Single-chain variable fragment (original) (raw)
単鎖可変領域フラグメント(たんさかへんりょういきフラグメント、英: single-chain variable fragment、scFv)は、免疫グロブリンの重鎖(VH)および軽鎖(VL)の可変領域を、10~25アミノ酸程度の短いリンカーペプチドで繋いだ融合タンパク質である。したがって、実際にはではない。リンカーは通常、柔軟性のためにグリシンを、また溶解性のためにセリンまたはスレオニンを多く含み、VHのN末端とVLのC末端をつないだり、またはその逆の場合もある。このタンパク質は、定常領域の除去とリンカーの導入にもかかわらず、元の免疫グロブリンの特異性を保持している。右の画像は、通常、この修正によって特異性が変化しないことを示している。 これらの分子は、ファージディスプレイを容易にするために作成された。ファージディスプレイは、を単一のペプチドとして発現することが非常に便利である。別の方法として、ハイブリドーマに由来するサブクローン化された重鎖および軽鎖からscFvを直接作成することもできる。scFvには、フローサイトメトリー、免疫組織化学、人工的T細胞受容体(キメラ抗原受容体)の抗原結合ドメインなど、多くの用途がある。 哺乳類の細胞培養で作られることが多いモノクローナル抗体とは異なり、scFvは大腸菌などの細菌の細胞培養で作られることが多い。
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dbo:abstract | scFv-Fragmente, auch scFv-Antikörper (von engl. single chain variable fragment), sind künstlich hergestellte Antikörperfragmente, die die Antigen-erkennenden variablen Domänen der leichten und der schweren Kette eines klassischen Antikörpers kovalent verbinden. Beide Domänen sind über einen kurzen Linker, der in der Regel aus einer Sequenz der Aminosäuren Glycin oder Serin besteht, mit Hilfe molekularbiologischer Methoden miteinander verbunden. Mit Ausnahme der an die fehlende Fc-Einheit geknüpften und über eine Aktivierung des Komplementsystems vermittelten Zytotoxizität bleiben die wesentlichen Eigenschaften eines Antikörpers, insbesondere seine Selektivität und seine Affinität erhalten. scFv-Antikörper finden experimentell in der Durchflusscytometrie und in der Immunohistochemie Anwendung. Darüber hinaus werden derzeit einige scFv-Antikörper, wie beispielsweise und -scFv, sowie ein bispezifischer scFv-Antikörper (Blinatumomab) in klinischen Studien für eine mögliche therapeutische Anwendung untersucht. Derivate von scFv sind z. B. SMIPs. (de) Un anticuerpo monocatenario, fragmento Fv monocatenario o scFv es la fusión de las regiones variables de las cadenas pesada y ligera de las inmunoglobulinas, unidas mediante un péptido conector. Éste está formado habitualmente por residuos de glicina (para aportarle flexibilidad) y de serina o treonina para darle solubilidad. Esta molécula quimérica mantiene la especificidad de la inmunoglobulina original, a pesar de la eliminación de las regiones constantes y la introducción del péptido conector. La imagen de la derecha muestra cómo estas modificaciones dejan inalterada la estructura de la región del anticuerpo que reconoce el antígeno. Estas moléculas se crearon originalmente para facilitar la confección de (phage display) donde es muy conveniente expresar el dominio de unión al antígeno como un único péptido. Por otra parte, los scFv se pueden crear directamente a partir de cadenas ligeras y pesadas , derivadas de un hibridoma. Los scFv tienen muchas aplicaciones, como la citometría de flujo, la inmunohistoquímica o como dominios de unión a antígeno de . (es) A single-chain variable fragment (scFv) is not actually a fragment of an antibody, but instead is a fusion protein of the variable regions of the heavy (VH) and light chains (VL) of immunoglobulins, connected with a short linker peptide of ten to about 25 amino acids. The linker is usually rich in glycine for flexibility, as well as serine or threonine for solubility, and can either connect the N-terminus of the VH with the C-terminus of the VL, or vice versa.This protein retains the specificity of the original immunoglobulin, despite removal of the constant regions and the introduction of the linker. The image to the right shows how this modification usually leaves the specificity unaltered. These molecules were created to facilitate phage display, where it is highly convenient to express the antigen-binding domain as a single peptide. As an alternative, scFv can be created directly from subcloned heavy and light chains derived from a hybridoma. ScFvs have many uses, e.g., flow cytometry, immunohistochemistry, and as antigen-binding domains of artificial T cell receptors (chimeric antigen receptor). Unlike monoclonal antibodies, which are often produced in mammalian cell cultures, scFvs are more often produced in bacteria cell cultures such as E. coli. (en) 単鎖可変領域フラグメント(たんさかへんりょういきフラグメント、英: single-chain variable fragment、scFv)は、免疫グロブリンの重鎖(VH)および軽鎖(VL)の可変領域を、10~25アミノ酸程度の短いリンカーペプチドで繋いだ融合タンパク質である。したがって、実際にはではない。リンカーは通常、柔軟性のためにグリシンを、また溶解性のためにセリンまたはスレオニンを多く含み、VHのN末端とVLのC末端をつないだり、またはその逆の場合もある。このタンパク質は、定常領域の除去とリンカーの導入にもかかわらず、元の免疫グロブリンの特異性を保持している。右の画像は、通常、この修正によって特異性が変化しないことを示している。 これらの分子は、ファージディスプレイを容易にするために作成された。ファージディスプレイは、を単一のペプチドとして発現することが非常に便利である。別の方法として、ハイブリドーマに由来するサブクローン化された重鎖および軽鎖からscFvを直接作成することもできる。scFvには、フローサイトメトリー、免疫組織化学、人工的T細胞受容体(キメラ抗原受容体)の抗原結合ドメインなど、多くの用途がある。 哺乳類の細胞培養で作られることが多いモノクローナル抗体とは異なり、scFvは大腸菌などの細菌の細胞培養で作られることが多い。 (ja) |
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