Фрагмент Кленова | это... Что такое Фрагмент Кленова? (original) (raw)

Фрагмент Кленова (англ. Klenow fragment) — это большой белковый фрагмент, образующийся при ферментативном расщеплении ДНК-полимеразы I из E. coli протеазой субтилизином (subtilisin). Впервые фрагмент Кленова был описан в 1970 году, и имел 5’ → 3’ полимеразную активность в сочетании с 3’ → 5’ экзонуклеазной активностью (корректорной), но не имел 5' → 3' экзонуклеазной активности.[1]

Другие меньшие фрагменты, образующиеся при ферментативном расщеплении могли иметь 5'→ 3' экзонуклеазную активность, но не имели двух активностей, характерных для фрагмента Кленова.

Фрагмент Кленова был использован в качестве ДНК-полимеразы в первых методиках полимеразной цепной реакции,[2] и лишь через некоторое время был заменен термостабильной Taq-полимеразой.[3]

Примечания

  1. ↑ Klenow H and Henningsen I (1970). «Selective Elimination of the Exonuclease Activity of the Deoxyribonucleic Acid Polymerase from Escherichia coli B by Limited Proteolysis». Proc Natl Acad Sci 65: 168–175. DOI:10.1073/pnas.65.1.168. PMID 4905667.
  2. ↑ Saiki RK et al. (1985). «Enzymatic Amplification of β-globin Genomic Sequences and Restriction Site Analysis for Diagnosis of Sickle Cell Anemia». Science 230: 1350-54. DOI:10.1126/science.2999980. PMID 2999980.
  3. ↑ Saiki et al. (1988). «Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase». Science 239: 487-91. DOI:10.1126/science.2448875. PMID 2448875.
Просмотр этого шаблона Репликация ДНК
Точка начала репликации, Ori, Репликон - DNA clamp - Фрагменты Оказаки - Репликационная вилка (Отстающая и лидирующая цепи) - Белки, связывающие одноцепочечную ДНК - Праймер - Процессивность - Фрагмент Кленова
Пререпликационный комплекс: Хеликазы (dnaA, dnaB, T7) - Праймаза (dnaG) - Холофермент ДНК-полимеразы III (dnaQ)
ДНК лигаза - Теломераза - Топоизомераза