-122 have failed in clinical trials due to unmanageable toxicities, emphasizing the need for alternative strategies to interfere with CXCL12/CXCR4-guided metastatic homing. Although targeting the relatively featureless surface of CXCL12 was presumed to be challenging, focusing efforts at the sulfotyrosine (sY) binding pockets proved successful for procuring initial hits. Using a hybrid structure-based in silico/NMR screening strategy, we recently identified a ligand that occludes the receptor recognition site. From this initial hit, we designed a small fragment library containing only nine tetrazole derivatives using a fragment-based and bioisostere approach to target the sY binding sites of CXCL12. Compound binding modes and affinities were studied by 2D NMR spectroscopy, X-ray crystallography, molecular docking and cell-based functional assays. Our results demonstrate that the sY binding sites are conducive to the development of high affinity inhibitors with better ligand efficiency (LE) than typical protein-protein interaction inhibitors (LE ≤ 0.24). Our novel tetrazolebased fragment 18 was identified to bind the sY21 site with a K d of 24 M (LE = 0.30). Optimization of 18 yielded compound 25 which specifically inhibits CXCL12-induced migration with an improvement in potency over the initial hit 9. The fragment from this library that exhibited
Scientific Reports, 2019
The lipid A biosynthesis pathway is essential inPseudomonas aeruginosa. LpxA and LpxD are the fir... more The lipid A biosynthesis pathway is essential inPseudomonas aeruginosa. LpxA and LpxD are the first and third enzymes in this pathway respectively, and are regarded as promising antibiotic targets. The unique structural similarities between these two enzymes make them suitable targets for dual-binding inhibitors, a characteristic that would decrease the likelihood of mutational resistance and increase cell-based activity. We report the discovery of multiple small molecule ligands that bind toP. aeruginosaLpxA and LpxD, including dual-binding ligands. Binding poses were determined for select compounds by X-ray crystallography. The new structures reveal a previously uncharacterized magnesium ion residing at the core of the LpxD trimer. In addition, ligand binding in the LpxD active site resulted in conformational changes in the distal C-terminal helix-bundle, which forms extensive contacts with acyl carrier protein (ACP) during catalysis. These ligand-dependent conformational changes ...
IEEE Transactions on Antennas and Propagation, 2000
James R. Wait was to the manor born in 1924. His father was the highest ranking officer in the Ro... more James R. Wait was to the manor born in 1924. His father was the highest ranking officer in the Royal Canadian Air Force in World War II. Jim received all of his academic degrees from the University of Toronto, Canada, where he received the B.A.Sc. degree in 1948, the M.A.Sc. degree in 1949, and the Ph.D. degree in 1952, all in engineering physics. He spent three years in the Radio Physics Division, Defense Telecommunications Research Establishment (DTRE), before joining the Central Radio Propagation Laboratory, National Bureau of Standards, Boulder, CO, in 1955, where he remained until 1980, weathering several reorganizations. In 1980, he accepted a Professorship at the University of Arizona, Tucson, and was appointed Regents Professor in 1988, retiring in 1989. He died of a brain tumor in 1998. Jim Wait was one of our finest, as well as most prolific, electromagnetic theorists and published over 800 journal papers and eight books.
The Journal of Chemical Physics, 1964
J Med Chem, 2012
The emergence of CTX-M class A extendedspectrum β-lactamases poses a serious health threat to the... more The emergence of CTX-M class A extendedspectrum β-lactamases poses a serious health threat to the public. We have applied structure-based design to improve the potency of a novel noncovalent tetrazole-containing CTX-M inhibitor (K i = 21 μM) more than 200-fold via structural modifications targeting two binding hot spots, a hydrophobic shelf formed by Pro167 and a polar site anchored by Asp240. Functional groups contacting each binding hot spot independently in initial designs were later combined to produce analogues with submicromolar potencies, including 6-trifluoromethyl-3H-benzoimidazole-4-carboxylic acid [3-(1Htetrazol-5-yl)-phenyl]-amide, which had a K i value of 89 nM and reduced the MIC of cefotaxime by 64-fold in CTX-M-9 expressing Escherichia coli. The in vitro potency gains were accompanied by improvements in ligand efficiency (from 0.30 to 0.39) and LipE (from 1.37 to 3.86). These new analogues represent the first nM-affinity noncovalent inhibitors of a class A βlactamase. Their complex crystal structures provide valuable information about ligand binding for future inhibitor design.
Journal of Biological Chemistry
The androgen receptor (AR) is a ligand-activated transcription factor that is essential for prost... more The androgen receptor (AR) is a ligand-activated transcription factor that is essential for prostate cancer development. It is activated by androgens through its ligand-binding domain (LBD) that consists predominantly of 11 alpha helices. Upon ligand binding, the last helix is reorganized to an agonist conformation termed activator function-2 (AF-2) for coactivator binding. Several coactivators bind to the AF-2 pocket through conserved LXXLL or FXXLF sequences to enhance the activity of the receptor. Recently, a small compound-binding surface adjacent to AF-2 has been identified as an allosteric modulator of the AF-2 activity and is termed binding function-3 (BF-3). However, the role of BF-3 in vivo is currently unknown and little is understood about what proteins can bind to it. Here we demonstrate that a duplicated GARRPR motif at the N-terminus of the cochaperone Bag-1L functions through the BF-3 pocket. These findings are supported by the fact that a selective BF-3 inhibitor or ...
Nature, 1968
Intermolecular forces, which are collectively called van der Walls * forces are electrical in nat... more Intermolecular forces, which are collectively called van der Walls * forces are electrical in nature. These forces can be divided into three categories: (1) Dipole-dipole (2) Dipole-induced dipole (3) Induced dipole-induced dipole (London force**)
Journal of the American Chemical Society, Jan 9, 2015
Ligand binding can change the pKa of protein residues and influence enzyme catalysis. Herein, we ... more Ligand binding can change the pKa of protein residues and influence enzyme catalysis. Herein, we report three ultrahigh resolution X-ray crystal structures of CTX-M β-lactamase, directly visualizing protonation state changes along the enzymatic pathway: apo protein at 0.79 Å, pre-covalent complex with non-electrophilic ligand at 0.89 Å, and acylation transition state (TS) analog at 0.84 Å. Binding of the non-covalent ligand induces a proton transfer from the catalytic Ser70 to the negatively charged Glu166, and the formation of a low-barrier hydrogen bond (LBHB) between Ser70 and Lys73, with a length of 2.53 Å and the shared hydrogen equidistant from the heteroatoms. QM/MM reaction path calculations determined the proton transfer barrier to be 1.53 kcal/mol. The LBHB is absent in the other two structures although Glu166 remains neutral in the covalent complex. Our data represents the first X-ray crystallographic example of a hydrogen engaged in an enzymatic LBHB, and demonstrates th...