Генов — Метка (original) (raw)
Патенты с меткой «генов»
Вектор для клонирования генов, обеспечивающий регулируемую транскрипцию чужеродных генов, и способ его конструирования
Номер патента: 1275043
Опубликовано: 07.12.1986
Авторы: Баев, Семенова, Солонин, Таняшин
МПК: C12N 15/00
Метки: вектор, генов, клонирования, конструирования, обеспечивающий, регулируемую, транскрипцию, чужеродных
...в течение 10 мин во льду добавляют 50 мкл пан - креатической РНКазы (1 мг/мл), предварительно прогретой при 100 С в течение 5 мин, и 0,5 мл "лизирующей" смеси (0,3 мл 1 ОЕ тритон-Х, 7,5 мл М ЭДТА рН 8,0, 1,5 мл 1 М трис - НСЕ рН 8,0, 0,7 мл Н О). После инкубации2при постоянном помешивании стеклянной палочкой во льду в течение 10 мин получают осветленный лизат центрифугированием пробы в течение 1 ч при 17000 об/мин (КапегзЫ 2.). Полученный лизат разбавляют водой вдвое, обрабатывают равным объемом фенола, насыщенного 50 мМ тРис -НС 1, рН 8,0, при комнатной температуре в течение 10 мин, водную фазу собирают центриФугированием при 6000 об/мин. Остав - шийся в пробе Фенол удаляют эфирной экстракцией, а ДНК переосаждают 707. - ным спиртом.5...
Векторная плазмидная днк polya15, предназначенная для клонирования чужеродных генов в клетках еsснеriснiа coli и bacillus spp., и способ его конструирования
Номер патента: 1476896
Опубликовано: 23.09.1990
МПК: C12N 15/00
Метки: bacillus, polya15, spp, векторная, генов, днк, еsснеriснiа, клетках, клонирования, конструирования, плазмидная, предназначенная, чужеродных
...0 С. На следую- тов, Зля трансформации берут в рабощнй день О, мл Са ф -клеток смешиваютту 0,5 мл суспензин полученных прото"с 0,05 мп ДНК (10 мкг/мп), инкубируют пластов, смешивают с ДНК, растворен-.1 ч при температуре ОС и 5 мин ной в ЯММР буфере,н добавляют 1,5 мппри температуре 42 С и затем перено- полиэтиленгликоля (ПЭГ). После разсят в пробирку с 1,5 мп среды ЬВ. 1 О бавления в 5 мп БММР буфера клеткиПосле 2 ч инкубации в этой среде при центрифугируют и ресуспендируют в37 С со встряхиванием клетки высева мл ЯММР буфера. Через 1,5 ч суспенют на чашки с индикаторными (Ьас) зию высевают на чашки Петри со средойсредами, содержащими тетрациклин ДМЗ. Чашки инкубируют при температурео(15 мкг/мл). В качестве индикаторных 5 37 С в течение 2...
Способ отбора линий яровой пшеницы с комплексом генов адаптивности
Номер патента: 1604270
Опубликовано: 07.11.1990
Авторы: Коваль, Леонтьев, Шаманин
МПК: A01H 1/04
Метки: адаптивности, генов, комплексом, линий, отбора, пшеницы, яровой
...Р выделяюттолько короткостебельные растения,а в течение дальнейшего селекционного процесса из них выделяют наиболее урожайные и нерасщепляющиеся по мер АНК 11 - изогенная линия Новосибирской 67 по гену КМЗ). Полученные гибриды Рскрещивают между собой - Р (Саратовская 29 х Целинная 26) кх Р (Жигулевская кАНК 11). Во втором поколении сложного гибрида (Саратовская 29Целинная 26) х (Жигулевская х АНК 11)отбирают только карликовые растения и высевают их потомство по линиям в селекционном питомнике (СП) первого года, Расщепляющие линии выбраковывают, оставшиеся убирают и проводят браковку по урожайности оставляя наиболее продуктивные, которые пересевают в СП второго года. Лучшие линии из СП испытывают в контрольном питомнике и проводят...
Вектор pps-4-neo для введения и экспрессии генов в культивируемых соматических клетках млекопитающих
Номер патента: 1622395
Опубликовано: 23.01.1991
Авторы: Маркелов, Павлова, Прасолов, Фролова, Чумаков
МПК: C12N 15/00
Метки: pps-4-neo, введения, вектор, генов, клетках, культивируемых, млекопитающих, соматических, экспрессии
...расщопляют ЕсоК 1 и Ньпд 111, меньший Фрагмент, содержащий промотор БЧ 40, ген устойчивости к ампициллину и огдрВК 322 выделяют электроФорезом в легкоплавкой агарозе (1 ЛРА) нлигируют с большим Фрагментом плазмиды ИИТ ЧВНРР, расщепленной ЕсоК 1 и НпдП 1, обработанной фосфатазой и очищенной электрофорезом в 1,ИРА. Е результатеполучают плазмиду р 1, содержащую ген РНРК под контролем раннего промотора БЧ 40Получение плазмиды р 2. Нлазмиду р 1 расщепляют Рщ 11, дефосфорилируют с помощью фосфатазы из тимуса теленка (С 1 Р), очищают электроФорезом в 1.ИРА и лигируют синтетическим 8-членным ЕсоК 1 линкером. В результате получают плазмиду рЗ, содержащую слева от промотора БЧ 40 сайт ЕсоК 1.Получение плазмиды рЗ. Плазмиду р 2 расщепляют Нпд...
Вектор pps-5-neo для введения и экспрессии генов в культивируемых соматических клетках млекопитающих
Номер патента: 1622396
Опубликовано: 23.01.1991
Авторы: Маркелов, Павлова, Прасолов, Фролова, Чумаков
МПК: C12N 15/79
Метки: pps-5-neo, введения, вектор, генов, клетках, культивируемых, млекопитающих, соматических, экспрессии
...под контроль промоторацитомегалловируса. 20Конструирование ретронирусноговектора рРЯ-пео приницпиально состоит в следующем. В вектор рРБ-пеовводят сильный конститутивный промотор цитомегаллонируса с однонременной инактивацией одного иэ двух сайтов Ба 11 в полилинкерной области.Введение чужеродных генов в клетки млекопитающих с помощью векторарРБ-пео осуществляют в два этапа.1. ДНК, вектора рРБ-пео с встроенным н него геном внодят методомДНК-трансфекции в клетки, экспрессирующие структурные белки вируса лейкоза мьппей (клетки ( 2 или подобные).2. После селекции клеток, экспрессирующих ретронирусный конструкт, насреде с генетицином производят сборвирусоподобных частиц из среды культивирования клеток и заражают клетки, в которых...
Фаговый вектор замещения к15 для конструирования библиотек структурных генов к днк
Номер патента: 1650699
Опубликовано: 23.05.1991
Авторы: Забаровский, Загорская, Киселев
МПК: C12N 15/63
Метки: библиотек, вектор, генов, днк, замещения, конструирования, структурных, фаговый
...липких концов и конструирование библиотек без применения метилаз, К кДНК 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 пришиваются линкерь; за 1 (или Х 1 а 1) без предварительной обработки метилазай. Г 1 аскольку рестриктаза зз 1 щепит эукариатическую ДНК редко (один участок узнавания на 50 т.п,н.) и преимущественно в регуляторных областях, которые не представлены в кДНК, то последующий гидролиз кДНК рестриктазой за 1 не приведет к существенному изменению размеров кДНК. После инактивации фермента проводят в соответствующей инкубационной среде частичную достройку липких концов ДНК фрагментом Кленова (или ревертазой) в присутствии г СТР и 0 ТТР. ДНК 15 К 15 гидрализуют рестриктазами Есой 1 и Вап 1 1 и затем проводят частичную достройку липких концов...
Способ препаративной экспрессии генов в бесклеточной системе сопряженной транскрипциитрансляции
Номер патента: 1705302
Опубликовано: 15.01.1992
Авторы: Баранов, Морозов, Спирин
МПК: C07K 1/02, C12P 21/02
Метки: бесклеточной, генов, препаративной, системе, сопряженной, транскрипциитрансляции, экспрессии
...смесь вносят в резервуар, где и протекает процесс сопряженной транскрипции/трансляции, Для предотвращения остановки процесса из резервуара через полупроницаемую мембрану непрерывно отводят поодукты транскрипции (фосфата, АОР, 6 ОР, СОР, ООР) и трансляции (синтезированный полипептид, АМР, 6 ОР, фосфаты и пирофосфаты). Одновременно в резервуар подают алинокислоты, АТР, 6 ТР, СТР, ОТР для восстановления их исходной концентрации. Синтезированный полипептид собирают на колонке со специфическим сорбвнтом, а продукты транскрипции и трансляции собирают в специальном резервуаре для их последующей регенерации, Способ обеспечивает препаративную экспрессию генов в виде молекул ДНК в течение десятков часов с выходом синтезированного продукта...
Способ отбора линий мягкой пшеницы с комплексом аддитивно действующих генов адаптивности
Номер патента: 1704714
Опубликовано: 15.01.1992
МПК: A01H 1/04
Метки: адаптивности, аддитивно, генов, действующих, комплексом, линий, мягкой, отбора, пшеницы
...что безлистность растений, определяемая мутантным рецессивным геном, резко снижает адаптивность линий пшеницы и может быть использована в качестве генетического "магнита" для объединения генов адаптивности, Линия с рецессивным полулетзлем безлистности находится на грани между способностью расти и гибелью. Выживают лишь те линии, в генотипе которых окажется наибольшее количество аддитивно действующих генов адаптивности, компенсирующих вредное действие полулетального гена безлистности растений. Наиболее урожайная линия обладает максимальным комплексом аддитивно действующих генов адаптивности.Пример осуществления способа.Подбирают три сорта мягкой пшеницы с устойчивостью к различным неблагоприятным факторам внешней среды (жаро-,...
Способ оценки влияния генов на устойчивость растений к стрессовым воздействиям
Номер патента: 1718757
Опубликовано: 15.03.1992
Автор: Шаманин
МПК: A01H 1/04
Метки: влияния, воздействиям, генов, оценки, растений, стрессовым, устойчивость
...создают изогенные линии по генам, контролирующим определенные признаки растений - высоту, окраску, опущение, устойчивость к болезням и т,п, Например, на базе сорта яровой пшеницы Новосибирская 67 создано 23 изогенных линии. Испытывая эти линии совместно с исходным сортомна 2 фонах - со стрессовым воздействием сблонец, засуха, кислые почвы и т,п,) и без воздействия стрессового фактора, определяют степень снижения урожайности (в процентах) исходного сорта и иэогенных линий от воздействия стрессового фактора, т.е, стрессоустойчивость (солезасухоустойчивость и т,п.). Затем от показателя стрессоустойчивости изогенной линии отнимают аналогичный показатель исходного сорта и получаютданные о степени воздействия конкретного гена на устойчивость к...
Способ переноса генов в растения, штамм бактерий agrobacterium tumefaciens для переноса генов в растения и рекомбинантная векторная плазмидная днк рак 320 neo для переноса генов в растения
Номер патента: 1427833
Опубликовано: 15.03.1994
Авторы: Андрианов, Калиев, Пирузян
МПК: C12N 1/21, C12N 15/84
Метки: agrobacterium, tumefaciens, бактерий, векторная, генов, днк, переноса, плазмидная, рак, растения, рекомбинантная, штамм
1. Способ переноса генов в растения с помощью плазмид Agrobacterium, включающий инфицирование растений бактериями, несущими две плазмиды, одна из которых - мутантная неонкогенная Ti-плазмида A. tumefaciens, индуцирующая перенос в растительные клетки мутантной неонкогенной Ti - T - ДНК, не вызывающая опухолевой пролиферации клеток растений, а другая -Ri-плазмида дикого типа A. rhizogenes, вызывающая у чувствительных растений фотогормоннезависимую пролиферацию корней, состоящих только из генетически однородных трансформированных растительных клеток, включивших в геном Ri - T - ДНК, получение трансформированных генетически однородных клеток растений, включивших в геном одновременно Ri - T - ДНК и мутантную Ti - T - ДНК, регенерацию из...
Рекомбинантная плазмидная днк pvh64, предназначенная для картирования генов вируса осповакцины штамма ливп и для направленной встройки чужеродной информации в геном вируса осповакцины, и способ его конструирования
Номер патента: 1628528
Опубликовано: 15.07.1994
Авторы: Малыгин, Микрюков, Попова, Рязанкина, Ставицкий, Щелкунов
МПК: C12N 15/39
Метки: pvh64, вируса, встройки, генов, геном, днк, информации, картирования, конструирования, ливп, направленной, осповакцины, плазмидная, предназначенная, рекомбинантная, чужеродной, штамма
...которого расположена, по-видимому, в Нпб И-О- и Н 1 пб И 1-Е-фрагментах.П р и м е р 3. Использование рекомби нантной плаэмиды рЧН 64, содержащейНпс И 1-Р-фрагменты ДНК ВОВ, в качестве векторов для направленной встройки чужеродной генетической информации в вирусный геном, демонстрируют следующим 10 образом.При анализе нуклеотидной последовательности Нпб 1 И-Р-фрагмента обнаружен один сайт для рестриктаэы ВавН 1, находящийся почти в середине фрагмента в гене 15 белка 36 К. Он может быть использован длявстройки чужеродных фрагментов ДНК. Для того чтобы этот сайт стал уникальным в рекомбинантной плазмиде, Нпс И 1-Р-фрагмент с помощью стандартных процедур 20 переклонируют по Нпс И 1-сайту в плазмидурВО, которая представляет собой плазмиду рВВ...
Вектор pgdp3 для экспрессии чужеродных генов в клетках
Номер патента: 1264578
Опубликовано: 30.12.1994
Авторы: Долганов, Кафиани, Свердлов
МПК: C12N 15/70
Метки: pgdp3, вектор, генов, клетках, чужеродных, экспрессии
ВЕКТОР PGDP3 ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ЧУЖЕРОДНЫХ ГЕНОВ В КЛЕТКАХEscherichia coli характеризуется следующими признаками: имеет длину около 4,6 тыс. п.о.; состоит из линейной формы векторной плазмиды pBRH4, фрагмента RFI ДНК фага размером 230 п.о., содержащего регуляторную область гена D и присоединенного к EcoRI-сайту плазмиды pBRH4;содержит в качестве генетических маркеров гены Apr и Tcr; сайты расщепления эндонуклеазами рестрикции, расположенные на следующих расстояниях от EcoRI-сайта: EcoRV 160 п.о. вправо, BamHI 350 п.о. вправо, Sal I 626 п.о. вправо, Bal I 1419 п.о. вправо, Pvu II 2041 п.о. вправо, Pst I 3584 п.о. вправо, сайты узнавания другими эндонуклеазами рестрикции, расположенные на следующих расстояниях от...