Действующие на сложноэфирные связи (3.1) — C12N 9/16 — МПК (original) (raw)
Способ получения фосфодиэстеразы
Номер патента: 164290
Опубликовано: 01.01.1964
Авторы: Будовский, Зобрете, Никольска
МПК: C12N 9/16
Метки: фосфодиэстеразы
...среднеазиатской змеи эфы фракционированием ацетоном. Выход фосфодиэстеразы при этом не превышает 80/О.Сущность предлагаемого способа заключается в том, что водный раствор яда змеи, например порзы, обрабатывагот раствором хлористого цинка. Это позволяет повысить качество и выход целевого продукта.П р и м ер. 60,1 гг сухого яда порзы растворяют в 50 1 г,г воды и центрифугнругот в те гение 5,тгин при 5000 об 1 гин. Прозрачную чадосадочную жидкость нагревают в термосгате до 60" С, приливают равный объем 4,8 10 з ло,и раствора хлористого цинка, также нагретого до 60"С, перемешивают и выдерживают при этой температуре 10 .1 гин. Затем смесь охлаждают и выдерживают 48 час при 0 С. Выпавший осадок отделяют центрифугированием г,10 лин, 6000...
178337
Номер патента: 178337
Опубликовано: 01.01.1966
МПК: C12N 9/16
Метки: 178337
...эстеразу получаютинтенсивно прод)- Однако в нашей ивируется в значисырья для получетеразы и фосфомочьтуральную жидример Ас 11 погпусевкультивируются в В настоящее время исп тов как в промышленност ных целей приобретает ши Фермент фосфодиэстера всего из змеиного яда. Од яда среднеазиатских зме руб. Приготовляют этот ф лезенки крупно о рогатого не всегда доступно. Можно получать фермен материала, так фосфомоно из штамма Езс 1 тег 1 с 1 т 1 а со 11 цирующего этот фермент. стране этот штамм не куль тельных масштабах,Предложено в качестве ния ферментов фосфодиэс ноэстер азы применять ку кость актиномицетов, нап з 1 гер 1 огпус 1 п 1. Эти штаммьпромышленных масштабах, так как онн служат для производства антибиотиков.Содержание...
Штамм bacterium prodigiosum (serratia marcescens) в-ю л-1 — продуцент неспецифической эндонуклеазы
Номер патента: 431214
Опубликовано: 05.06.1974
Авторы: Генетики, Институт, Панфилова
МПК: C12N 1/20, C12N 15/01, C12N 9/16 ...
Метки: bacterium, marcescens, prodigiosum, serratia, в-ю, неспецифической, продуцент, штамм, эндонуклеазы
...серина и лизина. Из глюкозы, сахарозы, мальтозы, маннита образует кислоту, на лактозе кислота не образуется,Нитраты восстанавливает до нитритов.Оптимальный режим роста: температура 28 - 30 С, рН среды 6 - 8. При выращивании на пептонной среде штамм образует до 3600 ед внеклеточной эндонуклеазы на 1 мл культуральной жидкоП р и и е р. Штамм В. ргойроэцгп ВМвыращивают на скошенном мясо-пептонном агаре в течение 24 час, суспендируют в физиологическом растворе до плотности 1 1 Оа клеток/лгл и инокулируют в 20 мл пептонной среды в количестве 1 10 т клеток/мл среды, Инкуоируют в колбах Эрленмейера,на 100 мл в течение 65 - 70 час при 30 С. Через 16, 25, 26 - 29, 39 - 40, 47 и 64 час, отоирают по 0,5 мл культуральной жидкости и определяют...
Способ выделения термостабильной плацентарной щелочной фосфатазы
Номер патента: 1082811
Опубликовано: 30.03.1984
Авторы: Володин, Голубев, Кулагин, Морозкин
МПК: C12N 9/16
Метки: выделения, плацентарной, термостабильной, фосфатазы, щелочной
...и помещают ц .;:1 од (-4 С) цао60 миц, Экстрах) цецтрифугцруют при 6000 об/миц 30 м)1 ц, Надосадочную жидкость отбрасывак)т, а осадок растворяют в 3,57.-цом растворе 1111 С 1. Диализируют против дистиллированной воды 60 мин.На следующем этапе ц)ледени)1 экстракт насьпцают серцокислым аммонием (307.). Цецтрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 мин. Осадок отбрасывают, а надосадочцую жилкость насыщают 657-ным серцокислым аммонием, Проводят диализ. Цецтрифугируют 6000 об/мин 30 мин, цадосадочцую жидкость отбрасывают, а осадок растворяют в мини - мальном объеме трис-буфера (рН 8,6).После этих этапов пробы ставят в препаративцый электрофорез ца 2 ч в полиакриламидцом геле, Окрашивают на щелочцу)о Фосфатазу: субстрат нафтил ЛЯ - Ол -...
Способ получения кислой дезоксирибонуклеазы
Номер патента: 1100308
Опубликовано: 30.06.1984
Авторы: Кожемяко, Рассказов, Федосов
МПК: C12N 9/16
Метки: дезоксирибонуклеазы, кислой
...добавляют сухойсульфат аммония (85 насыщения ) приперемешивании и оставляют на 5-6 чдля полного осаждения белка. Осадокфильтруют через двойной бумажныйфильтр или центрифугируют при 8000 х 5в течение 1 ч , растворяют в минимальном объеме 0,05 М аммоний-ацетатного буфера, 0,002 М ЭДТА, рН 5,35, 4 и затем обессоливают на колонкес сефадексом Г, уравновешенной 10этим же буфером со скоростью 220240 мл/ч,Обессоленный сырой ферментныйпрепарат наносят на колонку (1,1 х6,3 см) с фосфоцеллюлозой, уравновещенной 0,05 М аммоний-ацетатным бу"фером, 0,002 М ЭДТА, рН 5, 3-5, 4.Колонку промывают этим же буферомдо исчезновения Уф-поглощения вэлюате при Анм. Десорбцию ферментного препарата, содержащего наряду с кислой ДНК-азой кислуюРНК-азу, осуществляют...
Способ получения фосфолипазы
Номер патента: 1105502
Опубликовано: 30.07.1984
МПК: C12N 9/16
Метки: фосфолипазы
...3 При более низкой температуре не все балластные белки выпадают в оса. док, а повышение температуры приводит к инактивацни фермента. Это же относится и к интервалу времени.П р и м е р. Для получения Фосфолипазы А предлагаемым способом берут кишечник от трех животных (100 г), гомогенизируют в трех. объемах 0,05 М трюс -НС 1 буфера и центрифугируют при 16000 в течение 30 мин, осадок отбрасывают, супернатант прогревают при 50 С 5 мин оставляют в холодильнике на несколько часов и центрифугируют при 16000 30 мин. Осадок отбрасывают, супернатант при энергичном помешивании доводят 4 Н НС 2 до рН 5,0 оставляют на 2 ч в холодильнике и центрифугируют. рН супернанта доводят кристаллическим оксиметил-аминометаном (Трис ) до рН 7,5. К...
Способ получения эндонуклеазы рестрикции 1
Номер патента: 1108106
Опубликовано: 15.08.1984
Авторы: Ансберга, Ничаев, Хейслере, Чикаев
МПК: C12N 9/16
Метки: рестрикции, эндонуклеазы
...фракционированиеполученного лизата центрифугированием, хроматографию и диализ, разрушение,клеток проводят смесью лизоцимаи тритона Х 100 (10:1), а клеточныекомпоненты фракционируют в двухфазной системе, содержащей 7,0-7,5-ный 45полиэтиленгликоль мол,в, 6000 и 2,02,1-ный декстран Т 500 при рН 6,06,5 в присутствии 0,50-0,52 М МаС 1.Способ осуществляют следующимобразом, 50Биомассу Могахе 11 а ярес 1 ея лизируют с помоцью лизоцима в присутствии тритона Х 100, затем фракционируют в двухфазной системе полиэтиленгликольдекстран (конечная концентрация в смеси полиэтиленгликоля557; декстрана 2," ИаС 1 0,5 М; рН 6,3)После тщательного перемешиваниясмеси и последующего центрифугирования отбирают верхнюю фазу, содержащую целевой продукт, наносят на...
Способ получения фосфолипазы
Номер патента: 1125246
Опубликовано: 23.11.1984
Авторы: Глемжа, Кулене, Некрашайте, Стрейкувене
МПК: C12N 9/16
Метки: фосфолипазы
...содержащем 1,4-1,6 М ЕаС 1,при рН 7,9-8,1.П р и м е р 1. Способ очисткифосфолипазы 3 из культуральнойжидкости Яггерговусея сьппавовеияв оптимальных условиях.Получение бесклеточной культуральной жидкости, содержащей фосфолипазу 3 . Продуцент фосфолипазыП.Яггерговусея сдппавовеия шт.11 02 Скультивируют на жидкой питательнойсреде следующего состава, г/л: соевая мука 30; фруктоза 1; КНауР 042;ИНЕС 3, при рН 7,2 в течение 48 чпри 30 С и скорости вращения качалкио"12,5 с . Клетки микроорганизмовотделяют центрифугированием при12000 Х у и температуре 2 С в течение 30 мин. 2530 Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому положительному эффекту является способ получения фосфолипазы П из бесклеточной культуральной...
Способ получения холестеринэстеразы
Номер патента: 1151217
Опубликовано: 15.04.1985
Авторы: C12R 1:38, Вольфганг, Клаус, Михаель, Ханс, Хельмгард, Хервиг
МПК: C12N 9/16
Метки: холестеринэстеразы
...- лецитин или соевыйлецитин в количестве 0,5-2% от массысреды,Применяемые в соответствии с изобретением микроорганизмы являютсяочень похожими и обладают следующиепризнаки: грамотрицательный; обяза 0,1 мл 0,1 мл 5,0 мл1,5%7,0 Культивирование производили при 30 С в качалочной колбе при соблюдении аэробных условий. Через 2 суток достигается активность приблизительно 1500 ч/л (раствор и биомасса: субстрат : холестерилолеат),тельно аэробный; желтоватые колонки на агаре из пептонов мяса рост прио9 25, 30 и 37 С; отсутствие роста при10, более 41 зС; размер клеток от 0,8 до 1 мкм, от 2 до 4 мкм; подвижность, 1 орйоггдсй Ье 8 е 1 ре 1 г; склонность к образованию цепей, отсутствие спор или продолжительных стадий: цитохром - оксидаза +; ката- лаза...
Способ определения активности фосфолипазы а
Номер патента: 1364634
Опубликовано: 07.01.1988
Авторы: Андреюк, Киселев, Кисель, Литвинко
МПК: C12N 9/16
Метки: активности, фосфолипазы
...2:1, интенсивно встряхивают 5- 10 мнн, центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин, нижний хлороформный слой .отбирают, упаривают и.продукты реакции - ЛФХ, ФХ и жирные кислоты - разделяют с помощью тонкостойной хроматографии на силикагелевых пластинах в системе растворителей хлороформ: метанол НО (65;25:4 П 7). Пятна, соответствующие лизодимиристоилфосфатидилхолину (ЛФХ) и димиристоилфосфатидилхолину (ФХ), проявляют в парах Т, отмечают их границы, дают испариться. Пятна выскребают. Затем проводят количественное определение неорганического фосфата по методу Васьковского. К пробам добавляют 0,2 мп концентрированной НС 10 и нагревают 10 мин на песчаной бане, к остывшим пробам приливают по 4,8 мп реагента Васьковского, помещают в кипящую...
Способ получения холестеролэстеразы
Номер патента: 1395671
Опубликовано: 15.05.1988
Авторы: Бахматова, Бойко, Браженас, Киприанова, Марцинкявичене, Песлякене
МПК: C12N 9/16
Метки: холестеролэстеразы
...ЦВРпри 10000об/мин в течение 10 мин. Надосадоч 35ную жидкость оставляют, а осадок удаляют. К надосядочной жидкости порциями при постоянном перемешивании иотемпературе +4 С добавляют перекристаллизованный измельченный сульфатаммония до конечной концентрации507. и оставляют стоять в холодильниоке 1-2 ч при +5 С, Появившийся осадокотделяют центрифугированием при техже условиях, Надосадочную жидкостьудаляют, Полученный осадок суспендируют в минимальном количестве 0,05 МФосфатного буфера, рН 7,0, и проводятдиализ против того же буфера в течение 20-24 ч,Определение активности холестеролэстеразы. А ед/мл = .а2нА/мин.,1 210 Э 1000где нА/мин- р 10 -1,2 -Получают За единицу активности холестеролэстеразы принимают количество фермен ,та,...
Питательная среда для культивирования бактерий кlевsiеllа рnеuмоniае вкпм в-1823 продуцента рестриктазы крп i
Номер патента: 1402615
Опубликовано: 15.06.1988
Авторы: Бунина, Смольянинов
МПК: C12N 1/20, C12N 9/16
Метки: бактерий, в-1823, вкпм, кlевsiеllа, крп, культивирования, питательная, продуцента, рnеuмоniае, рестриктазы, среда
...табл. 2 видно, что .рост клеток на предлагаемой среде вФормула изобретения Питательная среда для культивиро" вания бактерий К 1 еЬве 11 а рпецшоп 1 ае ВКПМ В- продуцента рестриктазы Крп 1, содержащая глюкозу, пептон, дрожжевой экстракт, минеральный источник натрия и хлора и дистиллированную воду, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения выхода биомассы, она дополнительно содержит сернокислый семиводный магний, в качестве источника натрия - двузамещенный фосфорнокислый натрий, а источника хлора - хлористый аммоний, при следующем соотношении компонентов, мас, 7,: 0,60-0,65 1,6-1,7два раза лучше, чем на известной.Кроме того, эксперименты показалипрямую корреляционную зависимостьмежду ростом клеток и накоплением...
Способ получения фосфоэстераз гриба реniсilliuм вrеvi сомрастuм
Номер патента: 1402619
Опубликовано: 15.06.1988
Авторы: Ежов, Лузина, Николаева, Санцевич, Трушкина
МПК: C12N 9/16
Метки: вrеvi, гриба, реniсilliuм, сомрастuм, фосфоэстераз
...(л/мин по ротаметру); мешалка 200 об/мин; продолжительность24 ч. 40Полученную культуру в виде густойвзвеси мицелия используют для засевапитательной среды в ферментере емкостью 100 л (1 ОЕ к объему засеваемойсреды), Биосинтез фосфоэстераз Реп 1 с 1111 цт Ьгеч 1-сотраспт проводитсяна среде такого же состава, что и длявыращивания посевного материала вферментере (емкостью 30 л) для выращивания инокулята. Ферментацию ведутпри следующих условиях: температурав ферментере 24+1 С; давление 0,20,3; расход воздуха 0,6:1 (л/мин поротаметру); растворенный кислородподдерживается около 207; рН культу-,5ральной жидкости не ниже 3,0; продолжительность ферментаций 72 ч,По окончании ферментации судят посовокупности следующих показателей: повьппение рН...
Способ получения рестриктаз
Номер патента: 1406159
Опубликовано: 30.06.1988
МПК: C12N 1/20, C12N 9/16
Метки: рестриктаз
...не содержал существенныхпримесей неспецифических нуклеаз ифосфатаз, как следовало из данных подлительному (174) гидролизу ДНК фагаТ 7 и тесту рестрикция - лигирование -рестрикция,П р и м е р 2. Выделение рестриктазы Хва 1.1,0 г влажных клеток бактерии Хапсошопаэ ЬадгЫ суспендируют в 4 мл буфера (10 мМ трис-НС 1 рН 7,9; 10 мИ 2-меркаптоэтанола) с добавлением до0,11 тритона ХОО, охлажденного до6 С, и подвергают дезинтеграции ульт"развуком при частоте 20 кГц и ампли-отуде 15 мкм до 55 С в течение 3 мин.Затем освобождаются от дебриса клетокпутем центрифугирования при 18000 об/14061нВес 1 цпап"). Полученный экстракт разбавляют в 2 раза 0,01 М калийфасфатным буфером,рН 7,5, содержащим 10 мМ2-меркаптоэтанола, 1 мМ трилона Б,107. ,глицерина...
Способ получения эндонуклеазы рестрикции fок1 из flаvовастеriuм океаnокоiтеs
Номер патента: 1406160
Опубликовано: 30.06.1988
Авторы: Белавин, Дегтярев, Малыгин, Репин
МПК: C12N 9/16
Метки: flаvовастеriuм, fок1, океаnокоiтеs, рестрикции, эндонуклеазы
...1 гВода 10 млВсе растворы стерилизуют в автоклаве при 121 С 40 мин, затем сливаютов стерильных условиях непосредственно перед приготовлением питательной среды.Клетки бактерий подращивают на твердой питательной среде при 28 С в течение суток, затем готовят инокулят для засева ферментера. Объем инокулята 1/10 часть от объема Ферментера. Культивирование проводят в феро ментере (объем 20 л) при 28 С и аэрации 20 л/ч. Величина рН в процессе роста поддерживается автоматически на уровне 7,2 добавлением 0,2 н, ИаОН.Клетки выращивают до стационарной .фазы (оптическая плотность 2,5 при =550 нм). Клетки собирают центрифугированием при 5000 х 8 в течение 10 мин. Выход биомассы 3,5 г/л.Выделение и очистка рестриктазы.Все процедуры по выделению...
Штамм бактерий кurтнiа zopfii-продуцент рестрикционной эндонуклеазы кzо 91
Номер патента: 1440919
Опубликовано: 30.11.1988
Авторы: Дегтярев, Жилкина, Новожилова, Речкунова, Семенченко
МПК: C12N 9/16
Метки: zopfii-продуцент, бактерий, кurтнiа, кzо, рестрикционной, штамм, эндонуклеазы
...последовательность нуклеотидов САТС; оптимальное значение рНдля действия рестриктаэы 7,5-90;оптимальная температура действия37 С; для активности рестриктазы требуются ионы Мя , оптимальная концен 2трация 5-15 мМ,П р и м е р, Получение рестриктазыКго 91 иэ Кцг 1 Ь 1 а горГ:( 9. Клетки Кцг 1,111 а гор 11 9, хранящиеся в 503-ном глицерине в Ь-бульоне (ЬВ) состава, г: триптон 10, дрожжевой экстракт 5, ИаС 1 10, вода до 1 л прио20 С, высевают на чашку с Ь-агаром, После 2 сут инкубирования при 30 С клетки собирают петлей и вносят в 100 мп ЬВ и выращивают до плотности 1,5 при 30 С.Затем культуру вносят в 2 л ЬВ ивыращивают до плотности 2,5 при 30 С.После охлаждения клетки собираютцентрифугированием, Выход биомассы2 г...
Штамм бактерий bacillus suвfilis продуцент эндонуклеазы рестрикции bsu 15 i
Номер патента: 1449583
Опубликовано: 07.01.1989
Авторы: Бендукидзе, Вайткявичус, Дегтярев, Петров, Приходько, Репин, Фодор
МПК: C12N 9/16
Метки: bacillus, suвfilis, бактерий, продуцент, рестрикции, штамм, эндонуклеазы
...расщеплять послед вательность нуклеотидов 5 ССАТ. Глубинное культивировао ние проводят при 30 С и аэрации -объема в минуту на питательной ср е, содержащей, г/л воды гидроли ат кильки 40, ИаС 1 20 до достиже я форы замедления роста. ВМход ре триктазы 300000 единиц на грамм би массы, 25Используемый штамм В. вцЫ 1 Ы (15) ВК 1 М Вполучен в результате целенаправленного поиска штаммов - продуйентов рестриктаз,;Штамм ВасП 1 цв вцЬ 11 ь.в (15",П р и м е р 1. Получение рестриктазы Ввц 15 1.Штамм В. вцЬСх 1 ьв (15) поддерживают в пробирках на агаризованной среде под вазелиновым маслом. Для оживления штамм пересевают на чашки Петри с агаризованной средой; содержащей, г/л: гидроливат кильки 40, БаС 1 20 (среда 1), агар 15, и инкубируют при 37 С в...
Способ получения бактериальной холинэстеразы
Номер патента: 1472502
Опубликовано: 15.04.1989
Авторы: Апухтин, Гончарова, Цветкова, Шмелева
МПК: C12N 9/16
Метки: бактериальной, холинэстеразы
...калий фосфорнокислый двух. замещенный О,1; калий фосфорнокислый однозамещенный 0,1; магний сернокислый 0,03; кальций хлористый 0,01;,натрий хлористый 0,01; дрожжевой экстракт 0,05; аммоний фосфорнокислый двухзамещенный 0,2 (по азоту);.ацетилхолин 0,2 при значении рН среды равном 7 - 7,2. Инокулят вносят в расчете 10% по объему. Выращивание проводят в 700 мл колбах с 50 мл среды на качалке при =28 С в течение 72-86 ч. Выросшую биомассу отделяют центрифу";20 гированием, В супернатанте определяют То жецц-"- ацгапг 1 аса В качестве возможных продуцентов холинэстеразы отбирают культуру, клетки которых гидролизуют ИФА не более, чем за 2-3 мин, На 2-м этапе выбор продуцента проводят по эстеразной активности фермента нативного раствора после...
Способ получения кислой фосфатазы
Номер патента: 1495376
Опубликовано: 23.07.1989
Авторы: Галынкин, Егорова, Инге-Вечтомов, Кожин, Хадеева, Яковлев
МПК: C12N 9/16
...основанный на способности Кф отщеплятьот паранитрофенилфосфата (п-НФФ) фос фор, в результате чего образуетсяпаранитрофенол (п-НФ), имеющий максимум поглощения в области 410 нм. Ферментативную активность выражают вмкМ п-НФ, образующегося за,1 мин при33 С, принимая Е= 12500,Удельную активйость КФ выражают в.мкМ и-НФ/мин/мг белка клеток дрожжей,Расщепление гексаплоида 6-5 показано в табл.1. Активность Кф у штамма Упока-.зана в табл.2. В качестве контрольного используютштамм Бассйагощусев сегевае 0-6,Статистическая обработка данных покритерию Стьюдента свидетельствует,что после 4 ч выращивания не выявляются достоверные отличия по количеству экскретируемой КФ между контрольным штаммом и У18 (М 1 й = 3,87,= 4,30). Однако по мере...
Способ получения препарата кислой фосфатазы из дрожжей sасснаrомuсеs cerevisiae
Номер патента: 1505972
Опубликовано: 07.09.1989
Авторы: Вайнерман, Гавриленко, Егоров, Лозинский, Рогожин, Семенова
МПК: C12N 11/04, C12N 9/16
Метки: cerevisiae, sасснаrомuсеs, дрожжей, кислой, препарата, фосфатазы
...4 С сборник в течение 64 ч. Фермецтцый препарат осаждают прибавлением холодного (-20 С) ацетона при соотношенииабьемов осадителя и элюата 1,5; 1.Осадок отделяют цецтрифугировациемзысупивдют в вакууме (0,1 ммрт.ст) цлд лктивировлцным углем иПРОКДЛЕЦЦЬМ ХЛОРИСТЫМ 1;ДЛЬЦИЕМ.ВЫХад 90 МГ Г)ЕЛ), "дСЛЬцая ФОСфатлзцля мстит)а т 5 т)д/ь г бенка,зыход в расчел. Ил с хаццуо биомасЭсу (цр. дутвцост 3,8 ец, дкт/10клеток.П р и м е р . 100 мп стуспецзиЛОТОК ДРажжсй Б. ССГЕттЗ.ЭЗЛЕ Шт,38 - 1 Г - П 188, садерж.тщей 2,8 109 кле -ток цлмл, смеппвлит с 100 мч157.-ИО 0 рлств )рл 1 Вт; готовят равн.)мерцуи суспецзшо, которую рдсфдсс)вы 13;тоГ пат)ци 5 ьт ИО 75 мкл Р 1 замарлжз 13 пог образны при -70 С в течепе 7,5 миц. Далее, клк в примере1, с той рдзцитей,...
Штамм микроскопического гриба aspergillus теrrеus продуцент фосфопротеин фосфатазы
Номер патента: 1551732
Опубликовано: 23.03.1990
Авторы: Быкова, Громова, Чернягин, Чернягина
МПК: C12N 1/14, C12N 9/16
Метки: terreus, аспергиллус, гриба, микроскопического, продуцент, фосфатазы, фосфопротеин, штамм
...часть колонии белоснежная, края неровные, бес цветные. С обратной стороны колония складчатая, в центре светло-желтая, к краю бежевая, сам край бесцветный.На 3-и сутки диаметр колонии достигает 27-30 мм. Центральная часть ко 50 лонии сильно поднята над субстратом, морщинистая, светло-желтого цвета, напоминает "плато" диаметром 17 мм, Вокруг "плато" кольцом белая, пушистая культура с зубчатымн краями, слегка морщинистая, шириной 3-4 мм, затем бесцветная полоса культуры шириной 2-3 мм с неровными краями. Обратная сторона колонии: центральная часть -складчато - морщинистая, желтого цвета,остальная часть - колонии слаба-бежевая, сильная складчатость. На 4-е сутки роста никаких культуральных изменений не произошло.оПри 40 С на той же среде...
Способ получения иммобилизованной холинэстеразы
Номер патента: 1572418
Опубликовано: 15.06.1990
МПК: C12N 11/08, C12N 9/16
Метки: иммобилизованной, холинэстеразы
...фосфата калия (рН 4,56) порциями по 10 мл, три раза буферным раствором (рН 4,56) порциями по 10 мл причем раствор дополнительно содержйт 0,5 моль хлористого натрия, а затем три раза буферным раствором фосфата калия порциями по 10 мл. После этого гель четыре раза промывают холодной дистиллированной водой порциями по 25 мл. Полученный в результате этого и свободный от присутствия солей гель подвергают сушке при температуреониже 0 С. Получают 280,8 мг иммобилизованного холинэстеразного препарата. Активность: гидролиз 102 мкмоль йодида бутирилтиохолина/мин/г сухого вещества. Остаточная активность иммобилизованной и растворенной холинэстеразы соответственно равна 37,3 и 28,2 ь.П р и м е р 7, 252,6 мг ксерогеля Акрилекс С(содержание -...
Способ выделения кислой фосфатазы
Номер патента: 1576564
Опубликовано: 07.07.1990
Авторы: Евдокимов, Евсеев, Ледян, Светличкин, Соколов
МПК: C12N 9/00, C12N 9/16
Метки: выделения, кислой, фосфатазы
...объеме исходного мате Яриала составляет 4,3 МЕ/мл. Затем Мэтот объем центрифугируют 15 мин при3000 8 для отделения спермоплазмы отклеточных элементов эякулята. Далее рспермоплазму, содержащуюся в надосадочной жидкости, хроматографируют вколонке с фенилсефарозой С 1,-4 В,проверяют на содержание КПФ в идиффузионном анализе. Фракции,жащие КПФ в области 0,2 М (ЯН )концентрируют ультрафильтрацией на156564 0,1 М раствором хлористого натрия.Эти фракции сливают вместе и проводятанализ. Концентрация белка в полученном материале 760 мкг/мл, а титр втест-системе на КПФ 1;800, Определяютконцентрацию КПФ с помощью радиоиммунного анализа на простатическую кислую Фосфатазу. КПФ составляет 760000.10 Полученная кислая Фосфатаза обладает высокой...
Штамм асinетовастеr р. -продуцент гидролазы n-карбамоил-5 фенилглицина
Номер патента: 1599433
Опубликовано: 15.10.1990
Авторы: Вайткявичюс, Масайте, Маслинскене
МПК: C12N 1/20, C12N 9/16
Метки: n-карбамоил-5, асinетовастеr, гидролазы, продуцент, фенилглицина, штамм
...по методике,отработанной в лаборатории техноло- щ 0гии биокаталитических процессов НПО"Фермент".СпектроАотометрически карбамоилазную активность показали 8,культур . Наиболее активный штамм1АсжегоЬасйег зр, М 4 имеет показатели активности 49,8 ф 0,7 мкмоль/мин г,Морфологические признаки: палочковидные клетки размером 1,0-1,5 мкм.одиночные или парами, неподвижные,грамотрицательные, спор не образует.Физиологические признаки: колониина МПА после суточной инкубиции при37 С рН 7,0 непигментированные, блестящие, выпуклые, край ровный, размер 1-2 мм при 25 и 45 ф С рост слаУ35бый; сахаров до кислыми продуктов неметаболизирует, желатину не разжижает, крахмал не гидролизует, молоконе свертывает, на картошке не растет,нитратов не усВаиВаетиз...
Штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент неорганической пирофосфатазы
Номер патента: 1659481
Опубликовано: 30.06.1991
Авторы: Глемжа, Кюдулене, Палубинскас, Шпокаускас, Янюнайте
МПК: C12N 1/20, C12N 9/16
Метки: бактерий, еsснеriснiа, неорганической, пирофосфатазы, продуцент, штамм
...кишечная палочка течение 1 ч, а при течение 15 мин.подвижные, катааживающие глюкосбраживает, соИ6 88 хранится оем вазелинового ие 1 года. П р и м е р. Культуру Е.со сервированную в столбике М вазелинового масла, для ожив вают на стерильные чашки Пе ванным рыбным гидра1659481 П о ент Показатели П е агаемый штамм Известный штамм 4 - 6 ч (до конца логарифмической фазы) 8,0-9,0Стационарная фаза Продолжительность культивирования, ч Удельная пирофосфатазная активность, ед/мг белка Общая активность на 1000 мл культуральной жи кости,е4,0 1500-1800 Данные отсутствуют Составитель И. ЧаплйнаРедактор М, Петрова Техред М.Моргентал Корректор Т. Малец Заказ 1821 Тираж 376 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ...
Дийодид бисхолинового эфира 3, 3 -оксидимасляной кислоты в качестве субстрата бутирилхолинэстеразы
Номер патента: 1664788
Опубликовано: 23.07.1991
Авторы: Абдувахабов, Далимов, Самокиш, Тилябаев, Топузян
МПК: C07C 219/06, C12N 9/16
Метки: бисхолинового, бутирилхолинэстеразы, дийодид, качестве, кислоты, оксидимасляной, субстрата, эфира
...и медицине, Цель - созданиенового вещества указанного класса, обеспечивающего улучшение субстратных свойствпо отношению к бутирилхолинэстеразе.Синтез ведут реакцией 3,3 -оксидимасля 1ной кислоты с 2-(диметиламино)этанолом в.присутствии следов конц, Н 2304 в средетолуола при кипении реакционной смеси сотгонкой воды и последующей кватернизацией промежуточного диэфира иодистымметилом в безводном ацетоне, Выход 550т.пл. 150 С, брутто-ф-ла С 1 вНзв 2 Н 205, Целевой продукт обладает более высоким сродством к бутирилхолинэстеразе посравнению с известным бутирилхолином. более высокой скоростью гидролиза (отно.шение скоростей 20,45 при концентрациисубстратов 1 10 моль). 1 табл,-4 К 14,5 г (0,076 моль) 3,3 -оксидимасляной кислоты, растворенной в...
Способ приготовления питательной среды для культивирования продуцентов пектолитических ферментов
Номер патента: 1693049
Опубликовано: 23.11.1991
Авторы: Величко, Полянская, Черкасова, Шутова
МПК: C12N 9/14, C12N 9/16
Метки: культивирования, пектолитических, питательной, приготовления, продуцентов, среды, ферментов
...целлюлолитическихферментов при ферментолизе свекловичного жома (содержание целлюлозы до 70 о )позволяет провести Ферментолиэ целлюлозы до образования олигосахаридов, что позволяет сократить лаг-фазу и получитьболее высокую скорость роста продуцента. Значения рН 2,8-3,2 для проведениякислотного гидролиэа являются существенными, поскольку именно в этом пределе рН образуются продукты фосфоролиза, кото рые являются стимуляторами биосинтезапектолитических ферментбв.Дозировки ферментов для гидролиэаподобраны экспериментально.П р и м е р 1. 3 г свекловичного жома и 10 1 г солодовых ростков заливают 100 мл воды. Доводят ортофосфорной кислотой рН суспенэии до 2,6 и нагревают до 125-130 С, выдерживают смесь при этой температуре 2...
Способ получения простатической кислой фосфатазы
Номер патента: 1747488
Опубликовано: 15.07.1992
Авторы: Евсеев, Ледян, Пашинцева, Светличкин, Соколов
МПК: C12N 9/16
Метки: кислой, простатической, фосфатазы
...на колонке с сефадексом 6-150, уравновешенной 0,15 М такого дефицитного сырья получают толькоодин инградиент - ПКФЦелью изобретения является расширение технических возможностей способа путем одновременного выделения 5специфического простатического антитела.Поставленная цель достигается тем, чтосогласно способу, включающему получениеэякулята, выделение из него спермоплазмы,фракционирование на фенилсефарозе 6: 104 В и пбследующую хроматографическуюочистку полученных фракций, после фракциснирования на фенилсефарозе выделяютдве фракции, содержащие простатическуюкислую фосфатазу и простатический антиген, соответственно, и подвергают фракцию, содержащую простатическую кислуюфосфатазу хроматографической очистке наголубой сефарозе в 0,01 М...
Штамм бактерий bacillus alvei продуцент рестриктазы bav в ii
Номер патента: 1761803
Опубликовано: 15.09.1992
Авторы: Аникейчева, Калугин, Либрик, Самко, Соколов, Фицнер, Хорошутина
МПК: C12N 1/20, C12N 9/16
Метки: alvei, bacillus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм
...споры. Грамположительны (признак непостоянный, варьирует Гр - Гр).+ 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Утилизация углеводов - на глюкозе, лактозе, сахарозе образуют кислоту; на арабинозе, ксилозе и манните кислоту необразуют,Крахмал - гидрол изуют.Лакмусовое молоко - свертывание, пептонизация,Индол и диоксиацетон - образуют,Казеин - расщепляют,Тирозин - не расщепляют,Фенилаланин - не дезаминируют.Оптимальные условия выращивания ихранения культуры,Культура В.а 1 че ВКМ Вхорошо растет на жидких и твердых полноценных питательных средах - бульоне Хоттингера, среде1 В,мясопептонном бульоне,Максимальная и минимальная температура роста культуры соответственно 35 - 45С и 15 - 20 С, а оптимальная температура -37 С. Оптимум роста рН 7,0 - 7 - 2,...
Штамм бактерий bacillus coagulans продуцент рестриктазы всо ai
Номер патента: 1761804
Опубликовано: 15.09.1992
Авторы: Аникейчева, Калугин, Карпычев, Либрик, Самко, Соколов, Фицнер, Хорошутина, Эльдаров
МПК: C12N 1/20, C12N 9/16
Метки: bacillus, coagulans, бактерий, всо, продуцент, рестриктазы, штамм
...в 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ферментере при 37 С в аэробных условияхна питательной среде Хоттингера, котораясодержит в 1 л, 250 мл основного перевараХоттингера; 5 г КаС; 1 г К 2 НР 04 и до 1 лводы. Выращивание прекращают в концелогарифмической фазы роста, когда ростдостигает Аббе=1,5 - 1,7, Выход биомассы 7 - 8г/л,На рыбной среде культура растет плохо(при 18-часовой ферментации на качалкеА 650=0,3).Ферментацию культуры проводят последобавления в ферментер инокулята в соотношении 1:10 к объему среды.Рабочие культуры пересевают на мясопептонный бульон или среду Хоттингераодин раз в 8-10 дней,Хранят культуру в полужидком мясопептонном агаре под вазелиновым масломили в лиофилизированном виде в ампулах,Выделение...