Subculture (biology) (original) (raw)
In biology, a subculture is either a new cell culture or a microbiological culture made by transferring some or all cells from a previous culture to fresh growth medium. This action is called subculturing or passaging the cells. Subculturing is used to prolong the lifespan and/or increase the number of cells or microorganisms in the culture.
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| dbo:abstract | En culture cellulaire, le passage est le procédé de sous-culture de cellules animales. Il est en général fait pour produire un grand nombre de cellules à partir de cellules préexistantes. En laboratoire, des cellules adhérentes de mammifère sont cultivées dans des flasques ou des boites de Petri de diamètres variés, avec du SVF et du milieu et incubées à 37 °C dans une atmosphère de 5 % en dioxyde de carbone et en présence d'eau pour avoir une humidité constante. Les cellules en culture vont alors croître jusqu'à tapisser entièrement le fond de la flasque ou de la boîte de Petri. En temps normal, par exemple pour une culture de cellules de type HeLa recouvrant 10 % de la surface de culture, il faudra entre deux et trois jours pour atteindre 100 % de confluence. Si rien n'est envisagé à ce stade, la nourriture commence à se raréfier et les cellules commencent à mourir ; de plus les cellules qui sont amenées à se développer sans s'adhérer mourront plus vite et ne pourront pas être repiquées. Un passage est donc nécessaire, c'est-à-dire que l'on va repiquer les cellules dans une nouvelle flasque avec du milieu de culture neuf. La manipulation se déroule ainsi. Le milieu appauvri est enlevé, généralement à l'aide d'une pipette reliée à une pompe à vide. Les cellules sont lavées avec un tampon phosphate salin appelé PBS (phosphate buffered salin), ensuite une solution de trypsine est ajoutée afin de décoller les cellules du fond de la flasque (laisser agir deux minutes à 37 °C dans l'incubateur). Ensuite on ajoute du milieu additionné de SVF (contenant des inhibiteurs de la trypsine) et l'on opère des aspirations refoulements avec une pipette pour au maximum individualiser les cellules. On poursuit en prélevant un dixième du volume de suspension cellulaire contenue dans la flasque, et on les dépose dans une nouvelle flasque stérile contenant du milieu DMEM neuf. On termine en plaçant la flasque dans l'incubateur. Et le cycle recommence jusqu'au prochain passage. Le restant de cellules est éliminé dans une solution javellisée pour tuer ces dernières. Pour de meilleurs résultats, le passage devra s'effectuer avant d'arriver à 100 % de confluence. * Portail de la biologie cellulaire et moléculaire (fr) In biology, a subculture is either a new cell culture or a microbiological culture made by transferring some or all cells from a previous culture to fresh growth medium. This action is called subculturing or passaging the cells. Subculturing is used to prolong the lifespan and/or increase the number of cells or microorganisms in the culture. (en) 계대배양(繼代培養)은 세포증식 방법의 하나로, 5∼7일마다 주기적으로 새로운 배지에 이식시킨다. 이렇게 해서 균주를 보존하고 세포의 대를 이어가는 식으로 배양한다. (ko) Pasażowanie komórek – technika stosowana w hodowli komórek somatycznych. Ponieważ komórki dzielą się mitotycznie, dłuższy okres hodowli powoduje całkowite zapełnienie naczynia hodowlanego, zubożenie podłoża i – najczęściej – śmierć komórek. Pasażowanie polega na przeniesieniu komórek ze starego naczynia do nowych naczyń, zawierających świeżą pożywkę. Stosunek pasażowania mówi, w ilu nowych naczyniach umieszcza się komórki z jednego starego naczynia o tej samej powierzchni lub objętości (na przykład pasażowanie w stosunku 1:5). Pasażowanie linii komórkowych umożliwia hodowanie nowych pokoleń identycznych komórek praktycznie w nieskończoność. (pl) |
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