Фаговый — Метка (original) (raw)

Патенты с меткой «фаговый»

Фаговый вектор к9 для конструирования геномных библиотек

Номер патента: 1650698

Опубликовано: 23.05.1991

Метки: библиотек, вектор, геномных, конструирования, фаговый

...0,7 о -нойлегкоплавкой агарозе (препарат А), ДН К фага ЛдЕЯ 7 гидролизуют рестриктазой Вав и"плечи" очищают гель-электрофореэом влегкоплавкой агарозе (препарат Б). Препа 35 раты А и Б в эквимолярных соотношенияхсмешивают и лигируют. Лигированную ДН Купаковывают в белки фага А 1 п и 1 тго и полученные фаговые частицы рассевают на газон клеток Е.соП; штаммЕ 392. Из шести40 бляшек наращивают фаг, выделяют ДНК ианализируют с помощью рестриктаз ЕсоВ 1,Вав 1 и Яаб. Один из фагов, названный ЯЯК 9,имеет ожидаемую структуру и используетсядля конструирования репрезентативных ге 45 номных библиотек,Применение МЯК 9. Фаг ЯЯК 9 удобен дляполучения репрезентативных геномныхбиблиотек по "классической" методике.ДНК фага МЯК 9 гидролизуют 10-кратными...

Фаговый вектор замещения к15 для конструирования библиотек структурных генов к днк

Номер патента: 1650699

Опубликовано: 23.05.1991

Авторы: Забаровский, Загорская, Киселев

МПК: C12N 15/63

Метки: библиотек, вектор, генов, днк, замещения, конструирования, структурных, фаговый

...липких концов и конструирование библиотек без применения метилаз, К кДНК 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 пришиваются линкерь; за 1 (или Х 1 а 1) без предварительной обработки метилазай. Г 1 аскольку рестриктаза зз 1 щепит эукариатическую ДНК редко (один участок узнавания на 50 т.п,н.) и преимущественно в регуляторных областях, которые не представлены в кДНК, то последующий гидролиз кДНК рестриктазой за 1 не приведет к существенному изменению размеров кДНК. После инактивации фермента проводят в соответствующей инкубационной среде частичную достройку липких концов ДНК фрагментом Кленова (или ревертазой) в присутствии г СТР и 0 ТТР. ДНК 15 К 15 гидрализуют рестриктазами Есой 1 и Вап 1 1 и затем проводят частичную достройку липких концов...