Переносящие фосфорсодержащие группы, например киназы (2.7) — C12N 9/12 — МПК (original) (raw)

Способ получения креатинкиназы

Номер патента: 279892

Опубликовано: 01.01.1970

МПК: C12N 9/12

...ед/мг. 25 Спосоо получения креатинкиназы путем экстракции мышц кролика хлористым калием осаждения балластных белков, тепловой де натурации, отделения осадка с последующим З 0 диализом надосадочной жидкости и кристалИзвестны способы получения креатинкиназы путем экстракции мышц кролика хлористым калием, осаждения балластных белков, тепловой денатурации, отделения осадка с последующим диализом надосадочной жидкости и кристаллизации целевого продукта.По предлагаемому способу надосадочную жидкость охлаждают и обрабатывают освобожденным от тяжелых металлов этанолом до достижения концентрации 70%. Это позволяет повысить качество фермента и упростить технологию его получения.Для получения креатинкиназы мышцы кролика гомогенизируют и...

Способ выделения мв-изоэнзима креатинкиназы из смеси ее изоэнзимов

Номер патента: 1135431

Опубликовано: 15.01.1985

Авторы: Гопал, Джон, Майкл

МПК: C12N 9/12, G01N 33/48

Метки: выделения, изоэнзимов, креатинкиназы, мв-изоэнзима, смеси

...СнеггфиЕСКИЕ СКОЛЫ Ц УСЛО- вя, Иостстт 11 тну Огнтс пеле и гзыбОре- Г И СКО ГГ т" Г СТо 51, г; т Гдтттггг.,1:,Г,нт Е:1 дрдетр ОГно 1 товдчя;ггут быЛЕГКО ОПТ) ЕДЕЛЕГьг,Гтос ттн О тттит ЕЛЬПО 1 С 101 а Н.ОС КО 1011сл 051 явл 51 еГся с. еь 1 г Лтгтгзцег 05СШИтой дЕКСТГднгтптойт дппОгообКЕП Пойсмолы с катионообкенпой с 050 т, вКОтОРОй ТЕШЕТКД ДКРИЛОВОГО ПОЛИКЕРаЗ ДМЕЩЕПа КИСЛОТПОй Г 1 дтттхгтионДЛЬНОрг"5,.01.10 аготт ообг,гегп 15 СмолагЕЛЕ ,а 1:,текс Л 25 и:;Опообтенс 05 а иго-тего 70,При приме епии сесь иопосбменпых смол Обычно гОгругсаетс 51 в буфер.р 1 для смол 6,0-6 гг, Прп нвкием пределе ОН тг - и ВВ-тт Оэ т р,т Ого тСЕЛЕГКО ЗатЕРХ 1 ВДОТС 5 С 105 Ой. ПРИ ВЕРХнем предел - рН бо 11 ее 5 еггго этпоируется МВ-пзоэнзим, но Также...

Способ выделения урокиназы из биологических источников

Номер патента: 1175965

Опубликовано: 30.08.1985

Авторы: Дудкин, Егоров, Керницкий, Михайлова, Саркисов, Северин

МПК: A61K 38/49, C12N 9/12

Метки: биологических, выделения, источников, урокиназы

...урокинаэу, диалиэуют и лиофильно высушивают.П р и м е р 1. К 1 литру среды кондиционирования культуры клеток почек человека КН, содержащей 35 МЕ урокиназы намл, добавляют 106 г сульфата аммония до 207-ного насыщения, подводят рН до 7,0 1 М трис. Раствор наносят на колонку 1 7 см, упакованную 20 мл бензилсефарозы, которая предварительно уравновешена О,1 М трис-НС 1 буфером рН 7,0, содержащим 0,4 М ГаС 1 и 207. сульфата аммония. Все процедуры проводят при комнатной температуре. Скорость нанесения среды кондиционирования 250 мл/ч. Колонку промывают с такой же скоростью уравновешивающим буфером до полного прекращения вымывания красителя, содержащегося в сре - де кондиционирования, и белков, не связавшихся со смолой. Урокиназной активности...

Способ получения глицеролкиназы

Номер патента: 1433980

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Ермакова, Ильченко, Моргунов

МПК: C12N 9/12

Метки: глицеролкиназы

...мМ глицерина, 1 мМ ЭДТА (буфер А)в соотношении 10 мл буфера на 1 гдрожжей. Клетки разрушают путем продавливания на прессе из замороженного состояния. Неразрушенные клетки иклеточные стенки удаляют центрифугированием. Бесклеточный экстракт прогревают 10 мин при 60 С на водянойбане, коагулированный белок отделяютцентрифугированием (4000 я, 20 мин).Супернатант (5 мл) наносят на колонку (2,5 20 см), заполненную сефарозой 4 Б со связанным красителем активным ярко-голубым КХ и уравновешенную буфером А.Краситель связывается с сефарозойследующим образом. К 150 мл сефароэыдобавляют 2,5 ИаСОз в 50 мл дистиллированной воды и 50 мл 2 -ного раствора красителя, затем смесь инкубируют 40 ч при 45 С с перемешиванием,После инкубации гель переносят...

Способ получения комплексного ферментного препарата ацетокиназы и аденилаткиназы из биомассы е. coli

Номер патента: 837066

Опубликовано: 15.10.1989

Авторы: Загребельный, Закабунин, Романов, Феофанов

МПК: C12N 9/12

Метки: аденилаткиназы, ацетокиназы, биомассы, комплексного, препарата, ферментного

...биомассу Е. со 1 МКЕ разрушают сначала лизоцимом, а затем ультразвуком в трис-НС 1 буфере, содержащем 0,1-0,15.М КС 1 (для полноты экстракции белков) и получают грубый экстракт. Такой способ разрушения биомассы позволяет выделить на стадии грубого экстракта в 10 раз большее количество единиц активности ацетокиназы и аденилаткиназы по сравнению с разрушением биомассы только лизоцимом или только ультразвуком, Грубый экстракт обрабатывают 3%-ным раствором стрептомицинсулЬфата дпя удаления нуклеиновых кислот, Затем проводят фракцнонирование сульфатом аммония в следующем порядке: сначала осаждают белки при концентрации сульфата аммония 68-70 насыщения, а затем растворяют осажденныебелки доведением концентрации сульфата аммония до...

Штамм бактерий вrеviвастеriuм sтатiоnis продуцент nad киназы

Номер патента: 1631079

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Вайткявичюс, Варанаускайте, Некрашайте, Стрейкувене

МПК: C12N 1/20, C12N 9/12

Метки: sтатiоnis, бактерий, вrеviвастеriuм, киназы, продуцент, штамм

...4 1М 8801. 01 у РНсреды без глюкозы 7.4, Технологияприготовления среды: среду (без глюкозы) разливают по 100 мл в конические колбы емкостью 750 мл и стерилизуют при 0,8 атм 30 мин, отдельно готовят 25 Х-ный раствор глюкозы, стери-,лизуют 20 мин при 0,5 атм и добавля-,45ют по 2 мл в каждую колбу непосред,ственно перед засевом,Стерилизованную среду засевают с агара культурой Вге 1 Ъасйегхцш зСаС 1 опхз 1228. Посевной материал выра-щивают в. условиях перемешивания на круговых качалках с радиусом вращения 25 мм и частотой 220 мин , при 30 С.в течение 24 ч. Приготовленный таким способом посевной материал слуЫ жит в качестве инокулята.Для получения 1 ИЭ-киназы продуцент культивируют в колбах (20 колб) на среде такого же состава, как и для...

Способ получения обратной транскриптазы из еsснеriснiа coli

Номер патента: 1638162

Опубликовано: 30.03.1991

Авторы: Воробьева, Небрат, Петрусева, Ромащенко, Стариковская, Шаманина

МПК: C12N 9/12

Метки: еsснеriснiа, обратной, транскриптазы

...72 г; удельная активность фермента 42 е.а,/мг.2. Фракционирование в двухфазной системе полиэтиленгликоль-декстран.К 3300 мл полученного грубого экстракта добавляют 1095 мл 300 -ного раствора полиэтиленгликоля (ПЭГ, мол,мас. 20000 О) и 200 мл 200 -ного раствора декстрана Т. Полученную смесь перемешивают в течение 30 мин при помощи механической мешалки. Затем центрифугируют 40 мин при 9000 об./мин. Верхнюю фазу отбрасывают, э к нижней добавляют раствор, содержащий 0,4 М КС 1, 50 мМ трис-НС 1 (рН 8,3) и 60 -ный раствор ПЭГ (мол,мас, 20000 О), из расчета 8 об. этого раствора на 1 об нижней фазы. После 30 мин энергичного перемешивания вновь разделяют фазы центрифугированием (40 мин, 9000 об./мин) и отбрасывают верхнюю фазу. К нижней...

Способ выделения днк-полимеразы tru из биомассы бактерий микроорганизма jнеrмus ruвеr вкм 1258

Номер патента: 1701112

Опубликовано: 23.12.1991

Автор: Каледин

МПК: C12N 9/12

Метки: jнеrмus, ruвеr, бактерий, биомассы, вкм, выделения, днк-полимеразы, микроорганизма

...7,5 и осаждают белок (ИН 4)рЯО( в интервале 35-75% насыщения за 30 мин при т = 4 С, центрифугируют 20 мин 15000 об/мин с 20000 9, Осадок1701112 Составитель В. ВарламовТехред М.Моргентал Корректор М, Максимишинец Редактор О. Головач Заказ 4480 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 растворяют в буфере А, содержащем 10 мМК-фосфата рН,5, 0,5 мМ ЭДТА, 5 мМ 2-меркаптоэтанола, диализуют против этого жебуфера (12 ч) и наносят на колонку с КМ(карбоксиметил)-Тоеперлом, 5Элюируют буфером А. Белок, не связавшийся с сорбентом, собирают при помощиспектрофотометра при длине волны 280...

Штамм бактерий тнеrмus тнеrморнilus продуцент днк полимеразы

Номер патента: 1839189

Опубликовано: 30.12.1993

Авторы: Глухов, Киселев, Крамаров, Северин

МПК: C12N 1/20, C12N 9/12

Метки: бактерий, днк, полимеразы, продуцент, тнеrмus, тнеrморнilus, штамм

...пленка, физиолого-биохимические признаки: температурный оптимум 70 - 90 С, оптимум рН 6,7 - 7,9, Облигатные ээробы. Хороший рост на средах с триптоном 0,1-0,3 и дрожжевым экстрактом 0,1 - 0,3;. Плохой рост на средах с содержанием триптона и дрожжевого экстракта свыше 1%. Рост на среде с гидролизатом казеина (0,1), свободным от витаминов, и с добавлением глутаминовой кислоты (0,5 оь) в качестве источников углерода, азота и энергии. Растет на синтетической среде с сульфатом аммония или глутаматом, используемыми в качестве источников азота, и с углеводами или солями органических кислот - глюкозой или сахарозой, ацетатом, сукцинатом, цитратом, нет роста на среде с нитратами, используемыми в качестве источников азота. Чувствительна к...