Aplicação do conceito dos três Rs nos ensaios de controle da qualidade de imunobiológicos para raiva (original) (raw)
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Otimização da imunofluorescência direta para diagnóstico de raiva
Acta Scientiae Veterinariae, 2018
Rabies diagnosis follows a standardized methodology, where the direct fluorescent antibody test (DFAT) plays an essential role. Optimization of DFAT procedures may improve sensitivity and specificity of the test. In the present study, some of the variables of DFAT were reassessed, such as the duration of acetone fixation of brain impressions on slides, incubation of the pre-adsorbing mixtures of conjugate and infected (IMB) and uninfected mouse brain suspensions (NMB), as well as the length of incubation of the pre-adsorbing mixtures on fixed brain impressions. The combination that provided the greatest efficacy at DFAT was attained when slides were fixed for 30 minutes in acetone at-20 o C, the pre-adsorbing conjugate and NMB/ IMB suspensions were incubated for 60 minutes at 37 o C and subsequently layered onto impressions for 2 hours at 37 o C. These modifications provided a more intense fluorescent reaction, together with a complete inhibition of fluorescence on the control impressions, when compared to the standard recommended procedure.
Aspectos epidemiológicos da raiva: Estudo descritivo
Pubvet
A raiva é uma doença infectocontagiosa ocasionada pelo vírus Lyssavirus, sendo esta zoonose uma problemática para a saúde única, por afetar mamíferos aéreos e terrestre, sendo considerada uma doença negligenciada e de distribuição mundial. Os programas nacionais vigentes, visam o controle da patologia, por meio da imunização de animais domésticos, e para humanos, preconiza-se o protocolo de pré e pós- exposição. Assim, este trabalho tem por objetivo detalhar os aspectos epidemiológicos da raiva através de um estudo descritivo, enfatizando a sua etiologia, epidemiologia, transmissão, sinais clínicos, diagnóstico, tratamento, o controle e a profilaxia da doença.
Diagnóstico de raiva no Rio Grande do Sul, Brasil, de 1985 a 2007
Pesquisa Veterinaria Brasileira, 2008
The results of 23 years of rabies diagnosis carried out at the Veterinary Research Institute Desidério Finamor, in the state of Rio Grande do Sul, RS, Brazil, are reported. From 1985 to 2007, a total of 23.460 specimens were examined, corresponding to 95% of the total number of samples submitted to rabies laboratory diagnosis notified within the state. Diagnostic methods included standard techniques such as the fluorescent antibody test (FAT) and mouse inoculation test (MIT). No cases of human rabies occurred in the period. Rabies virus (RV) was detected in 739 specimens (3.1%), from which 656 (88.7%) were from cattle. The virus was also identified in specimens from 23 dogs (3.1%), 21 horses (2.9%), 29 bats (4.0%), 4 cats (0.5%), 3 sheep (0.4%), 2 pigs (0.27%) and a wild animal of undetermined species (0.13%). The last case of rabies associated with a canine variant was diagnosed in 1988. Two cases of rabies associated with bat variant viruses were reported, in a domestic cat (2001) and in a dog (2007). In cattle, a marked tendency to a decrease in the number of cases was detected in the examined period. In contrast, an increase in the number of cases in haematophagous as well as in non haematophagous bats is noticed. However, as the number of bat specimens submitted for diagnosis has increased, this finding most likely reflects a higher degree of awareness on the possible role for bats in the rabies transmission cycle, rather than any particular changes on the virus or its hosts.
Diagnóstico de raiva no Rio Grande do Sul, Brasil, de 1985 a 20071
Pesquisa Veterinária Brasileira, 2008
RESUMO.-São apresentados os resultados de 23 anos de diagnósticos de raiva realizados no Instituto de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Entre os anos de 1985 e 2007, um total de 23.460 amostras foram diagnosticadas no laboratório, compreendendo cerca de 95% do número total de amostras submetidas ao diagnóstico laboratorial de raiva no Estado. A metodologia utilizada seguiu técnicas padrões como a imunofluorescência direta (IFD) e inoculação em camundongos (IC). Não ocorreram casos de raiva humana no período. O vírus rábico (VR) foi detectado em 739 (3,1%) amostras,
Resposta imune humoral de cães domésticos que receberam dose única de vacina antivírus da raiva
mv&z c r m v s p. g o v. b r Humoral immune response of domestic dogs that received a single dose of rabies vaccine Resumo O Programa Nacional de Profilaxia da Raiva tem como objetivo manter níveis imunogênicos protetores nos animais vacinados, com títulos de anticorpos neutralizantes (AcN) ≥ 0,5UI/mL. O objetivo deste estudo foi avaliar, de acordo com a idade, raça e o período entre a aplicação da vacina e a colheita do sangue, a resposta imunológica de cães que receberam dose única de vacina antivírus da raiva de cultivo celular. Neste estudo foram analisadas 432 amostras recebidas no Instituto Pasteur de São Paulo no triênio 2009-2011. Os dados foram analisados e a avaliação de AcN para o vírus da raiva foi realizada por meio do teste rápido de inibição de focos fluorescentes (RFFIT). Do total das amostras analisadas, 21,76% não possuíam títulos protetores. Dentre essas, 67,02% das amostras eram de filhotes e quando considerado o intervalo entre a data de aplicação da vacina e a colheita do sangue, 60,63% amostras não atingiram a titulação nos seis primeiros meses. Concluiu-se a partir do estudo desta amostragem a necessidade de uma segunda dose de vacina em filhotes, pois estes ficam mais suscetíveis à infecção pelo vírus da raiva, o que aumentaria a possibilidade de uma resposta rápida e duradoura.
REATIVIDADE SOROLÓGICA DE CÃES FRENTE A ANTÍGENOS DE TRÊS ESPÉCIES DE Leishmania
As leishmanioses constituem um grupo de doenças zoonóticas, causadas por várias espécies de protozoários do gênero Leishmania. Várias espécies animais servem como reservatório deste parasito, sendo o cão (Canis familiaries) de grande importância na cadeia epidemiológica, devido à sua proximidade com o homem. O diagnóstico geralmente é estabelecido com base na associação entre os achados clínico-epidemiológicos e exames laboratoriais, tais como: histopatológicos, pesquisa direta do parasito, sorológicos e moleculares. O objetivo do presente estudo foi verificar a reatividade sorológica de cães, atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia, por ELISA frente aos antígenos de três espécies de Leishmania. Dos 502 soros analisados 13,15% apresentaram reatividade com o antígeno de L. amazonensis, 7,60% L. braziliensis e 14,75% L. chagasi, com concordância de 1,60% entre os antígenos das três espécies. Houve diferenças quanto à reatividade sorológica entre as preparações antigênicas (P=0,0001). O antígeno obtido a partir de L. braziliensis apresentou reatividade sorológica significantemente menor quando comparado a L. amazonensis e L. chagasi, P=0,0048 e P=0,0367, respectivamente. Por immunoblotting o reconhecimento sorológico foi observado contra componente de 67kDa. Quanto aos achados clínicos e epidemiológicos, verificou-se um aumento discreto na reatividade sorológica à Leishmania no grupo de cães que apresentavam hepatopatias, lesões renais ou de pele, e baixa reatividade nos soros de animais com idade inferior a dois anos ou que eram suspeitos de Erliquiose. As diferenças entre as espécies de Leishmania analisadas, podem haver a diferenças na reatividade sorológica.
Pesquisa Veterinária Brasileira, 2008
Para a padronização da técnica de imuno-histoquímica para raiva foram utilizadas cinco amostras de SNC de bovinos infectados naturalmente com o vírus da raiva usando-se um anticorpo policlonal e dois monoclonais. Para a recuperação antigênica foram avaliados os seguintes reagentes: protease XIV, proteinase K e tampão citrato pH 6,0 mantido a 100ºC por 15 minutos. A detecção de antígeno rábico nas amostras foi possível com os três anticorpos utilizados. O anticorpo policlonal foi superior aos anticorpos monoclonais, demonstrando bons resultados com os três protocolos de recuperação antigênica, obtendo uma maior intensidade de marcação quando utilizado o tampão citrato e calor. A técnica de imuno-histoquímica demonstrou a presença do antígeno viral no citoplasma de neurônios na forma de agregados de grânulos ou de forma redonda ou oval, mostrando cor púsculo de inclusão viral único a múltiplos nos neurônios. A imuno-histoquímica é um método rápido, podendo ser usada na rotina em casos...
Pesquisa Veterinária Brasileira, 2009
Este estudo retrospectivo incluiu achados clínicos e patológicos de 15 bovinos afetados por raiva. Em treze dos quinze casos, raiva foi confirmada por imunofluorescência direta. Bovinos entre 4 meses e 8 anos foram afetados. O curso clínico variou de três a sete dias. A forma paralítica foi a mais frequente e incluiu incoordenação, paresia e paralisia dos membros pélvicos, decúbito, movimentos de pedalagem e morte. Os principais achados histopatológicos foram meningoencefalite linfoplasmocitária associada com corpúsculos de Negri em 86,6% dos casos. Todos os casos foram positivos na imuno-histoquímica para raiva, cujas reações foram mais evidentes no tronco encefálico, incluindo bulbo, ponte e mesencéfalo, além de gânglio trigêmeo. A imuno-histoquímica demonstrou o vírus da raiva em axônios, dendritos e pericário de neurônios, como agregados de grânulos ou em formações arredondadas associadas com números variáveis de corpúsculos de inclusão virais nos neurônios. Houve também marcaçã...
Revista De Saude Publica, 1994
Between January, 1988 and December, 1992 the S. Paulo Animal Disease Control Center subjected 289 bats to rabies examinations, utilizing the direct immunofluorescence and biological techniques. Two insectivorous bats belonging to the species Nyctinomopsmacrotis, representing 0.69% of the total sample, tested positive. Both animals had been captured alive in residential neighborhoods of the city, one in 1988 in the living room of a 7' th floor apartment and the other in 1990 on top of a wall surrounding a private house. In the biological tests, the disease showed incubation periods of 13 and 11 days respectively.Although the existence of infected insectiverous bats in urban areas is cause for concern, indiscriminate predatory action against such species can in no way be justified-particularly bearing in mind their importance in preserving the ecological balance of the insect population so prevalent in cities.