С нерастворимым носителем для иммобилизации иммунологических материалов — G01N 33/543 — МПК (original) (raw)
Способ количественного определения микроорганизмов
Номер патента: 1290170
Опубликовано: 15.02.1987
Авторы: Власенко, Гаврилова, Егоров, Райнина, Тарасевич
МПК: G01N 33/543
Метки: количественного, микроорганизмов
...количеству клеток, связавшихся с иммуносорбентом. Количество, клеток в образце определяют по калибровочной кривой зависимости интенсивности излучения от содержания клеток в стандартных растворах.П р и м е р 1. Построение калибровочного графика и определение количества клеток Е.со 1 зКультуральную жидкость, содержащую 10 клеток/мл Е,со 11 разводят 0,01 М6К-фосфатным буфером, содержащим 0,15 М ИаС 1 в следующих соотношениях: 1:10, 1:100, 1:200, 1:500, 1:2000. Затем 0,5 мл раствора каждого разведения смешивают с 400 мкл суспензии СБВг-сефарозы с иммобилизованными антителами к Е.со 12 Смесь инкубируют при 37 С в течение 30 мин, после чего иммуносорбент промывают 0,01 М К-фосфатным буфером (рН 7,4), содер70 1:500, 1;2000, Затем 0,5 мл...
Способ проведения гибридизационного анализа
Номер патента: 1620938
Опубликовано: 15.01.1991
Авторы: Венер, Зубов, Кнорре, Коваленко, Лукин, Свердлов, Туркин, Турчинский, Щербо
МПК: C12Q 1/68, G01N 33/543
Метки: анализа, гибридизационного, проведения
...1,1 ЭС 1. Раствор биотин;лировзнной ДНК хранят при -20 С,25 г) Гибридизация,Нейлоновые фильт ы с нанесенной наних, НК переносят в .Зшки Петри с 3 млпредГибридизационнОГО раствора (1 мл нз1 см ), содержащего (на 10 мл) 2 мл воды,30 5 мл формзмида, 1 мл 10%-ного додецилсульфзта натрия 1 ДСН), 2 мл 59%-ного декстрансульфэта, 0,5 мл 1 М трис-НС 1, рН 7,5,и 0,58 г Г 1 ЭС 1. Инкубирчат 10 мин при 42 ОС.Затем добавляют 120 мкг (из расчета35 40 мкг/мл) ДНК спермы лосося и 0,6 мкгбио.ги нилированной ДН К из расчета0,2 мкг/мл), которые и редварител ьн о денатурируот 10 мин при 100 С. Гибридизацию ведут при 42 С в течение 16 ч при40 постоянном перемешивании, По окончаниигибридизации фильтры отмывают два разапо 5 мин раствором 3 мл), содержащим0,3 М...
Способ получения носителя для иммунодиагностики
Номер патента: 1620939
Опубликовано: 15.01.1991
Авторы: Авдеев, Ерохин, Зубов, Лукин
МПК: G01N 33/543
Метки: иммунодиагностики, носителя
...колбу помещают 3 мл акролеина, 70 мл дистиллированной воды, содержащей 0,006 г красителя (0,00" мас. генцлана фиолетового, и добавляют 6 мл 0,2 н.КОН, Перемешивают 2,5 ч при 35 С, затем температуру смеси повышают до 85 С, продувают аргоном 20 мин и добавляют 0,10 г пероксида бензоила (4) в 2,5 мл этанола и продолжают перемешивание при 85 С в течение 2 ч. По - лучают окрашенную в синий цвет полиакролеиновую суспензлю со средним диаметром частиц 1,45 мкм и К = 1,07.4 мл промытой 5-ной суспензии осаждают центрифугированием, Осадок суспендируют в 5 мл 0,05 М фосфатного буфера, рН 7,2, и добавляют 5 мл 1,50-ного водного раствора казвина. Смесь выдерживают при комнатной температуре и перемешивании в течение 12 ч. Далее процесс ведут...
Способ определения активности рецепторов нейтрофилов человека
Номер патента: 1686372
Опубликовано: 23.10.1991
Авторы: Конышкина, Лебедева, Маянский, Невмятуллин, Сибирякова, Чеботарь
МПК: G01N 33/543
Метки: активности, нейтрофилов, рецепторов, человека
...люминола) добавляют по 0,1 мл взвеси объектов, связанных с 98 или СЗв-фактором (концентрация 96-опсонизированного стафилококка и пептидогликана - соответственно 500 млн. бакт,клеток/мл и 10 мкг/мл, зимоэана - 10 мг/мл), В качестве контроля используют объекты, не обработанные 96 либо СЗв-фактором комплемента (в соответствующих дозировках). Каждую пробу исследуют в трех повторениях, Хемилюминесценцию измеряют при красном свете, При оценке функциональной активности Рс-рецепторов хемилюминесценцию измеряют через 30 мин после внесения стимулятора, при оценке СЗв-рецепторов - через 10 мин после внесения стимулятора. Результаты учитывают по разнице между максимальными показателями хемилюминесценции, индуцированной объектами, связанными с 96 или...
Способ получения твердофазного носителя для иммунохимического анализа
Номер патента: 1711080
Опубликовано: 07.02.1992
Авторы: Бовдей, Кожич, Кудина, Марцев, Прейгерзон, Смирнов
МПК: G01N 33/531, G01N 33/543
Метки: анализа, иммунохимического, носителя, твердофазного
...концентрация (чувствительность) в двухцентровом иммуноферментом анализе (в нг/мл)Используют твердофазнце носители с поверхностью 0,90-0,95 см, обработаннце2диметилсульфоксидом. В качестве белка для адсорбции применят антисцворотку барана против иммуноглобулинов 6 кролика. 5 Адсорбцию белка проводят по вышеуказанному. Твердофазные носители с адсорбированным белком инкубируют в растворе 0,05 М натрийфосфатного буфера (рН 7,4) с 1; бычьего сывороточного альбумина и 10 0,15 М йаС содержащем различные концентрации иммуноглобулинов 6 кролика (Са Ыоспеа) и конъюгат аффинно очищенных ослиных антител к 196 кролика с пероксид 9 азой хрена в конечной концентрации 15 10 М. После инкубации в течение 4 ч при комнатной температуре и постоянном...
Способ проведения твердофазного иммуноферментного анализа
Номер патента: 1730595
Опубликовано: 30.04.1992
Авторы: Базаров, Конюшкина, Костюченко, Мищенко
МПК: G01N 33/543
Метки: анализа, иммуноферментного, проведения, твердофазного
...Азия. В дальнейшем подготовку,проведение и учет результатов реакции осуществляют по примеру 1.Отличия состоят в том, что на стадияхвзаимодействия антигена с антителами привнесении конъюгата специфических антител с ферментом и при внесении субстратареакцию проводят при 53 С в течение 5 мин,В качестве фермента можно использоватьлибо пероксидазу, либо В-лактамазу., либоВ-Д-галактозидазу, а в качестве субстрата -либо ОФД, либо АБТС, либо 4 МУГ, либойодинол, что на результаты реакции не влияет.П р и м е р 4. На поверхности лунокполистирольного микропланшета адсорбируют гамма-глобулины к вирусу болезниАуески из расчета 1 мкг/лунка в 0,1 М карбонатном буфере с рН 9,4 - 9,6 в течение 1 чпри 37 С, В дальнейшем подготовку, проведение и учет...
Устройство для определения составных частей жидкостей
Номер патента: 1743372
Опубликовано: 23.06.1992
Авторы: Бернвард, Вольфганг-Райнхольд, Генри, Дитер, Манфред, Марк, Роберт
МПК: G01N 21/77, G01N 33/49, G01N 33/543 ...
Метки: жидкостей, составных, частей
...а при ширине щели примерно0,1 мм - за 30 с, при ширине щели 0,05 ммвремя заполнения канала выше 30 с, Видно,что в этой области влияние увеличивающе 40 гося сопротивления потоку перевешиваетувеличение капиллярных сил, поэтому скорость потока с уменьшением размера капилляра уменьшается.Скорость всасывания, с которой запол 45 няются реакционные слои 11 и 12, зависитот их свойства. В зависимости от случаяприменения в носителях применяются сильно различающиеся реакционные слои, Например, реактивы могут пропитывать50 .бумагу, фетр или матрицу из пористой пластмассы. Могут также применяться реакционные слои из набухающих носителей,например иэ геля или для желатина. Скорость впитывания, с которой реакционные55 слои пропитываются жидкостью оробы,...
Способ диагностики аутоиммунного поражения миокарда при миокардитах
Номер патента: 1780007
Опубликовано: 07.12.1992
Авторы: Зимин, Котелевцев, Рязанов, Терещенко
МПК: G01N 33/543
Метки: аутоиммунного, диагностики, миокарда, миокардитах, поражения
...псию, В качестве положительного контроля точности способа в качестве антигена истрия, 50 мУ раствор Трис, 0,2 о-ный раствор бета-меркаптоэтанол). Прогревают в течение 5 мин при 95 С и центрифугируют в течение 20 мин при 20000 оборотах в минуту. После добавления 10 О-ного раствора глицерина и бромфенолового синего наносят 50 мкг белка мембран кардиомиоцитов на дорожку или 2 мг в 300 мкл на пластинку 20 х 10 см, залитую препаративной гребенкой, Проводят электрофорез при постоянном напряжении 100 В в течение 3,5 ч,Для получения диагностических полосок переносят белок мембран кардиомиоцитов на нитроцеллюлозу методом иммуноблоттинга при охлаждении с напряженностью электрического поля 25 В/см, силе тока 0,45 А в течение 1,5 ч на приборе...
Способ иммуноанализа биологически активных веществ
Номер патента: 1801214
Опубликовано: 07.03.1993
Авторы: Горовиц, Дзантиев, Духович, Изумрудов, Осипов
МПК: G01N 33/543
Метки: активных, биологически, веществ, иммуноанализа
...антигена используют коммерческий препарат 1 цб человека,В качестве фермента используют пероксидазу хрена с РЕ = 3,0 (ПХ),Конъюгат 1 цб человека с пероксидазой(ПХ/ЕС 1.11,1,7) получают методом окисления углеводного компонента фермента периодатом натрия.Нерастворимый заряженный полимерготовят следующим образом. Нитроцеллюлозные фильтры производства фирмы "Симпор" инкубируют в 1 х 10 М раствореполи-винил-пиридинийбромида (ПВП) смолекулярной массой 80000 в калий-фосфатном буфере рН 7,2(КФБ) втечение 1 часапри комнатной температуре, Затем фильтрыблокируют 3%-ным раствором бычьего сывороточного альбумина в КФБ в течение 1часа при комнатной температуре.В серию инкубационных пробирок, содержащих 1 цб человека в концоентрациях1 х 10, 5 х 10,...
Способ определения трипсина в крови
Номер патента: 1814075
Опубликовано: 07.05.1993
МПК: G01N 33/543
...качестве твердой фазы используютлунки 96-гнездного планшета, сенсибилизированного трипсином, в качестве антител -кроличью антисыворотку без предварительного выделения очищенных антител противтрипсина, в качестве метки - белок "А" стафилококка, конъюгированный с пероксидазой хрена. К твердой фазе добавляютисследуемый образец или стандарт (содер ф жит известное количество трипсина, ингибированного контрикалом) и антисывороткупротив трипсина, инкубируют в течение ночи. Комплекс - иммобилизованный трипсинантитело-промывают, добавляют белок "А",меченный пероксидазой хрена, инкубируют2 ч, промывают, вносят субстрат для фермента, через 30 мин останавливают .реак-.цию добавлением серной кислоты иопределяют оптическую плотность раство(57)...
Способ очистки антител к тиреоидным гормонам
Номер патента: 1484094
Опубликовано: 15.01.1994
Авторы: Ермоленко, Пышко, Свиридов, Стрельченок
МПК: G01N 33/543
Метки: антител, гормонам, тиреоидным
СПОСОБ ОЧИСТКИ АНТИТЕЛ К ТИРЕОИДНЫМ ГОРМОНАМ, включающий инкубирование антисыворотки с тиреоидным гормоном, иммобилизованным на нерастворимом носителе, промывку аффинного сорбента и десорбцию антител, отличающийся тем, что, с целью повышения аффиности антител и упрощения способа, используют иммобилизованый антиген с содержанием тиреоидного гормона, в 5 - 20 раз превышающим максимальную связывающую емкость антител в антисыворотке, промывку ведут раствором NaOH с рН 10,0 - 12,0, десорбцию осуществляют 15 - 50% -ным водным раствором ацетонитрила при рН 2,0 - 4,0.
Способ определения иммунных комплексов
Номер патента: 1464694
Опубликовано: 27.03.2000
Авторы: Гриценко, Кошецян, Морозова, Смирнов, Шажко
МПК: G01N 33/543
Метки: иммунных, комплексов
Способ определения иммунных комплексов, включающий получение иммуносорбента путем фиксации антигена или антитела на матрице, инкубацию иммуносорбента со специфическими антителами или антигенами с последующими удалением непрореагировавших компонентов и учетом результатов с помощью флуориметрии, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве матрицы используют частицы аэросила А-300 размером 4 - 40 нм, фиксацию осуществляют путем адсорбции в 0,1 - 0,05 М ацетатном буфере с рН 7,5 - 7,6, удаление неадсорбированных компонентов осуществляют забуференным физиологическим раствором с рН 7,5 - 7,6, содержащим 0,04 - 0,06% раствора твина-20.