Бактерии — C12N 15/03 — МПК (original) (raw)

Способ получения бактериального пирогена

Номер патента: 1640165

Опубликовано: 07.04.1991

МПК: C12N 15/03

...по данным весового анализа.Общая характеристика состава АПС иих выхода у генетических рекомбинангов и исходных культур донора и редсципиента дано в табл.Выход ЛПС наибольший у половыхгибридов (табл. 1). ЛПС каждой изкультур гидролизуют 17.-ной уксуснойкислотой (50 мл, 2 ч. 100 С) в запаянных ампулах. Переосаждение липида А производят пятикратным объемомацетона.Липид А (10 мг) гидролизуют соляной кислотой (С (1/1 НС 1)=4 моль/л;12 ч; 100 С) в запаянных стеклянных ампулах, Жирные кислоты экстрагируют хлороформом с последующим упариванием и метилированием диазометаном. Проводят контроль чистоты фракции метиловых эфиров. Газожидкостную хроматографию проводят, используя хроматограф с пламенно-ионизационным детектором при...

Способ получения нехолерогенных цамф-негативных вариантов холерного вибриона

Номер патента: 1773940

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Мишанкин, Пинигин, Поздеева, Шевченко

МПК: C12N 15/03

Метки: вариантов, вибриона, нехолерогенных, холерного, цамф-негативных

...25 30 хлороформа. Лизат осветляли при 16000 об/мин и исследовали на наличие цАМФ.Количество белка в лиэатах определяли методом, основанном на спектрофотометрировании растворов при двух длинах волн, разности в величине оптической плотности при 228,65 и 234,5 нм, Концентрация белка, вносимая в пробу при определении цАМ, составляла 60 мкг.При определении цАМФ инкубацию образцов проводили на ледяной бане в течение 2 ч. Отделение белоксвязанного цАМФ от несвязанного нуклеотида осуществляли адсорбцией свободного нуклеотидана угле марки "Норит А", для чего в каждую пробу добавляли 100 мкл угольной суспензии (2,60-ный раствор угля, 20 ь-ный раствор БСА) с последующимцентрифугированием при 10000 об/мин. Равные количества супернатанта (200 мкл)...

Рекомбинантная плазмидная днк nk 34, кодирующая синтез микроцина

Номер патента: 1811538

Опубликовано: 23.04.1993

Авторы: Курепина, Метлицкая, Хмель

МПК: C12N 15/03, C12N 15/30, C12N 15/41 ...

Метки: днк, кодирующая, микроцина, плазмидная, рекомбинантная, синтез

...смеси 50 мкл (состав описан, выше) в 25течение 1 часа при 37 С. После обработкифенолом и переосаждения ДНК этаноломсмесь растворяют в БО мкл буФера, содержащего 6 аМ трис-НС рН 7,9,6 аМ МцСг, 150вМ 0;02 тритона Х 1 ОО, и инкубируют с 10 30ед, рестриктазы ВавН 1 час при 37 С.Фрагмент ДНК размером 5,3 т.п,н. элюируют после фракциоиирования злектрофорезом в.0,7% геле легкоплаакой агарозы, ДНКрастворяит в 10 мкл воды, , 353 мкл раствора ДНК линеаризомнойплазмиды рВВ 325 сливают с 10 мкл раствора фрагмента плазмиды р 1, содержащегогены синтеза микроцина, добавляют 1,5 мклбуфера (0,5 М трис-НС рН 7,9, 0,1 М МоСг, 400,1 М ОТТ, 1 гпМ АТР) и 1 мкл липазы иинкубируют 3 чзса при 16 С,,Плазмиду передают методом трансформации в клети штамма Е....

Плазмида p741, определяющая синтез микроцина и штамм бактерий escherichia coli, обладающий антибактериальной активностью

Номер патента: 1819428

Опубликовано: 10.05.1995

Авторы: Горская, Курепина, Липасова, Поспелова, Рахимова, Соколова, Хмель, Чеснокова

МПК: C12N 15/03, C12N 15/30, C12N 15/41 ...

Метки: coli, escherichia, p741, активностью, антибактериальной, бактерий, микроцина, обладающий, определяющая, плазмида, синтез, штамм

1. Плазмида р741, определяющая синтез микроцина, мол.м. ЗОМДа, содержащая ДНК плазмиды рl штамма Enterobacter sp. фрагмент ДНК фага содержащий транспозон Тn 5 в области tra гена, 6 фрагментов с размерами 25,0; 9,0; 6,8; 2,5; 2,2; 2,2, образующихся при расщеплении рестриктазой Есо RI, 5 фрагментов с размерами 24,0; 23,0; 3,3; 2,5; 2,0, образующихся при расщеплении рестриктазой Sal Gl 8 фрагментов с размерами 15,0; 14,0; 7,5; 4,0; 3,5; 3,3; 3,0; 1,8, образующихся при расщеплении рестриктазой Hindl III, 7 фрагментов с размерами 20,0; 14,0; 4,5; 3,8; 3,5; 2,5; 2,0, образующихся при расщеплении рестриктазой Pvu II, гены синтеза микроцина, устойчивости к микроцину,...

Способ картирования хромосомы псевдомонад

Номер патента: 1067821

Опубликовано: 20.05.1999

Авторы: Меринова, Тарасова

МПК: A61K 39/104, C12N 15/03

Метки: картирования, псевдомонад, хромосомы

Способ картирования хромосомы псевдомонад, включающий выращивание бактерий-доноров в жидкой минимальной среде, ихлизис хлороформом, выделение и очистку ДНК и трансформацию бактерий-реципиентов полученным препаратом ДНК с последующим определением соответствующих маркеров, отличающийся тем, что, с целью повышения точности картирования, трансформацию бактерий-реципиентов проводят сырым лизатом ДНК бактерий-доноров, определяют наличие совместного переноса маркеров, после чего проводят повторную трансформацию бактерий-реципиентов очищенным препаратом ДНК бактерий-доноров в снижающихся относительно насыщающей концентрациях.