Caracterización de cepas de Leishmania, por medio de la técnica de PCR-RFLP de la región del Spliced Leader Miniexon (SLME), aisladas de humanos y caninos en Paraguay (original) (raw)
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2009
La Leishmaniasis es una enfermedad endemica en la provincia de Salta, Argentina, con cientos de casos anuales. La identificacion de la especie de Leishmania es necesaria debido a diferencias de presentacion clinica y de respuesta al tratamiento entre especies. La tecnica PS-PCR ha sido validada con el metodo de isoenzimas para la identificacion de especies de Leishmania en Argentina. OBJETIVOS: optimizar la tecnica PS-PCR para identificar la especie de parasitos aislados por cultivo y en muestras clinicas de pacientes de Salta y correlacionarla con sus caracteristicas clinicas y su respuesta al tratamiento. RESULTADOS: La PS-PCR permitio identificar la especie de Leishmania en las 24 muestras analizadas: 9 aislados de cultivo y 15 muestras clinicas de raspado de lesiones (100% de especificidad). Las especies halladas fueron:L(V) braziliensis (19/24; p Leishmaniasis is endemic in the province of Salta, Argentina, with hundreds of cases annually. Identifying the species of Leishmania ...
Rev biomed, 2011
Differential agglutination of promastigotes of Leishmania infantum Venezuelan strain with lysates from midgut of Lutzomyia evansi and Lutzomyia longipalpis (Diptera:Psychodidae) Introduction. The parasite Leishmania sp. must adapt the physiological conditions of the digestive tract of the insect that transmits, to ensure their survival and subsequent transmission to the vertebrate host. Leishmania-vector interaction depends on several factors, including the agglutinins Este artículo está disponible en http://www.revbiomed.uady.mx/pdf/rb112233.pdf
PCR-RFLP y RAPD para la tipificación de Leishmania neotropical
Biomédica, 2008
Introducción. El análisis de la longitud de los fragmentos de restricción del producto amplificado y el estudio del ADN polimórfico amplificado al azar han demostrado ser herramientas útiles para la tipificación de Leishmania. Objetivos. Estudiar la utilidad de las técnicas moleculares para la identificación y tipificación de cepas de referencia de Leishmania spp. del Nuevo Mundo y valorar su aplicabilidad a muestras clínicas. Materiales y métodos. Se aplicó PCR para amplificar el gen que codifica la cisteíno-proteinasa B, y el análisis de la longitud de los fragmentos de restricción del producto amplificado utilizando ácido desoxirribonucleico de 16 cepas de referencia de Latinoamérica y de muestras clínicas de pacientes colombianos con leishmaniasis, y la técnica del ácido desoxirribonucleico polimórfico amplificado al azar utilizando ocho cepas de referencia. Se establecieron los patrones de bandas en cada caso. Resultados. Se obtuvo producto de amplificación en la PCR para Leishmania braziliensis, L. peruviana, L. panamensis y L. guyanensis. Para el resto, no fue posible amplificar el gen con los cebadores utilizados. La restricción mostró un patrón de bandas común para L. peruviana, L. guyanensis y L. panamensis, mientras L. braziliensis, presentaba un perfil individual único. El análisis de restricción del producto amplificado generó un patrón de bandas similar en los cinco pacientes estudiados, que se correspondía con el patrón generado por L. peruviana, L. guyanensis o L. panamensis. Mediante la amplificación al azar se obtuvieron patrones de bandas reproducibles con todas las cepas estudiadas, que posibilitaron la diferenciación. Se discuten las ventajas y limitaciones de ambos procederes. Conclusiones. El combinar ambas metodologías resultaría útil para identificar especies de importancia médica, tomando en cuenta sus ventajas y desventajas. Palabras clave: Leishmania, leishmaniasis/diagnóstico, reacción en cadena de la polimerasa, polimorfismo de longitud del fragmento de restricción. PCR-RFLP and RAPD for typing neotropical Leishmania Introduction. The analysis of the PCR-restriction fragment length polymorphism and random amplified polymorphic DNA have been useful tools for Leishmania identification. Objectives. Molecular procedures were demonstrated for identification and typing of reference strains of New World Leishmania and their applicability was validated for clinical samples. Materials and methods. DNA was extracted from 16 reference strains of Latin American Leishmania as well as from clinical samples of leishmaniasis patients. A sequence coding for cysteine proteinase B was amplified by PCR and subjected to restriction fragment length polymorphism analysis. The enzyme used was Taq1. For eight of the reference strains, the random amplified polymorphic desoxyribonucleic acid technique (RAPD) was applied. Band patterns for Leishmania species differentiation were established each each method. The sample size of the clinical sample was of 5.
Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública, 2011
Objetivos. Identificar las especies de Leishmania presentes en las lesiones cutáneas del paciente y en las Lutzomyias que cohabitan en las áreas endémicas de la región La Libertad en el Perú. Materiales y métodos. Se usaron métodos moleculares basados en PCR y RFLP lo cual permitió obtener datos eficientes con poca muestra (pequeños especímenes), debido a su alta sensibilidad y las facilidades de aplicación en el trabajo de campo. Resultados. Los resultados del PCR de pacientes y de vectores, mostraron la presencia de Leishmania (V.) peruviana como principal agente causal de la Leishmaniosis tipo andina, transmitidas por Lutzomyia peruensis. Así mismo, se reveló la presencia de Leishmania (V.) guyanensis en Lutzomyia ayacuchensis. Conclusiones. Se mostró la presencia de L. (V.) peruviana y L. (V.) guyanensis en las áreas andinas en estudio. Hallazgos que exigen realizar una investigación más amplia sobre la distribución geográfica de L. (V.) guyanensis y las características clínicas relacionadas con la infección en áreas endémicas de Leishmaniosis cutánea.
Revista de Salud Pública
Objetivo Describir las características clínico-epidemiológicas asociadas a la transmisión de leishmaniosis visceral canina en un área endémica del departamento de Caaguazú, Paraguay. Materiales y Métodos El estudio fue descriptivo observacional, de corte transversal. Se evaluaron 324 caninos seleccionados de 110 viviendas. Se realizó el examen clínico; se obtuvo aspirado de ganglio para el examen directo y muestra de sangre para la posterior detección de anticuerpos anti-Leishmania revelados en tiras inmunocromatográfias. Resultados El 4,9% de la población canina dio positivo con antígeno recombinante rK39. Por la técnica de tinción con Giemsa, se obtuvo 4,3% de canes positivos, de los cuales 37,5% presentaron signos clínicos evidentes. Los signos más frecuentes encontrados en los perros infectados fueron adelgazamiento, onicogrifosis y alopecia (25%). La seroprevalencia fue mayor en perros entre 2 y 4 años de raza mestiza. Conclusiones Los signos clínicos presentes confirmaron la...
Leishmaniosis felina (L. infantum) en Paraguay. Diagnóstico, tratamiento y evolución
Revista Veterinaria, 2021
Leishmaniosis es un conjunto de enfermedades zoonóticas causadas por protozoos del género Leishmania sp. Desde tiempo atrás se vienen registrando numerosas infecciones en caninos y en los últimos años ocurrieron casos aislados en felinos. Algunos gatos que cohabitaron en áreas endémicas de leishmaniosis canina contrajeron la enfermedad. Es probable que el sistema inmunitario del felino sea capaz de controlar la contaminación del parásito, ya sea eliminándolo o bien manteniéndolo en un estado crónico subclínico. Se reporta un caso de leishmaniosis en un felino adulto joven, residente en Asunción (Paraguay), cuya sintomatología clínica era inespecífica. Los estudios de laboratorio permitieron identificar la presencia de amastigotes de Leishmania infantum. El paciente fue sometido a tratamiento con respuesta favorable y remisión total de signos clínicos. La identificación del protozooario es determinante para el diagnóstico de esta enfermedad. Si bien la leishmaniosis es menos frecuent...
2011
Introduccion. El parasito Leishmania sp. debe adecuarse a las condiciones fisiologicas del tracto digestivo del insecto transmisor, como estrategia para su sobrevivencia y asi garantizar posterior transmision al hospedador vertebrado. La interaccion Leishmania-vector depende de diversos factores, entre ellos, las aglutininas del tracto digestivo de los flebotomos, involucradas, junto con las moleculas de lipofosfoglicano de la superficie del parasito, en la adhesion de este ultimo al epitelio intestinal del insecto, en donde ambas moleculas estan implicadas en la susceptibilidad de las especies de flebotomos a la infeccion. Objetivo. Medir y comparar el titulo de aglutinacion entre lisados de intestino medio de L. longipalpis y L. evansi, silvestres y de colonia, con promastigotes de L. infantum. Materiales y Metodos. La metodologia empleada consistio en la evaluacion de tres grupos de lisados de intestino medio de hembras de Lutzomyia, uno de hembras capturadas en el habitat silves...
Utilidad de PCR anidada en el diagnóstico de leishmaniosis canina en Corrientes
Revista veterinaria, 2024
Resumen La leishmaniosis es una enfermedad causada por parásitos protozoarios del género Leishmania y transmitida a mamíferos mediante la picadura de insectos dípteros hematófagos del género Lutzomyia en el nuevo mundo. Los caninos son susceptibles de adquirir la forma visceral y la forma cutánea de la enfermedad. Los métodos de diagnóstico incluyen observación directa del parásito por microscopía óptica, serología o técnicas de biología molecular en muestras de perros con signos clínicos evidentes y/o sospecha clínica. En este estudio se evaluó la utilidad de una reacción en cadena de la polimerasa anidada (PCRn) para el diagnóstico de dicha patología en perros. Se analizaron 18 muestras de sangre entera anticoagulada con EDTA de perros de la ciudad de Corrientes con sospecha clínica de padecer leishmaniosis. A partir de las mismas, se extrajo ácido desoxiribonucleico (ADN) y se realizaron dos rondas de amplificación sucesivas de una secuencia que codifica para la subunidad pequeña de ARN ribosomal. Los resultados obtenidos de las PCR anidadas fueron comparados con los resultados obtenidos a partir del método parasitológico directo considerado como gold standard. La técnica aplicada mostró sensibilidad del 100%, especificidad del 75%, valor predictivo positivo del 67% y valor predictivo negativo del 100% lo que la convierte en una herramienta útil para el diagnóstico de leishmaniosis canina.