Фосфолипазы — Метка (original) (raw)
Патенты с меткой «фосфолипазы»
Способ получения фосфолипазы д
Номер патента: 353725
Опубликовано: 01.01.1972
МПК: A61K 38/46
Метки: фосфолипазы
...ловым эф О лью пов ферменга буфер, це ют сульф кой напрИзобретение относится к области медицины,Известны способы получения фосфолипазыД путем экстрякции сем 5 п хлОГ)атника ацст -ном и диэтнловым эфиром и адсорбцисй нагслс фосфата кальция, Однако ирсиари, иолучешЫй известим способом, обладает низкой каталитичсской активностью, равной0,210 - а едЦель изобретения - повышение каталип 1- ческой активности фермента,Это достигяетс 51 тем, что к экстракту,Гобяв.ляют ацетатный буфер, центрифугируют, раствор Обрйбй)ьвйОт сул.11)атом я 1:ОИИ 51 с послед) Опей Очисткой, нйпримср, диялизо.П р и м с р 1. Измсльчснныс семена хлопчатника обезжиривают экстракцисй ацетоном идиэтиловым эфиром известным способом. Лцетоновый порошок суспендируют в 0,1 м...
Способ получения фосфолипазы д
Номер патента: 560614
Опубликовано: 05.06.1977
Авторы: Абдумаликов, Мадьяров, Рахимов
МПК: A61K 35/78
Метки: фосфолипазы
...трис-буфером концентрацией 0,01-0,1 М, рН 7-9 и а ют фосфолипазу после растворения бцию проводят из разбавленного р 25 П р и м е р, Навеску семян хлопчатника резмельчеют и экстрагнруют десятикрегным объемом 0,1 М трис - буфера, рНЯ,й,гемогеннзнруюг н отделяют растворимые белки от осадке центрнфугировениемК недостаточной жидкости добавляют дваообъема охлажденного ацетона ( - 10 С) иперемешивают. Образовавшнйся осадок отделяют декан тацией, промывают ацетономи растворяют в воде. 1 оводят рН до 6 расвором 1 н. СН СООН и нагревают 15 мннпри 50 С. Выпавший осадок удаляют центрифугированнем (15 мнн прн 18000),Разбавляют раствор 0,1 М ацететнымбуфером, рН 5,6 до концентрации 0,1 мг/мпо содержанию белка н к раствору добавляют снликагель...
Способ получения фосфолипазы
Номер патента: 644827
Опубликовано: 30.01.1979
Авторы: Гаруцкас, Глемжа, Калунянц, Кулене
МПК: C12D 13/10
Метки: фосфолипазы
...сме 4шивают с раствором остальных компонентов и доводят рН до 7,3 25%-ным водным раствором аммиака,Готовую среду разливают в колбы и стерилизуют 20 мин при 1,2 атм и 123 С. 11 осле охлаждения до комнатной температуры осуществляют посев выше указанным инокулятом (соблюдается стерильность). Культивируют как в стационарных условиях так и при перемешивании на круговой качалке при 180 об/мин и 37 С. максимальное накопление фосфолипазы во всех случаях культивирования в колбах наблюдается от 15 до 35 часов. Продолжительное культивирование (до 48 - 50 часов) приводит к сильному уменьшению или полной потере накопленной фосфолипазной активности. Биосинтез фосфолипазы происходит как в стационарных, так и в условиях перемешивания, с...
Штамм -продуцент ингибитора фосфолипазы с
Номер патента: 712439
Опубликовано: 30.01.1980
Авторы: Андреева, Конев, Кузьмина, Мазунина, Мясникова, Поляк, Рожанская, Селезнева, Терешин, Фатеева, Яковлева
МПК: C12D 13/10
Метки: ингибитора, продуцент, фосфолипазы, штамм
...не образует.На клетчатке не растет. 10Нитраты восстанавливает до нитритов и далее.Гидролиэует,.крахмал, зоны гидролиза.крахмала до 8-10 мм;На среде Придхэма-Готтлиба хорошоразвивается в присутствии в качествеединственного источника углерода,арабиноэы, ксилозы, иноэита, маннита,фруктозы-, рамноэы,сахарозы, раффиноэы.Ачтагонистические свойства.Проявляет активность в отношенииграмположительных бактерий и некоторых видов антиномицетов.Штамм Ясгерсощусез яагасес 1 сцячаг. сегазцз чаг. пост. ЛИА 0845 25выделяет ингибитор фосфолипазы С вкультуральную жидкость, Для получения ингибитора актиномицет культивируют при 2811 С на качалке прио180 об/мин в колбах емкостью 750 мл, Щсодержащих 100 мл среды следующегосостава, г/л:...
Способ получения ингибитора фосфолипазы с
Номер патента: 734260
Опубликовано: 15.05.1980
Авторы: Васильева, Мазунина, Масленникова, Мясникова, Поляк, Рабинович, Рожанская, Рыбошлыков, Селезнева, Терешин, Яковлева
МПК: C12D 13/00
Метки: ингибитора, фосфолипазы
...характерным для белков,0 максимум поглощения 278-28Таким образом, выделенный ингибитор Фосфолипазц С является основным полипептидом с мол. массой 33500"4000.Активность йнгибитора фосфолипаз ы определяют по угнетанию специ Фического гидролиэа фосфатидилхоилхолина (лецитина) в лецитевителлине методом диффузии в агар и серийном разведеВ первом случае учитывают вели) во вто чину эоны приципктации (6 мм), ром титр. Обсчет эффекта ведут по сравнению результатов в контроле к опыте по формуле 100, где А- вффект в контроле, В - эффект в опыте. Показано, что выделенные образцыобладают ингибиторной активностьюв отношении фосфолипазц С С 1 регйг 1 пцепв типа А.ЗД составляла (по белку) 0,55 мг/мл, л Д " 1,1-1,15 мг/мл,Связывание в выбранной...
Способ получения ингибитора фосфолипазы с
Номер патента: 908798
Опубликовано: 28.02.1982
Авторы: Аверьянова, Андреева, Жерлицына, Мазунина, Мясникова, Поляк, Рожанская, Селезнева, Терешин, Фатеева, Яковлева
МПК: C12P 1/06
Метки: ингибитора, фосфолипазы
...г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 90879нисм диалиэа и ультра-и диафильтраций черезацстилцслпюлоэную мембрану УАМ - 100 Мс диаметром пор 100 - 120 Х прн давлении2,5 а 1 м, десятикратном концентрированиипри использовании фосфатного буфера(0,00 М рН 5,4) и диализованный супернатант илн концентрат лиофильно высушиваютизвестными способами,Полученные препараты ингибитора не ток.сичны. Внутрибрюшинное введение препаратав дозах 50 - 100 мг/мышь (6,5 - 11 мг/мышьпо белку) гибели белых мышей весом 18 -20 г не вызывало.П р и м е р 1. 500 мл нативного растворапропускают через колонку, загруженную 15,0 ганионита ФАФ в хлоридной форме с коэффициентом набухания 3,8. Депигментированныйнативный раствор подщелачивают до рН - 9,5,добавляют 6 мл 5%...
Способ получения фосфолипазы д
Номер патента: 986923
Опубликовано: 07.01.1983
Авторы: Глемжа, Горин, Кулене, Некрашайте, Стрейкувене
МПК: C12N 9/20
Метки: фосфолипазы
...в качестве продуцента 2 разом посевной материал служит в качештамм Мгер 1 очегМС 1 богп с 1 ппатопеоъ стве инокулята для культивирования про 1102 С (5 зо.ь 1 гер 1 оппсеь сопаоотооэ ) дуцента фосфолипазы Д,ранее использовался в качестве проду- Культивирование 5 герочегОс 1 бомцента антибиотиков, Штамм депонирован с 1 опавоееощ штамм 1102 С в колбах.в коллекции ВНИИ антибиотиков, г. Мос Для получения фосфолипазы Д продуква, коллекционный номер 1652. цент культивируют в колбах на средеП р и м е р, Лабораторный способ следующего состава, г/л: соевая мукаполучения фосфолипазы Д иэ 51 герМочегО; фруктоза 1; КН 2 Р 042; йН,С 03. рНс 1 И ощ вида с 1 поаеоаеотп штамма . раствора соевой муки ийНЯ доводят до1102 С. 7,2 1 н, раствором КОН,...
Способ получения фосфолипазы
Номер патента: 1105502
Опубликовано: 30.07.1984
МПК: C12N 9/16
Метки: фосфолипазы
...3 При более низкой температуре не все балластные белки выпадают в оса. док, а повышение температуры приводит к инактивацни фермента. Это же относится и к интервалу времени.П р и м е р. Для получения Фосфолипазы А предлагаемым способом берут кишечник от трех животных (100 г), гомогенизируют в трех. объемах 0,05 М трюс -НС 1 буфера и центрифугируют при 16000 в течение 30 мин, осадок отбрасывают, супернатант прогревают при 50 С 5 мин оставляют в холодильнике на несколько часов и центрифугируют при 16000 30 мин. Осадок отбрасывают, супернатант при энергичном помешивании доводят 4 Н НС 2 до рН 5,0 оставляют на 2 ч в холодильнике и центрифугируют. рН супернанта доводят кристаллическим оксиметил-аминометаном (Трис ) до рН 7,5. К...
Способ получения фосфолипазы
Номер патента: 1125246
Опубликовано: 23.11.1984
Авторы: Глемжа, Кулене, Некрашайте, Стрейкувене
МПК: C12N 9/16
Метки: фосфолипазы
...содержащем 1,4-1,6 М ЕаС 1,при рН 7,9-8,1.П р и м е р 1. Способ очисткифосфолипазы 3 из культуральнойжидкости Яггерговусея сьппавовеияв оптимальных условиях.Получение бесклеточной культуральной жидкости, содержащей фосфолипазу 3 . Продуцент фосфолипазыП.Яггерговусея сдппавовеия шт.11 02 Скультивируют на жидкой питательнойсреде следующего состава, г/л: соевая мука 30; фруктоза 1; КНауР 042;ИНЕС 3, при рН 7,2 в течение 48 чпри 30 С и скорости вращения качалкио"12,5 с . Клетки микроорганизмовотделяют центрифугированием при12000 Х у и температуре 2 С в течение 30 мин. 2530 Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому положительному эффекту является способ получения фосфолипазы П из бесклеточной культуральной...
Способ определения активности фосфолипазы а
Номер патента: 1364634
Опубликовано: 07.01.1988
Авторы: Андреюк, Киселев, Кисель, Литвинко
МПК: C12N 9/16
Метки: активности, фосфолипазы
...2:1, интенсивно встряхивают 5- 10 мнн, центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин, нижний хлороформный слой .отбирают, упаривают и.продукты реакции - ЛФХ, ФХ и жирные кислоты - разделяют с помощью тонкостойной хроматографии на силикагелевых пластинах в системе растворителей хлороформ: метанол НО (65;25:4 П 7). Пятна, соответствующие лизодимиристоилфосфатидилхолину (ЛФХ) и димиристоилфосфатидилхолину (ФХ), проявляют в парах Т, отмечают их границы, дают испариться. Пятна выскребают. Затем проводят количественное определение неорганического фосфата по методу Васьковского. К пробам добавляют 0,2 мп концентрированной НС 10 и нагревают 10 мин на песчаной бане, к остывшим пробам приливают по 4,8 мп реагента Васьковского, помещают в кипящую...
Способ определения активности фосфолипазы а
Номер патента: 1416918
Опубликовано: 15.08.1988
Авторы: Антоненко, Барский, Назаренко, Самуилов, Хакимов, Ягужинский
МПК: G01N 33/48
Метки: активности, фосфолипазы
...кюветы до разрыва мембраны) при воздействии на нее фосфолипазы А, оно составляет=24,8 мин (Кнзч - электрическое сопротивление БЛМ - составляет 2,5 х Х 10 Ом). Получают концентрацию (ак. тивность) фосфолипазы А, равную 1,8 Х 10 г/мл (см. чертеж, кривая А).Пример 2, Берут кювету с двумя отделениями и дальше все операции проде. лывают, как в примере 1. Диаметр отверстия 1,0 мм. Состав инкубационного раст. вора, мас.Я: трис-НС 1 0,121 КС 1 0,745; СаС 1 0,001; дистиллированная вода - остальное рН 8,0. Фосфатидилхолиновую БЛМ формируют нз 2 г-ного раствора яичного фосфатидилхолина в декане, нанося на отверстие раствор фосфатилилхолина в количестве 0,003 мл на пробу. Добавляют фосфолипазу А в отделения кюветы и определяют время жизни...
Способ определения активности фосфолипазы а.
Номер патента: 1474550
Опубликовано: 23.04.1989
Авторы: Маркин, Мирский, Симонова, Соколов, Черный
МПК: G01N 33/68
Метки: активности, фосфолипазы
...нной мембране при Ферментагидролизе методом автоматичпенсации внутримембранногоческого поля, которую региспо отсутствию второй гармокостного тока. 3 ил,для препарата иэвестнои можно определять активость неизвестного пр Величина фосфолипа зменения поверха (В/с) на началь -1); А=2,4 10 ; оновсго электроли 1474550та ; Ы - активность фосфолипазы (количество моль жирных кислот, образующихся за 1 с на 1 м мембраны).П р и м е р 2. Определение фос 5 фолипазной активности панкреатического сока.Измерения проводят так же, как и при построении калибровочной кривой (пример 1), но мембрану формируют из азолектина, а вместо фосфолипазы добавляют 10 мкл панкреатического сока человека, полученного при зондировании протока поджелодучной железы....
Способ выделения фосфолипазы а2 из яда кобры
Номер патента: 1188948
Опубликовано: 30.11.1990
Авторы: Аавиксаар, Сийгур, Тара
МПК: A61K 38/46
Метки: выделения, кобры, фосфолипазы, яда
...комбинат "Патент", г.Ужгород, ул, Гагарина,101 кислого аммония 0,45 М с удельнойФщ.1электропроводносты 32-10 Б смрН 7,4. Фракции, имеющие фосфолипаэ-.ную активность, объединяют (выход92 мл) и лиофилизируют дважды.Характеристика препарата: выход65,1 ., Степень очистки 25 раз.П р и м е р 2, К 1,0 г яда кобрыдобавляют 8,0 мл раствора 0,050 Муксусно-кислого аммония с удельной-Ээлектропроводностью 4,510 Я смрН 7,5, смесь медленно перемешиваютв течение 4 ч при 4 С, Растворенныйояд центрифугируют при 5000 об/минпри 40 С в течение 30 мин. Осадоквыбрасывают, надосадочную жидкостьиспользуют для хроматографии. Науравновешенную с 0;050 М растворомуксусно-кислого аммония (удельнаяэлектропроводность 4,510 Я смрН 7,5) колонку...
Способ определения активности фосфолипазы с
Номер патента: 1682897
Опубликовано: 07.10.1991
Авторы: Дворянцев, Еремин, Логинов, Решетняк, Розенблат, Рууге
МПК: G01N 24/08
Метки: активности, фосфолипазы
...2- диааио- гоииеоин о(сн,1, и О=Р-О-СН-Н1о- Фосфонооин и оиН-С-О-С-РОн-с-о-с-рН-С-О-Р-О-(Сно 1 о-Н-(СН,1 дН О ОЛсаанан Фооаооипа за С фатидилхолина в минуту при рН 7,3 и 37 С.П р и м е р. Озвученную суспензию лецитина готовят следующим образом, 100 мг лецитина (Харьковского предприятия по производству бактерийных препаратов) из раствора в спирте переносят в специальную ампулу для озвучивания. Спирт удаляют под вакуумом, а к лецитиновой пленке добавляют 2 мл 50 мМ Трис-НС буфера, рН 7,4. Озвучивание проводят на дезинтеграторе УЗДН - 1 (Харьковского завода) в течение 3 мин с паузами для охлаждения в режиме максимального резонанса при 0,3 мА, Далее образец центрируют при 2500 об/мин в течение 3 мин, Супернатант используют для работы. 2 мл...
Способ получения фосфолипазы д
Номер патента: 1822878
Опубликовано: 23.06.1993
Авторы: Зиятдинова, Игамназаров, Рахимов
МПК: A61K 35/78, C12N 9/20
Метки: фосфолипазы
...об/мин в течение 20 мин. Растворимые белки отделяют от осадка центрифугированием при 5000 об/мин 20 мин. К надосадочной жидкости добавляют 2 объема охлажденного ацетона (-10 С) и перемешивают. Осадок отделяют декантацией, промывают безводным ацетоном и сушат на воздухе для удаления ацетона. Осаждение ацетоном проводят дважды. Смена буфера на боратнощелочной приводит к увеличению выхода белка до 596 мг и увеличению активности ферментного препарата до 1073 ед.П р и м е р 2. Процесс проводят по примеру 1, но экстракцию проводят боратно-щелочным буфером рН 8,2, содержащим 5 мМ кальция, Введение 5 мМ кальция повышает выход по белку до 660 мг, активность ферментного препарата до 1584 ед, 1822878П р и м е р 3. Процесс проводят по примеру 1, но...
Способ получения иммобилизованной фосфолипазы a2
Номер патента: 1349252
Опубликовано: 10.11.2005
Авторы: Евтушенко, Костецкий, Солодова, Шапкин
МПК: C12N 11/14
Метки: иммобилизованной, фосфолипазы
Способ получения иммобилизованной фосфолипазы А2 , заключающийся в адсорбции фосфолипазы на органокремнеземном носителе, отличающийся тем, что, с целью увеличения удельной активности целевого продукта, в качестве источника фосфолипазы А2 используют яд щитомордника восточного, а адсорбцию фосфолипазы проводят в трис-HCl буфере с рН 7,4-7,5 в течение 22-24 ч на носителе, представляющем собой силикагель с бис(этилендиамино)этилсилильными или с бис(диацетоэтилендиамино)этилсилильными группами в концентрации 0,95-1,1 или 0,08-0,09 мг·экв/г носителя соответственно.
Способ получения фосфолипазы a2 из морской звезды
Номер патента: 1302490
Опубликовано: 10.11.2005
Авторы: Костецкий, Олифиренко, Шапкин
МПК: A61K 35/00
Метки: звезды, морской, фосфолипазы
Способ получения фосфолипазы А2 из морской звезды, включающий приготовление гомогената из пилорических придатков морской звезды с последующим центрифугированием, хроматографией и десорбцией целевого продукта и гель-фильтрацией на сефадексе Г-200, отличающийся тем, что, с целью повышения активности фермента за счет отделения природного ингибитора, гомогенизацию ткани проводят 0,01 М и трис-HCl буфером с рН 9,0-9,1, а для хроматографии используют фенилсодержащий силикагель и десорбцию целевого продукта проводят смесью, содержащей буфер 0,01 М трис-HCl с рН 9,0-9,1, метанол, эфир в объемном соотношении 3:2:1, соответственно.