Abordajes Para La Clonación De Los Productos De Secreción Del Adulto De Taenia Solium TSES33 Y TSES38. Estudio Preliminar De La Antigenicidad De Las … (original) (raw)

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Las moléculas TSES33 y TSES38 son antígenos de secreción producidos por los adultos de Taenia solium, descritos previamente por su interés en el diagnóstico específico de teniosis intestinal. En el presente trabajo se diseñaron dos estrategias para su clonación, transcripción reversa del ARN a ADNc acoplado a amplificación posterior (RT-PCR) y síntesis de ADNc quimérico. En el caso de TSES38, la aproximación de RT-PCR permitió su obtención a partir del diseño de cebadores (primers) específicos y empleo de ARNms de cuello/escolex y proglótides maduras-grávidas del adulto de T. solium. Para la clonación de TSES33, fue necesaria la preparación de una molécula quimérica, sintetizando en primer lugar fragmentos truncados solapantes de la molécula mediante PCR que finalmente fueron ligados. Tras la obtención de los correspondientes ADNcs completos, éstos fueros subclonados en vectores de expresión, pGEX-4T, para la inducción de la expresión de las proteínas recombinantes en el sistema procariota. Los productos recombinantes obtenidos resultaron ser insolubles y, si bien fueron ensayados en "Western blot", no fueron reconocidos por los ARTICULO Salus online Vol.12 Sup. 1 -Biología Molecular -Taenia solium TSES33 y TSES38. Abordajes para clonación p. 186

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