Caracterização de dois genes contíguos de Trypanosoma cruzi que codificam antígenos com repetições de epitopos imunodominantes (original) (raw)

Caracterização da região promotora do cístron de RNA ribossômico em duas linhagens filogenéticas de Trypanosoma cruzi

2000

A Bianca Zingales, pelo espírito critico, pela cuidadosa revisão deste trabalho, por ter me ensinado a ter autonomia e buscar as informações que me faltavam. A Ricardo Peres do Souto, a quem devo grande parte desse trabalho. Pela orientação, pelas discussões, pela convivência. Ao pessoal do laboratório: Femando, Nancy, Marcia, Marcelo, Amaldo, Aurélio, pelo companheirismo e pela colaboração em tantos momentos. Mais do que colegas, vocês se tornaram grandes amigos. Ao Femando, por ouvir tantos desabafos e questionamentos... Ao Arthur, por inúmeros ensinamentos, pela seriedade no trabalho, por vários conselhos e conversas. A Clarita, minha segunda mãe, pelo carinho, preocupação, consideração.

Análise proteômica de formas tripomastigotas diferenciadas in vitro do Trypanosoma rangeli e caracterização de antígenos diferenciais ao Trypanosoma cruzi

2012

Ao meu orientador e amigo Dr. Edmundo Carlos Grisard, pela oportunidade, confiança, paciência e por ter aceito o desafio de me orientar. Obrigado pelos ensinamentos, não apenas técnicos, científicos e didáticos, mas também por aqueles que serão levados para a minha vida profissional e pessoal. Foram 10 anos de convívio onde sempre fui instigado por você a buscar algo a mais, a aprender algo novo, a ter um diferencial, a buscar novos horizontes, onde pouco poderiam buscar, você é um grande mestre. Muito obrigado por tudo. Ao Dr. Hércules Moura, pela oportunidade de trabalhar no CDC, pela confiança, paciência, amizade e grandes ensinamentos. Espero um dia poder retribuir toda a atenção que tiveste comigo. A minha esposa Adriana, que sempre esteve perto, me apoiando, incentivando e me acalmando quando em dificuldades. Muito obrigado por ser esta pessoa maravilhosa, paciente e carinhosa, você foi fundamental para que chegasse neste ponto da minha vida, que agora é nossa. À minha família, meu pai Almir, minha mãe Claudete e meu irmão Willian (in memorium) que sempre me apoiaram, incentivaram e entenderam a minha ausência nos momentos festivos ou de dificuldades. Amo vocês, vocês são o segredo de tudo e a iluminação dos meus caminhos. A minha família de coração, meu sogro Ademar e sogra Getrudes, minhas cunhadas, Denise e Luciana, que sempre nos apoiaram e estiveram dispostas a ajudar nos momentos que mais precisava. Aos meus familiares, minhas avós, tios, tias, primos e primas, meu irmão de coração Marquinhos. Sempre que precisei de vocês, vocês estenderam a mão. Uma grande pessoa é formada sempre por uma grande e unida família. Aos professores Dr. Álvaro, Dr. Mário e Dr. André, pela amizade e conselhos durante estes anos de convívio. A Dra. Patrícia, pela amizade, longas conversas, ensinamentos e pela fundamental ajuda durante este tempo. Agradeço à minhas colegas de Laboratório e de Doutorado, Débora e Aline. Vocês foram pessoas fundamentais para a realização deste trabalho, pois este é fruto de um trabalho em equipe.

Cariótipo molecular: uma ferramenta para o estudo analítico e evolutivo do genoma de Trypanosoma cruzi

Although all classical lines of evidence point to the fact that Trypanosoma cruzi has a predominantly clonal evolution, accumulating data show that some T. cruzi stocks are the result of hybridisation events. We evaluated whether chromosomal polymorphism would give evolutionary information on hybrid isolates. Twenty-three coding sequences were mapped on the chromosomes of nine parasite stocks, four of which are putative hybrids (CL Brener and rDNA group 1/2). Phenetic analyses of karyotype data were based on the absolute chromosomal size difference index (aCSDI), a method that assumes that the genomic distance between two organisms is the sum of the size differences between their homologous chromosomes. aCSDI-based dendrograms obtained from a variable number of probes (3-18 probes) defined in all the cases three clusters: two corresponding, respectively, to T. cruzi I and T. cruzi II groups; and a third one, to rDNA group 1/2. CL Brener was alternatively positioned in T. cruzi II or rDNA group 1/2 clusters. Three clusters were also observed in the dendrogram constructed with restriction fragment length polymorphism (RFLP) data from 18 probes. The topology of the chromosome and RFLP dendrograms is similar, with a significant correlation coefficient (r = 0.86062; P < 0.0001), supporting a strong structuring of the clusters. This study also revealed that hybrid stocks have a larger proportion of two different-sized homologous chromosomes, as compared with non-hybrid strains. Overall, our results show that chromosomes are valuable characters for identification of evolutionary groups, in particular, T. cruzi hybrid organisms.

Caracterização da propriedade imunoestimulatória de Virus-like particles de Triatoma virus e antígenos recombinantes quiméricos de Trypanosoma cruzi

Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2020

The infection caused by the protozoan Trypanosoma cruzi affects humans and is called Chagas disease. Currently, the main measures available to reduce the incidence of this disease are drug treatment and vector control. The development of vaccines is mainly through the use of antigens of the etiologic agent. Virus-like particles (VLPs) are structures analogous to viral capsids composed essentially of structural proteins, they have no viral genetic material and are widely used in vaccination protocols because of their immunostimulatory properties. In this context, the objective of this study was to use strategies in a murine immunization model to characterize the immunostimulatory capacity of virus-like particles from Triatoma virus (VLPs-TrV), analyzed in the presence or absence of the aluminium hydroxide vaccine adjuvant. In parallel, observing the immunogenic behavior of four T. cruzi chimeric recombinant proteins in mix form (mix-IBMP) associated or not with the VLPs-TrV. For this, BALB/c mice (Mus musculus) were immunized once or twice, depending on the strategy, with serum samples collected 15, 30 and 45 days after the immunization. Subsequently, serum samples from animals immunized with VLPs-TrV were obtained at different times after immunizations. The total IgG, IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 specific antibody profile was determined by enzyme immunoassay. The data obtained demonstrate the ability of VLPs-TrV, without the presence of aluminum, to preferably induce IgG2b and IgG3 type antibodies; in fact, the use of aluminum did not interfere with the total IgG profile. In addition, mix-IBMP has a better profile of total IgG and IgG1 and IgG3 subclasses when associated with VLPs-TrV, even with the possible antigenic competition between the VLPs-TrV and IBMP proteins. In conclusion, these results contribute to the possible use of VLPs-TrV as an adjuvant in vaccine formulations in a murine model, although the mechanisms in inducing the polarized cellular immune response to Th1 need to be more clearly understood. In addition, evaluating the use of proteins in new protocols in vivo as antigenic candidates is interesting.

Geração e análise comparativa de seqüências genômicas de Trypanosoma rangeli

2006

e pela aposta no meu trabalho, mesmo sabendo que jamais havia trabalhado com biologia molecular e bioinformática. Vocês são pessoas em que me espelho e afirmo sem nenhum constrangimento, que se chegar a ter o conhecimento que vocês possuem, estarei realizado. Obrigado por tudo!!!!!!. Agradeço aos meus pais, Almir e Claudete, pelo apoio, carinho, ajuda nos momentos difíceis, pelo apoio financeiro é claro, pelas conversar e por me ouvir falar desse trabalho, mesmo sem entender nada do que eu estava falando, vocês são demais!!!!! Ao meu irmão Willian, que esteve comigo até a metade dessa jornada de corpo presente, e que após sua partida esteve ao meu lado sempre, nos meus pensamentos e no meu coração e assim sempre ficará. Você é um anjo que deu um "rolé" pela terra e agora está cumprido seu papel ai em cima, dando força a todos…. Obrigado por ter sido meu irmão… sempre!!!!! A minha noiva e futura esposa, Adriana, pelo amor e carinho, amizade, conversas e principalmente pela compreensão, onde mesmo a distância esteve sempre do meu lado me apoiando. Você sempre foi e será muito importante para mim, sem você eu não chegaria aqui …. Te amo demais, obrigado por tudo!!! Ao Dr. Mário, que além de participar da banca, aceitou em ser o revisor deste trabalho e também pela ajuda e conselhos durante estes anos de convívio. Muito Obrigado... Agradeço a Dra. Maria Cláudia (Yoko), Dra. Maria Luiza, Dra. Yara e Dr. Alexandre por terem aceito participar dessa banca e pelo grande auxílio de todos durante a execução deste trabalho. Aos meus familiares, tios, primos, sogro, sogra e cunhadas, pelas conversas e churrascos que sempre me fizeram bem, principalmente nos momentos difíceis dessa caminhada. Aos meus colegas de Laboratório de biologia molecular do Rio, Priscila, Luana e Silvana pela ajuda interminável na construção da biblioteca, pela amizade e conversas no momento do café.... viii Meus amigos e colegas do laboratório de Protozoologia, Patrícia, Juliana, Rodrigo, Gianina, Cris e Taís, pela ajuda durante o seqüenciamento, pela amizade, pelas conversas, pelas brincadeiras. Devo muito a vocês!!!!. A minha colega de bioinformática Kary, pela ajuda, amizade, paciência e acima de tudo pelas longas horas de conversa nos momentos em que eu mais precisa bater um papo!!!! Você sempre será bem vinda na minha casa..... com certeza posso afirmar que você foi uma irmã para mim no Rio!!! Gracias!!!!

Comportamento biológico e caracterização molecular de infecção mista com clones de Trypanosoma cruzi ao longo de passagens alternadas entre hospedeiros invertebrado e vertebrado

2011

Agradeço a DEUS por ter me dado a capacidade de estudar a vida. À Prof a. Marta de Lana, por abrir as portas do mundo da ciência e me orientar desde minha graduação. Pessoa pela qual tenho adimiração, carinho e gratidão. Agradeço pelos ensinamentos, confiança, estímulos, apoio e oportunidade para realizar este projeto. Meu muito obrigado. Ao Prof. Evandro, que aceitou co-orientar o trabalho. Pessoa que não poupou esforços e se mostrou sempre disposto a ajudar e sanar as dúvidas que surgiam no dia-dia. À Prof a. Helen, pelos ensinamentos desde a iniciação científica. Por me receber em seu laboratório em Diamantina e compartilhar os conhecimentos da técnica de isoenzimas. Concomintatemente agradeço as conversas que me auxiliaram na elaboração deste trabalho. À Prof a. Vanja, pela sua disposição e colaboração no RAPD. Obrigado. Ao Auffy por me co-orientar na iniciação científica e pela amizade que construimos ao longo desses anos. Aos Prof. André Talvani e Prof a. Maria Terezinha Bahia pelos exemplos de profissionalismo e dedicação científico-acadêmica. Admiro muito vocês. Aos professores do NUPEB que ajudaram de forma indireta ou direta nessa caminhada, com espaço físico, empréstimo de equipamentos ou mesmo reagentes, além dos ensinamentos teóricos. Aos técnicos do laboratório de doença de Chagas, CCA-UFOP por sempre estarem dispostos para ajudar no que era preciso.

Estudo dos genes que codificam as proteínas antioxidantes em populações do trypanosoma cruzi sensíveis e resistentes ao benzonidazol

2009

Agradeço a Deus pelo dom da vida e por me acompanhar sempre. Por permitir alcançar mais este objetivo, guiando meus passos e pensamentos. Por ser presença marcada na minha vida. Agradeço, em especial, aos meus pais Sonia Maria Barbosa Nogueira e Evaldo Nogueira e a minha irmã Flávia Babosa Nogueira, pelo apoio nos momentos difíceis, carinho, amor, compreensão e dedicação sempre, apesar da distância. Ao meu avô Jayme pelos conselhos e por passar experiências de vida. E a todos da minha família que de forma direta ou indireta colaboraram para mais essa conquista na minha vida. Agradeço ao meu marido Toni, pelo apoio, paciência, compreensão e amor, durante os quatro anos de doutorado e principalmente nestes meses finais da tese. Agradeço a Dra. Silvane Maria Fonseca Murta, por ter me orientado durante esse período, pelo apoio e dedicação. Ao meu co-orientador Dr. Alvaro José Romanha, que por um tempo foi orientador, pela assistência, confiança, carinho e pelos ensinamentos durante toda minha tese. Agradeço a vocês pelo ensinamento profissional e pessoal. Agradeço aos participantes da banca examinadora por terem aceitado meu convite; o