Análise dos genes diferencialmente expressos durante a osteodiferenciação induzida por proteínas morfogenéticas de osso (BMP2 e BMP7) em células C2C12 e super-expressão de rhBMP2 e rhBMP7 em células de mamíferos (original) (raw)
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2015
EXPRESSION OF GROWTH AND DIFFERENTIATION FACTOR 9 (GDF9) AND BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 15(BMP15) AND THEIR EFFECT ON IN VITRO LUTEINIZATION OF BOVINE GRANULOSA CELLS Fernanda Paulini, Eduardo de Oliveira Melo School of Agronomy and Veterinary Medicine UnB, Brasília, DF, Embrapa Genetic Resources and Biotechnology, Brasília, DF Granulosa cell culture is carried out to establish a similar steroidogenesis environment found in ovarian follicles. Somatic follicular cells spontaneously luteinize and modify their steroidogenesis activity when the oocyte is removed in the same away it happens in vivo. The GDF9 and BMP15 are oocyte secreted factors that have an important role on the luteinization of granulosa cells, but their effects are not totally understood. With the culture of transgenic bovine granulosa cells this work aimed to express the genes GDF9 and BMP15 and evaluate their effects on the luteinization process. Samples of cells and culture medium were obtained during 21 consecutiv...
Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia, 2011
Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da T3 na expressão da osteocalcina, osteo pontina e colágeno I durante a diferenciação osteogênica das célulastronco mesenquimais (CTM). Materiais e métodos: As células da medula óssea de ratas Wistar jovens foram extraí das, cultivadas e separadas em cinco grupos: controle (indiferenciado), diferenciado (estímulo osteogênico) e diferenciado com T3 (10 3 nM, 10 2 nM e 100 nM). Para cada grupo, foram culti vadas quatro amostras que foram analisadas por RTPCR tempo real aos 7, 14 e 21 dias, para quantificação dos transcritos gênicos para osteocalcina, osteopontina e colágeno I. Resultados: Todos os grupos diferenciados sem T3 ou com T3 independentemente da concentração apre sentaram expressão de colágeno I significativamente menor e expressão de osteocalcina e os teopontina significativamente maior em comparação a das CTM indiferenciadas. Mas o grupo T3 100 nM apresentou concentração de osteocalcina mais elevada e semelhante à da cultura de osteoblastos. Conclusão: Concluise que a triiodotironina não altera a expressão de osteoponti na e de colágeno pelas CTM, mas aumenta a expressão da osteocalcina durante a diferenciação osteogênica in vitro, sendo esse efeito dosedependente. Arq Bras Endocrinol Metab. 2011;55(5):339-44 Descritores Célula-tronco; diferenciação osteogênica; triiodotironina; proteínas ósseas ABSTRACT Objective: The aim of this study was to evaluate the effect of T3 on the expression of osteocal cin, osteopontin and collagen I during osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells (MSC). Materials and methods: The bone marrow cells of Wistar rats with 30 days of age were extracted, cultured and separated into five groups: control (undifferentiated), differentiated (os teogenic stimulus) and differentiated with T3 (10 3 nM, 10 2 nM and 100 nM). For each group, four samples were cultured and were analyzed by real time RTPCR at 7, 14 and 21 days for quantification of gene transcripts for osteocalcin, osteopontin and collagen I. Results: All the different groups without T3 or with T3 regardless of the concentration, showed the collagen I expression significantly lower expression, and osteocalcin and osteopontin expression signi ficantly greater than that of undifferentiated MSC. Nevertheless, the group T3 100 nM showed higher expression of osteocalcin and a similar expression of the osteoblast culture. Conclusion:
2016
Osteogenesis Imperfecta (OI) is a clinically and genetically heterogeneous disease predominantly characterized by bone fragility and deformity and recurrent fractures. Most cases of OI result of autosomal dominant mutations in COL1A1 and COL1A2 genes that encode the chains forming type I collagen, the main protein in bones. In the past few years, an increasing number of cases due to recessive mutations has been reported in genes associated with the biosynthesis of type I collagen or to the formation and bone mineralization, such as LEPRE1, CRTAP, PPIB, FKBP10, SERPINH1 and SERPINF1. Mutations in these genes, in general, lead to the development of severe and lethal OI phenotypes. In this work, LEPRE1, CRTAP, PPIB, FKBP10, SERPINH1 and SERPINF1 of 25 OI patients were analyzed using SSCP and automated sequencing. Altogether, 29 genetic variations were detected, mutations and polymorphisms. Among the eleven variants found in LEPRE1 gene, there are the already well described c.1080 + 1G> T and the potentially deleterious mutations c.2024G> A / p.Lys363Glu and c.1501C> T / p.Arg501Trp. In FKBP10 gene, the previously described duplication c.831dupC, and c.1546G>A / p.Leu516Phe, predicted to be disease causing, were detected. It was observed that FKBP10 and LEPRE1 contain the most important mutations found in the patients studied in this work and it is suggested that LEPRE1 and FKBP10 should be preferably analyzed in studies of screening and identification of mutations in patients with OI. To date, there are no reports of mutations in LEPRE1, CRTAP, PPIB, FKBP10, SERPINH1 and SERPINF1 genes in Brazilian patients and this study provides new information on the genetic aspects of recessive OI.
2020
As células-tronco de dentes decíduos exfoliados, isoladas como uma subpopulação das células-tronco da polpa dentária, demonstram possuir a capacidade de se diferenciarem in vitro em neurônios, adipócitos, odontoblastos e osteoblastos. Devido a sua facilidade de obtenção, que não envolve um procedimento invasivo, esta linhagem celular é considerada uma grande promessa para a medicina regenerativa. Os objetivos deste trabalho foram estabelecer e caracterizar duas linhagens de células-tronco de dentes decíduos humanos. As linhagens foram isoladas a partir de amostras de crianças saudáveis de 6 anos de idade. Os resultados mostraram, por citometria de fluxo, que as células foram positivas para marcadores de células-tronco mesenquimais (CD105 (SH2), SH3 e SH4) e negativa para a marcação hematopoiética (CD45) e que as linhagens estabelecidaseram constituídas de uma população homogênea de células-tronco. As células obtidas foram avaliadas quanto a sua proliferação e capacidade de diferenci...
A minha querida Professora e Orientadora Márcia Martins Marques quem me acompanhou com tanto carinho e dedicação durante toda a jornada do Doutorado. Obrigada pelo exemplo de competência, força, ética, profissionalismo, determinação, respeito aos alunos e amor à pesquisa, à docência e à Odontologia. Obrigada por todos os ensinamentos que não ficaram só restritos ao âmbito científico, mas também que auxiliaram em minha vida como um todo. Obrigada pelo incentivo, pela confiança depositada e pela oportunidade dada de lutar pelo meu crescimento profissional, acadêmico, intelectual e pessoal. Obrigada por contribuir de maneira tão especial e graciosa para que o Doutorado fosse feito com muito prazer e felicidade. Obrigada por fazer parte da minha história e da minha vida! Além de uma grande Orientadora, Professora e Pesquisadora lhe considero uma grande Amiga! Ao Prof. Dr. Shiwei Cai, pelo exemplo de humildade, respeito e grandeza de interior e de profissionalismo. Obrigada por abrir as portas de seu laboratório, por confiar no nosso trabalho em conjunto e por todo apoio e auxílio intelectual para o desenvolvimento deste. As Professoras Juliana Barros e Shalizeh Patel, que me acompanharam, apoiaram e me deram todo o suporte durante o Doutorado Sanduíche, tornando-o muito mais rico, produtivo e divertido!!!. Obrigada pela grande amizade formada. A querida Wei Chen, por estar lado a lado colaborando e realizando este projeto que tornou-se realidade. A minha autêntica amiga Stella Moreira, pelos conselhos e pelas risadas, por me acompanhar e apoiar em todos os momentos de alegria e dificuldades e também por me dar broncas, quase me deixar louca e me fazer acordar às 4 da manhã!!! Você realmente é uma pessoa única nesse mundo!!! A minha amiga e irmã de coração, Daiane Meneguzzo, por ser um exemplo a ser seguido, por todos os ensinamentos não só do laser, mas também de vida, por estar sempre ao meu lado me apoiando e desejando meu crescimento. A minha amiga e mais nova colega Talita pelo companheirismo e força e exemplo de dedicação e determinação. Ao meu amigo, Washington, pela colaboração no trabalho e por todos os ensinamentos de estatística. Aos meus queridos amigos da Pós-Graduação, obrigada pelo companheirismo, colaboração e apoio.