Meganuclease (original) (raw)

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Meganucleases are endodeoxyribonucleases characterized by a large recognition site (double-stranded DNA sequences of 12 to 40 base pairs); as a result this site generally occurs only once in any given genome. For example, the 18-base pair sequence recognized by the I-SceI meganuclease would on average require a genome twenty times the size of the human genome to be found once by chance (although sequences with a single mismatch occur about three times per human-sized genome). Meganucleases are therefore considered to be the most specific naturally occurring restriction enzymes.

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dbo:abstract Meganucleases are endodeoxyribonucleases characterized by a large recognition site (double-stranded DNA sequences of 12 to 40 base pairs); as a result this site generally occurs only once in any given genome. For example, the 18-base pair sequence recognized by the I-SceI meganuclease would on average require a genome twenty times the size of the human genome to be found once by chance (although sequences with a single mismatch occur about three times per human-sized genome). Meganucleases are therefore considered to be the most specific naturally occurring restriction enzymes. Among meganucleases, the LAGLIDADG family of homing endonucleases has become a valuable tool for the study of genomes and genome engineering over the past fifteen years. Meganucleases are "molecular DNA scissors" that can be used to replace, eliminate or modify sequences in a highly targeted way. By modifying their recognition sequence through protein engineering, the targeted sequence can be changed. Meganucleases are used to modify all genome types, whether bacterial, plant or animal. They open up wide avenues for innovation, particularly in the field of human health, for example the elimination of viral genetic material or the "repair" of damaged genes using gene therapy. (en) Les méganucléases sont des endodésoxyribonucléases (nucléases d'ADN) qui se caractérisent par un site de reconnaissance de grande taille (des séquences d’ADN double-brin de 12 à 40 paires de bases), ce qui fait qu’il est généralement présent en un seul exemplaire dans un génome donné. Pour prendre un ordre de grandeur, il faut 20 fois la taille du génome humain pour espérer rencontrer 1 fois la séquence de 18 paires de bases reconnue par la méganucléase I-SceI. Les méganucléases sont donc considérées comme les enzymes de restriction les plus spécifiques. Parmi les méganucléases, les endonucléases de homing de la famille LAGLIDADG sont devenues depuis une quinzaine d’années des outils privilégiés pour l'étude et pour l’ingénierie des génomes, qui recouvre les stratégies et les techniques récemment développées pour modifier de façon ciblée et spécifique l’information génétique - ou génome - des organismes vivants. Les méganucléases sont des « ciseaux moléculaires à ADN » que l’on peut utiliser pour remplacer, supprimer ou modifier des séquences de façon extrêmement ciblée. En modifiant leur site de reconnaissance par ingénierie de protéines, on peut modifier la séquence ciblée. Les méganucléases sont employées pour modifier toutes sortes de génomes – bactériens, végétaux, animaux – et ouvrent de larges possibilités d’innovation, notamment en santé humaine (élimination de matériel génétique viral ou « réparation » de gènes altérés) et en agriculture biotechnologique. On rencontre les méganucléases chez un grand nombre d’organismes : archaea (archées), bactéries, phages, champignons, levures, algues, certaines plantes. Elles peuvent être exprimées dans différents compartiments de la cellule : noyau, mitochondries, chloroplastes. Plusieurs centaines de ces enzymes ont été identifiées. (fr)
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