Welche Funktionen haben sechs verschiedene Gene f�r sekretorische Proteinasen von Candida albicans? (original) (raw)
Charakterisierung der Interaktion zwischen Candida albicans und Wirtszellen
Der Hautarzt, 2008
Basic research on the biology and immunology of microbial infection requires appropriate model systems. Currently most such studies involve animal studies which are a focus of ethical controversy. Possible alternatives, especially for localized infections, are provided by models using in vitro reconstituted human epithelium or epidermis (RHE). In recent years, these model systems have been successfully established to evaluate the effectiveness of topical anti-infectives, to characterize the role of fungal virulence factors, and to study the immune responses during localized Candida albicans infections. Most recently, these models have been supplemented with immune cells such as lymphocytes, polymorphonuclear leukocytes, mast cells or dendritic cells, to study their role during the course of infection and to characterize the interaction between the skin barrier and accessory immune cells. Although the most experience is with Candida albicans RHE infections, such model systems can also be used to study infections with other fungi or bacteria.
Candida-Adhäsion: Pathogenitätsaspekte
2000
Der Hefepilz Candida verursacht eine klinisch charakteristische Schleimhautentzündung (Candidiasis). Eine entscheidende Rol- le für das Entstehen dieser Entzündung spielt die Adhäsion des Pilzes an Wirts- und artifiziellen Oberflächen in der Mundhöhle. Die Adhäsion basiert auf der Erkennung der Wirtsrezeptoren durch die Pilzadhäsine. Die Bindung der Adhäsine an die Wirts- rezeptoren bewirkt die Freisetzung proinflammatorischer Zytoki- ne, die den Entzündungsprozess einleiten.
2012
Candida albicans ist ein pathogener Pilz, der oberflächliche oder systemische Infektionen auslöst. Die physikalische Barriere der Haut, zelluläre Komponenten, wie Phagozyten und NK-Zellen, aber auch molekulare Komponenten, wie z.B. antimikrobielle Peptide (AMPs), schützen den gesunden Wirt vor dem Pathogen. Die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen sind nur teilweise verstanden. Der Fokus dieser Arbeit richtete sich auf das AMP LL-37. Das als wichtige epitheliale Schutzkomponente vor C. albicans-Invasionen geltende LL-37 wurde zu C. albicans (SC5314) bzw. zu vaginalen Epithelzellen (A431) sowie zum etablierten Co-Kultivierungssystems gegeben. LL-37 inhibierte das Wachstum von C. albicans, wenn Konzentrationen entzündungsähnliche Bereiche von 30µg/ml erreichten. Genexpressionsanalysen zeigten, dass die LL-37-Behandlung zu einer Hochregulation von Stressanwort-assoziierten Transkriptionsfaktoren und von Genen, die mit Glucose-Aufnahme und Kohlenstoff-Metabolismus verbunden sind s...
Funktionelle Analyse des Hypusin enthaltenden Proteins in Saccharomyces cerevisiae
2004
Hypusine is an unusual and unique posttranslational modification, conserved in evolution from halobacteria to man. However, despite being essential for life the function of the modification and the protein carrying it (Hypp) remains unclear so far. In yeast temperature sensitive mutants were generated and phenotypicly characterized. The investigation included proteomic and transcriptomic techniques. Furthermore binding assays using several Hypp fusion proteins were performed in order to find cellular protein and RNA interaction partners. Describing the phenotype of a highly temperature sensitive point mutated allele of Hypp a limited viability at restrictive temperature was shown leading to apoptotic cell death suggesting an antiapototic property of the protein. On the transcriptomic level studies using high density oligonucleotide micro arrays covering the whole yeast genome were performed. As also found on the protein level by 2D-gel analysis the impairment of mitochondrial functi...
Charakterisierung sekretorischer Lysosomen aus humanen T- und NK-Zellen
2009
Zytotoxische T-Zellen und natürliche Killerzellen eliminieren entartete oder virusinfizierte Zellen durch gezielte Freisetzung zytotoxischer Effektormoleküle aus sogenannten sekretorischen Lysosomen. In der vorliegenden Arbeit wurde eine Methodik zur Anreicherung intakter Organellen etabliert, die eine genauere Charakterisierung dieses Kompartimentes erlaubte. Mittels zwei-dimensionaler differentieller Gelelektrophorese (2D-DIGE) konnte das luminale Proteom sekretorischer Lysosomen verschiedener zytotoxischer Effektorzellen kartiert und mit einander verglichen werden. Darüber hinaus wurden Untersuchungen zur Reifung der sekretorschen Lysosomen sowie zur subzellulären Verteilung zytotoxischer Effektorproteine durchgeführt, die Hinweise auf unterschiedliche zytotoxische Effektor-Granula ergaben
Acta Biotechnologica, 1982
Growing conditions have been found out for the bacterium Arthrobacter GJM-I to produce a lytic enzyme system, which converts cells of the yeast Candida spec. H to protoplasts quickly and in a good yield. Estimating the activities of α-mannanase and β-glucanase we found out the optimal culture time to gain the lytic enzyme system from the culture filtrate. It was shown that radioactive labeling of the yeast cells makes it possible to estimate quantitatively the conversion to protoplasts and the simultaneous lysis. The obtained lytic enzyme system can substitute the snail cnzyme system which was used for cell conversion of Candida spec. H to protoplasts till now.
2014
Sactipeptides are a new class of ribosomal assembled and posttranslational modified, mostly bioactive peptides, which are assembled of 26 to 35 proteinogenic amino acids. Their character-istic feature is a thioether bond linking the sulfur atom of a cysteine residue with the α-carbon of an acceptor amino acid. Until now the amino acids phenylalanine, threonine, methionine, aspar-agine, serine, alanine and tyrosine were identified as acceptors. All known sactipeptides pos-sess of an inflexible helical fold. Partial a cyclized peptide backbone is found. The sporulation killing factor (SKF) contains an additional disulfide bridge as posttranslational modification be-sides the sactipeptide like thioether linkage. In this thesis the biosynthesis of the thioether bond formation in the sactipeptides subtilosin A and SKF was investigated. It was shown that enzymes AlbA (subtilosin A) and SkfB (SKF) cata-lyze the generation of the thioether linkages. These proteins were identified as radical...
1993
Mit CD44 bezeichnet man eine Familie von Membranproteinen, die unter anderem bei so unterschiedlichen Prozessen wie der T-Zellaktivierung, der Lymphozyten-Rezirkulation und der Tumormetastasierung eine Rolle spielen. Diese Proteinfamilie besteht zum einen aus einer CD44-Grundform (CD44s) und zum anderen aus einer Reihe von Varianten, die zusätzlich zur Aminosäuresequenz von CD44s Insertionen unterschiedlicher Länge besitzen (CD44v). Der CD44v-spezifische monoklonale Antikörper (mAk) 1.1ASML erkennt vier CD44vlsoformen unterschiedlichen Molekulargewichts auf der Zelloberfläche der metastasierenden Rattentumorzellinie BSp73ASML. Eine dieser CD44v-lsoformen, Meta-1, die zusätzliche 162 Aminosäuren im extrazellulären Anteil von CD44s enthält, vermittelt nichtmetastasierenden Tumorzellen Metastasierungsfähigkeit. In der vorliegenden Arbeit konnte gezeigt werden, daß die vier CD44v-Isoformen der BSp73ASML-Zellinie Produkte eines alternativ gespleißten CD44-Primärtranskripts darstellen und durch N-und 0-glykosidisch gebundene Oligosaccharide sowie mit Neuraminsäure-Resten modifiziert sind. Durch PCR-Amplifikation wurde eine zweite CD44v-Isoform, Meta-2, aus cDNA der BSp73ASML-Zellinie isoliert. Meta-2 weist nur die 85 C-terminalen Aminosäuren des varianten Bereiches von Meta-1 auf und stellt somit die kleinste nachweisbare CD44v-Isoform der BSp73ASML-Zellinie dar. Nach Transfektion und Expression in einer nichtmetastasierenden Zellinie ist Meta-2 in der Lage, ebenso wie Meta-1, Metastasierungsfahigkeit zu induzieren. CD44v Proteine konnten mittels immunhistochemischer Methoden auch auf verschiedenen normalen Zelltypen, z.B. auf Keratinozyten der Haut, auf Zellen an der Basis der Lieberkühnsehen Darmkrypten und auf aktivierten Lymphozyten nachgewiesen werden. Um mögliche Funktionen von CD44v-Isoformen, z.B. die Bindung eines spezifischen Liganden oder die Wechselwirkung mit Komponenten der extrazellulären Matrix, zu untersuchen, wurden mit gentechnischen Methoden lösliche, leicht nachweisbare Formen von Meta-1 und CD44s hergestellt. Mit diesen löslichen CD44-Proteinen (sog. Rezeptorglobulinen) konnte eine starke Bindung an Tumor-assoziierte Hyaluronsäure, jedoch nicht an andere Komponenten der extrazellulären Matrix, festgestellt werden.