Avaliaçäo do teste de aglutinaçäo direta na detecçäo da infecçäo por Leishmania (Viannia) braziliensis em possíveis reservatórios de leishmaniose tegumentar … (original) (raw)

Ensaio Imunoenzimático com Antígeno de Leishmania (Viannia) braziliensis no Diagnóstico e Acompanhamento de Pacientes com Leishmaniose Tegumentar Americana

2009

Indirect Enzyme Immunoassay (ELISA) was evaluated with Leishmania (V.) braziliensis antigen to the diagnostic workup of American Tegumentary Leishmaniasis (American Tegumentary Leishmaniasis-ATL) in their cutaneous (CL) and mucocutaneous (MCL) modalities, and about the therapeutic response from samples of serum from patients at the Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas (IPEC). Group I, ACL (n = 153) was formed with sera samples of patients with at least one positive result in parasitological examinations or in polymerase chain reaction (PCR), and group II, control (n = 103), with samples of individuals representative of the study population, with initial suspicion of ACL, but with other confirmed diagnosis. The following information was obtained from medical records: clinical, dermatological, and otorrinolaringology evaluation; measure in mm of Montenegro intradermoreaction (IDRM); search for Leishmania by direct examination and histopathology, isolation in culture media, PCR and direct examination with special staining and inoculation in culture media for fungi and mycobacteria. Samples were obtained during the diagnostic workup and after treatment, in periods defined as up to two years. We compared the sensitivity of the ELISA with each of the individual parasitological methods, the PCR, and the IDRM. To evaluate the therapeutic response, samples of 75 patients who remained with the lesions healed during the study period were the therapeutic healing subgroup (ICT) and those 31 patients with recurrences were the post-therapy relapse subgroup (IRT). The reliability of the test assessed by the intraclass correlation coefficient was 0.953 (95% CI). We found a sensitivity of 94.7% and 95.1% specificity, and positive and negative predictive values of 96.6% and 92.4%, respectively. There was no statistically significant difference between the sensitivities found in ELISA, PCR and IDRM (95% CI, Chi-square p-value = 0.140 and p-value = 0.498). The same did not happen with the remainder parasitological methods (p-value <0.001). The analysis of the humoral response to therapy have demonstrated a decrease of the antibody response in patients of subgroup ICT, significantly lower at six months after treatment (Wilcoxon; p-value = 0.016), with 51.8% of patients non reactors at the end of two years after the therapy. The others remained mild reactors. Contrarily, in subgroup IRT, a small reduction of the intensity of the reactions, was followed by the increase in the values of optical density that reached higher levels during recidive. Analyzed together, the results of samples from the IRT subgroup were significantly higher than those from the ICT subgroup (Mann-Whitney; p-value <0.0001). The intensity of reactions and the frequency of reactors there were reduce from the six months after the therapia sustaining this thendency afther the clinical cure. When comparing the intensity of reactions and frequency of reactors in each point of follow-up there were differences from the sixth month of therapy and clinical cure (Mann-Whitney; p-value = 0.046 and p-value 0.009). The results show a good performance of the ELISA in the differential diagnosis of ACL and the assessment of therapeutic response.

Leishmaniose tegumentar americana causada por Leishmania (Viannia) braziliensis, em área de treinamento militar na Zona da Mata de Pernambuco

Revista Da Sociedade Brasileira De Medicina Tropical, 2005

The aim of work was to study the epidemiology of American tegumentary leishmaniasis in a military training unit situated in Zona da Mata region of Pernambuco State. Between 2002 and 2003 twenty-three cases were notified by clinical exam, detection and/or isolation of parasite and Montenegro skin test. Seven stocks of Leishmania (Viannia) braziliensis were obtained from patients, identified by a panel of specific monoclonal antibodies and isoenzymatic electrophoresis profiles. An epidemiologic survey on prevalence of infection was carried out by Montenegro skin test in the population that underwent training activities during the same period, out of which 25.3% were identified as positive. These results in association with previous data from this area, shows the maintenance of a primary transmission cycle and the occurrence of periodical outbreaks after training activities in local areas of remnant Atlantic rain forest.

Detecção de DNA de Leishmania braziliensis em pacientes de leishmaniose tegumentar americana

Revista de Saúde Pública, 2010

Artigo disponível em português | inglês em www.scielo.br/rsp Detecção de DNA de Leishmania braziliensis em pacientes de Leishmaniose Tegumentar Americana Detection of Leishmania braziliensis DNA in American Tegumentary Leishmaniasis patients RESUMO Foi realizado diagnóstico para leishmaniose tegumentar americana a partir de sangue de pacientes residentes em dois municípios endêmicos do estado de Pernambuco. O DNA de 119 amostras de sangue foi extraído e submetido a reação em cadeia da polimerase. Utilizaram-se primers do minicírculo do DNA do cinetoplasto (kDNA) de Leishmania braziliensis, circulante em Pernambuco, cuja seqüência-alvo gera um fragmento de 750 pares de bases. No total 58 (48,7%) indivíduos apresentaram amplificação positiva e 61 (51,3%) negativa. Das amostras positivas para a PCR, 37 (≅ 64%) pertenciam a indivíduos tratados e sem lesão. Conclui-se que a técnica de PCR é eficaz para identificar o DNA de leishmania em material de biópsias e em sangue venoso.

Observações sobre o diagnóstico laboratorial e a epidemiologia da leishmaniose tegumentar no Estado do Paraná, sul do Brasil

Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, 1999

De 1986 a 1997 foram encaminhados ao Laboratório de Ensino e Pesquisa em Análises Clínicas, da Universidade Estadual de Maringá, 1418 pacientes suspeitos de leishmaniose tegumentar para diagnóstico laboratorial. Os testes utilizados foram a intradermorreação de Montenegro, reação de imunofluorescência indireta, pesquisa direta, isolamento e identificação de Leishmania. Destes pacientes, 955 (67,3%) apresentaram pelo menos um dos testes positivo, entre os quais 804 (84,2%) contraíram a infecção no Estado do Paraná, 665 (69,6%) tinham de 15 a 49 anos de idade, 658 (68,9%) eram do sexo masculino, 523 (54,8%) foram diagnosticados nos 3 primeiros meses de evolução da lesão e 74 (7,7%) apresentavam comprometimento nasobucofaríngeo. Dos 83 municípios do Estado do Paraná envolvidos, destacaram-se São Jorge do Ivaí (10,2%), Doutor Camargo (9,8%), Terra Boa (7,3%), Maringá (7,3%), Jussara (6,0%) e Cianorte (4,5%). Foram isoladas 77 cepas de Leishmania (Viannia) braziliensis, predominando (63,...

Métodos Diagnósticos da Leishmaniose Tegumentar: Fatos, Falácias e Perspectivas

Pesquisas clínicas e laboratoriais recentes têm atentado para os aspectos individuais, entomológicos e epidemiológicos das diferentes manifestações clínicas da leishmaniose tegumentar. Nas áreas endêmicas, o diagnóstico ideal deve ser realizado na fase inicial da apresentação clínica, para evitar as complicações da doença cônica. A escassez de suporte financeiro, estrutura laboratorial e pessoal especializado representam obstáculos importantes para esta realidade. Investigações diagnósticas tradicionais para casos individuais incluem a pesquisa de uma história sugestiva e características clínicas, a identificação de amastigotas através da histologia ou microscopia direta e testes sorológicos. O diagnóstico através da reação de polimerase em cadeia (PCR) parece representar uma técnica inovadora, tornando possível a rápida identificação de espécies e subespécies. A proposta desta revisão é discutir algumas das mais importantes questões do diagnóstico clínico e laboratorial da leishmaniose tegumentar. A sensibilidade e especificidade dos velhos e novos testes para identificar o parasita, produtos antigênicos, a resposta imunológica do hospedeiro e o diagnóstico molecular por PCR são considerados. Palavras-chave: Leishmania, diagnóstico, leishmaniose, Montenegro, PCR. Recent clinical and laboratory research has addressed the individual, entomological, and epidemiological aspects of different clinical manifestations of tegumentary leishmaniasis. In endemic areas, diagnosis should ideally be made during the initial phase of the clinical presentation of the disease to preclude complications of chronic disease. The scarcity of financial support, laboratory installations and qualified personnel represent important obstacles to achieving this goal. Traditional diagnostic tools for individual cases include the search for suggestive clinical history and features, the identification of amastigotes by histology or direct microscopy, and serologic tests. Polymerase chain reaction (PCR) seems to represent an innovative diagnostic technique, enabling the fast identification of Leishmania species and subspecies. The purpose of this review is to discuss some of the more important issues related to the clinical and laboratory diagnosis of tegumentary leishmaniasis. The sensitivity and specificity of both old and novel tests used to identify the parasite, antigenic products, the host immune response, and the molecular diagnosis by PCR are all discussed in this paper.

Fatores relacionados à ocorrência de leishmaniose tegumentar no Vale do Ribeira

Revista Da Sociedade Brasileira De Medicina Tropical, 2010

Introdução: este estudo teve como objetivo identificar fatores ambientais e sociais determinantes na incidência da leishmaniose tegumentar americana no vale do Ribeira no período de 1998 a 2006. Métodos: Foram utilizados dados secundários de domínio público dos 23 municípios que integram a região. O intervalo de tempo foi dividido em três períodos, pelas características gráficas dos coeficientes de incidência, os quais foram submetidos à análise por regressão linear múltipla. Resultados: para o período de 1998 a 2000, as variáveis correlacionadas com a LTA foram índice de desenvolvimento humano médio (p = 0,007), renda per capita (p =0,390) e grau de urbanização (p = 0,079). No período de 2001 a 2003 e 2004 a 2006 as variáveis correlacionadas com LTA foram: a existência de flebotomíneos (p = 0,000 e p = 0,001) e a população urbana média (p = 0,007 e p = 0,001). Conclusões: esses dados demonstram a tendência de pauperização e urbanização da doença. Palavras-chaves: Leishmaniose tegumentar americana. vale do Ribeira. Regressão linear múltipla. Fatores sociais. Fatores ambientais. Dados secundários.