Мusсulus — Метка (original) (raw)

Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к поверхости эндотелиальных клеток пупочной вены человка

Номер патента: 1362746

Опубликовано: 30.12.1987

Авторы: Гончаров, Данилов, Домогатский, Мартынов, Попов, Рудин

Метки: антител, вены, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мыши, поверхости, пупочной, человка, штамм, эндотелиальных

...антителна 3-4-й день культивирования зависитот посевной дозы и варьирует в диапазоне ат 1 до 10 мкг/мл культуральнойсреды и 10 мг/мл асцитической жидкости. Концентрацию антител определяютиммуноферментным методом.Стабильная продукция антител сохраняется до 20-го пассажа п чдго,Контаминация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительномнаблюдении и при посевах на питательные среды, Заражение микоплазмой невыявлено при окрашивании красителямина ДНК,Криаконсервирование.Клетки штамма кансервируют па 1 хх 10 клеток/мл коровьей сыворотки сдобавлением 10% диметилсульфоксида впластиковых ампулах, Замораживаниеампул проводят в коробке из вспененного полистирола с толщиной стенок1 см. Коробку с ампулами оставляютпри - 70 С и через...

Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к урокиназе человека

Номер патента: 1381158

Опубликовано: 15.03.1988

Авторы: Домогатский, Кратасюк, Рохлин, Синицын, Смирнов, Якубов

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мыши, урокиназе, человека, штамм

...в жидком азоте. Размораживают быстро при 37 С. Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 70-807Использование штамма 1 ИС иллюстри. руется следующими примерамиП р и м е р 1. Клетки штамма Е 1 С помещают в пластиковый флакон объемом 75 см по 5 10 клеток в 5 мл5среды КРМ 1-1640 с 107 эмбриональной телячьей сыворотки,107 лошадиной сывороткй, 4 мМ 1,-глутамина, 100 ед/мл пенициллина, 00 мкг/мл стрептомицина, 1 О мМ пирувата натрия, 0,057.меркаптозтанола при 37 С в атмосфена, 100 ед/мл пенициллина, 00 мкг//мл стрептомицина, 10 мМ пируватанатрия, 0,053 меркаптоэтанола приО37 С в атмосфере 57 СО. Посевнаядоза - О клеток в 1 млКлетки пассируют раз в 3-4 дня.Кратность рассева 1:10. Культура суспензионная. Клетки штамма инъециру...

Штамм гибридных культивируемых клеток мыши мus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к урокиназе человека

Номер патента: 1384614

Опубликовано: 30.03.1988

Авторы: Домогатский, Кратасюк, Рохлин, Синицын, Смирнов, Якубов

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

...Фермента, взаимодействуют с егодвумя молекулярными Формами.Криоконсервирование клеток штамма.2 10 клеток консервируют в 1 млтелячьей эмбриональной сыворотки сдобавлением 10 Х диметилсульфоксидав пластиковых ампулах, Замораживаниеведут по следующей схеме; снижаюто отемпературу до 4 С, а затем по 1 Св мин до -40 С. Клетки хранят в жидком азоте. Размораживают быстро при37 С. Жизнеспособность клеток послеоразмораживания составляет 70-80 Х.Использование штамма 01 С иллюстрируется следующими примерами..П р и м е р 1. Клетки штамма П 1 Спомещают в пластиковый флакон объемом 75 см по 5" 10 клеток в 5 млсреды КРМ 1-1640 с 107. эмбриональнойтелячьей сыворотки, 107, лошадинойсыворотки, 4 мМ Е-глутамина, 100 ед/1384614 Культуральная среда...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus для получения моноклональных антител к щелочной фосфатазе из кишечника теленка

Номер патента: 1395668

Опубликовано: 15.05.1988

Авторы: Мечетнер, Фаерман, Червонский

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, кишечника, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, теленка, фосфатазе, штамм, щелочной

...инактивируя активный центр,Использование штамма МАМиллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клетки помещают в пластиковые флаконы плоплощадью 25 см по 5 х 10 клеток, в5 мл среды ДМЕМ с 10 .-ной эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мм глутамина, 100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/млпенициллина. Клетки культивируют4 дня при 37 С в атмосфере, содержащей 5% СО, Культуральную среду собирают, центрифугируют 10 мин при800 об,/мин при 4 С. К полученномусупернатанту добавляют Щф из кишечника теленка до конечной концентрации 10 мкг/мл. Полученную смесь используют в качестве ШФАЩФ-реагентадля иммуноферментного анализа,Пластиковые планшеты для микротитрования покрывают очищенным в иммуноаффинной хроматографии альфа-фетопротеином...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных мus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к митохондриальной креатинфосфокиназе человека

Номер патента: 1413132

Опубликовано: 30.07.1988

Авторы: Балмуханов, Хучуа

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, креатинфосфокиназе, культивируемых, мusсulus, митохондриальной, моноклональных, человека, штамм

...кратность рассева 1:5. Культура суспензионная, Клетки культивируют при37 С в атмосфере 5 СО . Дпя выращивания опухоли пригодны мь 1 ши линииВА 1.В/С, которым не менее чем эа тридня до инъекции штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Штамм6вводят внутрибрюшинно по 31 О клеток на мышь в 1 мл среды КРМ 1-1640.Лсцитная опухоль развивается через15-20 дней,Продуктивность штамма.Секреция МКА на третий день культивирования составляет 50 мкг/млсреды. Содержание МКА в асцитической жидкости 5-10 мг/мл. Стабильнаяпродукция антител сохраняется до 1пассажей 1 п ч 1 ЙГО,(Характеристика полезного продукта.МКА относятся к классу 1 Я О 1, ониспецифически связываются с КФКмит,Контаминация.Бактерии и грибы не обнаруженыпри длительном наблюдении в...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к са атфазе саркоплазматического ретикулума сердца собаки

Номер патента: 1414870

Опубликовано: 07.08.1988

Авторы: Левицкий, Логинов, Попович, Рохлин, Сырбу, Черепахин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, атфазе, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, ретикулума, саркоплазматического, сердца, собаки, штамм

...СССР под номером ВСКК(П) 960 и характеризуется следующими признакамиКультуральные признаки, Стандартные условия культивирования - сердца КРМ 1-1640 с 10% донорской телячьейсыворотки, 4 мМ Ь-глутамина 100 мкг/мл канамицина, 0,05 мМ меркаптоэтанола при 37 С в атмосфере 53 СОуДля выращивания штамма используют пластиковую посуду; посевная доза 100 тыс. клеток на 1 мл, клетки пассируют один раз в 3-4 дня, кратность рассева 1:10, Культура суспензионная.Культивирование в организме животных. Для выращивания асцита пригодны мьппи ВАЬВ/с. Мьппам эа 7-15 дн до инъекции клеток штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по61-Зх 10 клеток в 1 мл среды Игла. Асцит формируется через 12-14 дней,Продуктивность...

Штамм гидридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к дифференцировочному антигену в-лимфоцитов человека

Номер патента: 1420020

Опубликовано: 30.08.1988

Авторы: Ветрова, Сидоренко

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, в-лимфоцитов, гидридных, дифференцировочному, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...действии ингибитора ИаГ.Культуральные признаки.Среда культивирования - средаКРМ 1-1640 с 107-ной донорской телячьей сыворотки, 4 мМ Ь-глутамина,100 мкг/мл гентамицина при 37 С и ватмосфере 57. СО. Для выращиванияштажа используют пластиковую илистеклянную посуду, посевная доза -100 тыс. кл/мл, клетки пассируютодин раз в 3-4 дня, кратность рассева - 1:10. Культура суспензионная.Для выращивания асцита используютмышей линии ВАЬВ/с, Мьппам за 730 дней до инъекции клеток штаммавводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана. Клетки иньецируют внутрибрюшинно по 2 - 5 х 10 клеток в 5 мл сре 6цы Игла, Асцит Формируется через12-14 дней.Продуктивность штамма.Секреция МКА на 3 - 4 день культиви рования п чго составляет 15-20 мкг/мл культуральной среды...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к пероксидазе хрена

Номер патента: 1433977

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Денисова, Желудов, Климович, Пашкова, Самойлович, Сирота

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, пероксидазе, хрена, штамм

...условия культивирования штамма следующие; температура 37 С, воздушная атмосфера при выращивании клеток в герметично закрытых флаконах или атмосфера с 7,57 СО в5 воздухе со 1007-ной влажностью при выращивании в открытой системе. Питательной средой служит смесь среды Игла в оригинальной прописи или в модификации Дульбекко (903) и сыворотки крупного рогатого скота (107).Культура представляет собой взвесь одиночных клеток или рыхлых агрегатов по 4-16 и более клеток, легко раэъединяющихся при встряхивании. Оптимальная посевная доза - 2 х 105 клеток в 1 мп среды. Для поддержания культуры в пролиферирующем состоянии клетки рассевают 2 раза в неделю с коэффициентом 1:2 - 1:4. Максимальная плотность культуры с сохранением6...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к кератину n17 человека

Номер патента: 1433979

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Банников, Гельштейн, Крутовских, Трояновский, Чипышева

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, кератину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...число хромосом - 51.Характеристика полезного продукта.МКА относятся к классу 1 яС 2 Ь(Н).В реакции иммуноблоттинга с кератинами из культуры клеток НеЬа и срезов органов человека МКА реагируютодной полосой с кератином м.м. 46 К 0(й. 17),Контаминация.ьактерии и грибы в культуре придлительном наблюдении и посевах напитательные среды не обнаружены.Криоконсервирование. Клетки штамма ресуспендируют в эмбриональнойтелячьей сыворотке, содержащей 107.диметилсульфоксида в концентрации61-Зх 10 клеток в 1 мл, разливают в стерильные пластиковые ампулы при 4 Си замораживают в жидком азоте по программе со снижением температуры нао1 С в минуту с последующим переносомв жидкий азот, Размораживание: 1 минпри 37 С.Клетки разводят в 5-10 млполной среды,...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к рекомбинантному интерлейкину-2 человека

Номер патента: 1437393

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерлейкину-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рекомбинантному, человека, штамм

...не пассируетсяболее одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питатель.ные среды. Заражение микоплаэмой невыявлено при окрашивании красителямина ДК Н и по характеру включения тимидиновой метки,Криоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьейсыворотке с добавлением 107 диметилсульфоксида. Режим заморажния: 1 С/минОдо -70 С. После замораживания клеткипереносят в жидкий азот. Размораживание - на водяной бане при 37 С.Жизнеспособность клеток после размораживания 70-807. по окрашиванию трипановым синим.Использование штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клеткипомещают в стеклянный флакон объемом50...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus l., используемый для получения моноклональных антител к цепям иммуноглобулинов человека и обезьян

Номер патента: 1442545

Опубликовано: 07.12.1988

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Оганян, Размадзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулинов, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, цепям, человека, штамм

...иммуноферментным методом, Стабильная продукция антител сохраняется в течение 10 пассажей п ч.тго.50Характеристика полезного продукта. МКА относятся к классу 1 я 62 а, они взаимодействуют с общей "приматовой" детерминантой % -цепи иммуноглобулинов человека и обезьян. МКА преципитируют иммуноглобулины человека в присутствии ПЭГ(реакции встречной и радиальной иммунодиффузии). Контаминация, Контаминация бактериями, грибами и микоплазмой не обнаружена.бКриоконсервирование 5-6 10 клеток замораживают по программе в жидком азоте. Среда консервирования - эмбриональная телячья сыворотка и диметилсульфоксид. Жизнеспособность клеток после размораживания 90%,П р и м е р 1. Навески иммуноглобулинов 18 С, 18 А и 18 М в количестве 15 мкг на...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к мембранному белку еsснеriснiа coli в препарате рекомбинантного интерлейкина-2 человека

Номер патента: 1446154

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Войтенок, Осипович, Панютич, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ).Продукция МКА сохраняется как ми) нимум до 10 пассажей п ч 11 о, В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре .:не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на пита" тельные среды. Заражение микоплазмой не выявлено по характеру включения тимидиновой меткиКриоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыво" ротке с добавлением 10 диметилсульфо оксида. Режим замораживания: 1 С в 1 мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот, Раэморажйвание - на водяной бале при +3 С. Жизнеспособность клеток послеоразмораживания 70-80 , по окрашиванию трипановым синим,П р...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к гемагглютинину вируса гриппа а краснодар 10159(н n )

Номер патента: 1446156

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Агеева, Анджапаридзе, Кузнецова, Кусельтан, Нагиева, Никулина, Эткинд

МПК: C12N 5/00

Метки: 10159(н, антител, вируса, гемагглютинину, гибридных, гриппа, животных, используемый, клеток, краснодар, культивируемых, мusсulus, моноклональных, штамм

...с помощью твердофазного варианта иммуноферментного анализа (ИФА), Антигены вирусов гриппа А для ИФА готовят путем инфицирования клеток почки собак (линия МДСК). В качестве контрольного антигена служат аналогичным образом приготовленные неинфицирован ные клетки МДСК. Антителопродуцирую" щие клоны гибридных клеток выращивают в пластиковых Флаконах площадью20 31446125 см со слоем - кормилкой из спленоцитов и после накопления клеток вдостаточном количестве (сплошное покрытие ростовой поверхности Флакона)проводят оценку МКА в культуральныхжидкостях (кж) на активность и специ-фичность. По данным проведенного исследования осуществляют выбор клоновдля их накопления в массовой культуре и криоконсервацииВ результате слияния получают коллекцию...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к мембранному белку еsснеriснiа coli в препарате рекомбинантного интерлейкина-2 человека

Номер патента: 1446157

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

...в препарате РИЛчеловека, Методы оценки сохранения специфичности: тест на связыва" ние МКА с иммобилизованным частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ), Продукция МКА сохраняется как минимум до 10 пассажей 1 п чдС- то. В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза,Контаминация. Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплаэмой не выявлено по характеру включения тимидиновой метки.. Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10 диметилсульфоксида, Режим замораживания;1 С в 1 мин до -70 С, После замораживания клетки переносят в жидкий . азот, Размораживание - на водяной...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных мus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к j g человека и высших обезьян

Номер патента: 1454850

Опубликовано: 30.01.1989

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Оганян, Размадзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, высших, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, человека, штамм

...около 10 мг/мл.Титры МКА при определении с помощьютвердофазного иммуноферментного метода: 210 (культуральная среда) и10 (асцит) при концентрации антигена 1 мкг/мл. Продукция МКА стабильна, по крайней мере, в течение 10пассажей п ч 1.го. Характеристика полезногопродукта;МКА относятся кклассу 1 яСд , они направлены противкласс-специФической детерминанты константного региона тяжелых цепей 18 Счеловека и высших обезьян; специфичность оценивается иммуноферментным,радиоиммунологическим и модифицированными иммунодиффузионными методами.МКА преципитируют 1 яС человека и высших обезьян в присутствии ПЭГ(реакция встречной и радиальной иммунодиффузии). Контаминация. Бактерии,грибы и микоплазмы отсутствуют. Родительская линия Х 63-Ая.8.653...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к легумину бобовых

Номер патента: 1458384

Опубликовано: 15.02.1989

Авторы: Буларгина, Венгеров, Свешников, Северин, Фуралев

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, бобовых, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, легумину, мusсulus, моноклональных, штамм

...жидкостей и ".1 О для асцитных жидкостей, концентрация моноклональных антител н культуре "100 мкг/мл, в асцитной жидкости -около 5-6 мг/мл.тамм продуцирует МКА в течение60 пассажей в культуре и 25 на животных,Характеристика полезного продукта,МКА относятся к классу Тдб, Ониспецифически реагируют с легумином(С-концевой частью субъединицы, локализованной на кислых полипептидахлегумина).Контаминация, Бактерии, грибы,дрожжи и микоплаэмы не обнаружены.Криоконсернирование.Культуральная среда с 30% эмбриональной сыворотки коровы и 10% диметилсульфоксида (криопротектор),ампулы с клетками охлаждают до -70 С 5 О 15 20 25 ЗО 35 40 45 50 со скоростью 1 град/мин, ампулы хранят при температуре жидкого азота, размораживание осуществляют,...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к липополисахариду еsснеriснiа coli

Номер патента: 1472497

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, используемый, клеток, культивируемых, липополисахариду, мusсulus, моноклональных, штамм

...клетки пассировали один раз в 2-3 дня, кратностьрассева - 1:б - 1:8. Культура суспенэионная,Культивирование в организме животных. Для выращивания асцита пригоднымыши Ва 1 в/с. Мышам эа 7-30 дней доинъекции клетокштамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по 2-5 х 10 клеток в 1 мл среды 1 МДМ. Асцит формируется через 12-14 дней.Продуктивность штамма.Секреция моноклонального антитела(МкАТ) на 2-3 день культивированиясоставляет 40-45 мкг в 1 мл культуральной среды и 15-20 мг в 1 мл асцитной жидкости при определении иммуноферментным методом.Характеристика полученного продукта. Штамм продуцирует моноклональноеантитело с изотипом 1 Ы. Специфичность - антиген Е.со 1 небелковойприроды,.содержащийся в...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к интерлейкину-2 человека

Номер патента: 1472498

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Беляев, Казенных, Лунев, Несмеянов, Овчинников

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерлейкину-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...по 0,5 мл пристана. Осцит образуется через 10-14 дней после введения 2-5 млн. клеток,Продуктивность штамма,Концентрация специфических иммуно.глобулинов в культуральной жидкостиболее 75 мкг/мл, в асцитной жидкости 5-10 мг/мл.Характеристика полученного продукта, Штамм продуцирует иммуноглобулин О субкласса 1, В твердофазномиммуноферментном анализе антителавзаимодействуют с препаратами 1 Ь 2из линии 1 г 1 аС и рекомбинантного1 Ь 2.Стабильность продуцирования ан тител сохраняется на протяжении 25пассажей в культуре.Криоконсервирование.Среда для замораживания - 90 . ЗТС,10 . ДМСО. Плотность клеток 1-510 ь кл/мл. Ампулы с клетками в пенопластовой коробке выдерживают прио-70 С в течение 1 дня и переносят вдюары с жидким азотом. Режим...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к интерлейкину-2 человека

Номер патента: 1472499

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Беляев, Казенных, Лунев, Михалева, Несмеянов, Овчинников, Оноприенко, Циманис

МПК: C12N 5/00

...и вносят в лунку по 100 мкл препарата, содержащего антитела, После инкубации в течение одного часа при 37 С плашки отмывают ФСБТ и обрабатывают раствором антител к иммуноглобулинам мыши, конъюгированных с пероксидазой хрена (100 мкл на лунку, разведение 1:1000, 15 1 ч 37 С). Плашку еще раз отмывают и вносят 100 мкл раствора ортб-фенилендиамина (1 мг/мл) в 1%-ном цитратном буфере (рН 4,5), содержащем 0,05 НО. Реакцию останавливают через 15 мин добавлением 100 мкл на лунку раствора 2 М серной кислоты, Отрицательным контролем служат лунки плашки, не содержащие 1 Ь 2, а также лунки, в которые вместо антител к 1 Ь 2 25 вносят нормальный иммуноглобулин мыши.П р и м е р 2. Получение и очистка моноклональных антител.Получение и очистка...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus продуцент моноклональных антител к гемагглютинину вируса гриппа аленинград38580 (h3n2)

Номер патента: 1479510

Опубликовано: 15.05.1989

Авторы: Криворутченко, Кривошеин, Попов, Червонский

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: h3n2, аленинград38580, антител, вируса, гемагглютинину, гибридных, гриппа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...в качестве конкурирующего агентаИспользование штамма АН-РСКНЯ иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Моноклональные антитела используют в иммуноферментном анализе, Для этого полихлорниниловые 96-луцочные платы покрывают препа 1ратом гемагглютинина вируса гриппа А(Ленинград)385/80 (НЗМ 2) или вирусными концентратами в забуференномфосфатами изотоническом растворе натрия хлорида (ЗФР) в концентрации30 мкг/мл по 50 мкл на лунку, Спустя8 ч, лунки промывают в трех сменахЗФР н течение 10 мин, В дальнейшемотмывают аналогично, Инкубируют вездепри комнатной температуре. Свободные валентности платы насыщают в течениеодного часа 17-ньгм раствором человеческого сывороточного альбумина в ЗФР, после чего лунки отмывают и добавляют...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus продуцент моноклональных антител к тяжелым -цепям иммуноглобулина человека

Номер патента: 1493668

Опубликовано: 15.07.1989

Авторы: Арсеньева, Богачева, Ибрагимов, Лабазина, Рохлин, Черепахин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулина, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тяжелым, цепям, человека, штамм

...антигенов используют иммуноглобулины человека, иммобилиэованные на пластике (твердофазный радиоиммунный или иммуноферментный анализ).Иммунохимические свойства МАТ 9 С 11 В 8-1. Для получения препарата МАТ в количестве, необходимом для проведения всех иммунохимических исследований, гибридомные клетки штамма-продуцента помещают в пластиковый флакон площадью 25 кв. см,%2 х 10 клеток в 5 мл среды КРМ 1-1640 с 10/ эмбриональной телячьей сывороткой, 4 мМ глютамина, 100 мкг-мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 0,05 мМ меркаптоэтанола. Клетки куль" тивируют 2-3 дня при 37 С в атмосфере 5/-ного СО. Полученный супернаТаким образом, приведенные примеры четко демонстрируют абсолютную специфичность ИЛТ 9 С 11 В 8-1, относящегося к 18 С...

Штамм культивируемых клеток животных mus мusсulus продуцент ростстимулирующих факторов гибридом

Номер патента: 1495374

Опубликовано: 23.07.1989

Авторы: Арцыбашева, Березкина, Игнатова, Кожухарова, Плескач, Тарунина

МПК: C12N 5/00

Метки: гибридом, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, продуцент, ростстимулирующих, факторов, штамм

...кондиционированные клетками ЬеЬг 1/1-БГ, сохраняют полную ростстимулирующую активность по крайней мере в течение 3 мес храненияОпри - 20 С. Признак продукции фактора стабильно воспроизводится в течение более чем 100 генераций, Рост- стимулирующие факторы обнаруживают в культуральной среде. Концентрация общего белка через 2-3 сут в кондиционированной среде составляет 2-, 5 мкг/мл.Ростстимулирующую активность определяют в тестах: стимуляция включения Н-тимидина в стационарной культуре минимально трансформированных клеток И 1 Н ЗТЗ; индукция клонирования минимально трансформированных клеток МВК в среде с агаром; стимуляция размножения массовых культур гибридомнык клеток в среде с пониженным содержанием сыворотки крови и увеличение...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus продуцент моноклональных антител к са м зависимой эндонуклеазе клеточных ядер лимфоцитов селезенки человека

Номер патента: 1497213

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Волгин, Волгина, Вотрин, Певницкий, Ходарев

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, зависимой, клеток, клеточных, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, селезенки, человека, штамм, эндонуклеазе, ядер

...скота,Для выращивания штамма используютстеклянную или пластиковую посуду,Во Флакон объемом 25 см в 5 мл средывносят 2 10 -10 клеток РИ, Пассажи б1 раз в 3-4 дня той же дозой клеток.Кратность рассева 1:4.Культивирование в организме животного.Для выращивания опухоли из штаммапригодны мыши линии ВАЬВ/с. Свежиммьппам за 7-30 (оптимально 14) днейдо инъекции штамма вводят внутрибрюшинно 0 5 мл пристана, Штамм инъециЭ6руют внутрибрюшинно по 3,2 х 10 клеток на мышь в 1 мл среды Игла. Асцитическую жидкость собирают по мерепоявления (на 10-15 день). Из асциташтамм перевивают на свежих мышей по1-5 х 10 клеток на мышь, 4-6 пассажей, 14972136Продуктивность штамма,Секреция монАТ на 4-й день культивирования 10-20 мкг в 1 мл среды и1-2 мг в 1 мл...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus продуцент моноклональных антител к са mg зависимой эндонуклеазе клеточных ядер лимфоцитов селезенки человека

Номер патента: 1497214

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Волгин, Волгина, Вотрин, Певницкий, Ходарев

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

...иммунизации - 13 позитивных клонов из 200 первичных культур, Бсе стабильные позитивные линииклонированы и заморожены в жидкомазоте. Клон РЯ клонирован еще 5 раз.Для наработки антител клон Ы культивируют в условиях хп ч 1 чо в видеасцитной жидкости в брюшной полостисингенных мышей,Штамм депонирован под номеромВСКК (П) Р 117 Д и характеризуетсяследующими признаками.Культуральные признаки,Стандартные условия культивирования, Среда для культивирования - среда Дульбеко с добавлением 107. телячьей эмбриональной сыворотки., 4 ммЬ-глутамина. 80 мкг/мл гентамицинаОУ37 С. 57. СО, 967. влажности. Допустимо использование среды Игла.с добавлением 157 сыворотки крупного рогатого скота.Для выращивания штамма используютстеклянную или пластиковую...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к дифференцировочному антигену в-лимфоцитов человека

Номер патента: 1389284

Опубликовано: 30.07.1989

Авторы: Ветрова, Сидоренко

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, в-лимфоцитов, гибридных, дифференцировочному, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...отношением, базофильной цитоплазмойФ грубой структурой хроматина. 84 4Культурдльлые призндки. Среда культивирования - среда КРАПб 40 или МЕМв модиФикации Дальбекко с 102 эмбриональной телячьей сыворотки, мК,-глутамина, 100 мгк/мл гентамицина при37 С в атмосфере 57, СО , оптимум рН2 зб, 8-7, 5.При росте на пластике клетки образуют плотный монослой, К стеклу клетки прикрепляются слабо и в стеклянных Флаконах ра.стут как в монослое,так и в суспензии. Посевная доза клеток 100 тыс,кл/мл, клетки пассируютодин раз в 3-4 дня, кратность рассева 1:7.Культивирование в организме животпьгл. Для получения асцита пригоднылишь мыши ВЛ 1.В/с. Мышам за 7-30 днейдо инъекции клеток штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана....

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus продуцент моноклонального антитела к фактору некроза опухолей-альфа человека

Номер патента: 1507791

Опубликовано: 15.09.1989

Авторы: Войтенок, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панютич, Турецкая, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, некроза, опухолей-альфа, продуцент, фактору, человека, штамм

...Для длительного хранения клетки штамма замораживаат в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Режим замораживания: 1 С/мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот. Размораживание на водяоной бане при 37 С. Жизнеспособность клеток после размораживания 55-60% по окрашиванию трипановым синим.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре. не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и по характеру включения тимидиновой метки.П р и м е р 1, Тест на определение специфичности взаимодействия мои АТ с антигенами, иммобилизованными на пластине Р ФНО-с, Р ФНО- и БСА. в количестве...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к липопротеидам низкой плотности плазмы крови человека

Номер патента: 1513030

Опубликовано: 07.10.1989

Авторы: Адамова, Власик, Ковалева, Покровский, Трахт, Янушевская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, крови, культивируемых, липопротеидам, мusсulus, моноклональных, низкой, плазмы, плотности, человека, штамм

...штамм обозначен как .А-ЬВЕР 8, депонированв Банке клеточных культур Институтацитологии под номером ВСКК (11)Ф 1790 и характеризуется следующимипризнаками, 20.Стандартные условия культивирования - среда КРМ 1-1640 с добавлением10% телячьей эмбриональной сывороткии 10% лошадиной сыворотки, 4 мкМЕ-глютамина, 10 мкМ пирувата натрия,100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/млстрептомицина,аминокислоты для базальной среды Игла, витамины для среды Игла и 0,05 меркаптоэтанола, при37 С в атмосфере 5%-ной углекислоты,Для выращивания используют пластиковую посуду,Посевная доза 10 клеток в 1 мл.Клетки пассируют один раз в 3-4 дня.Кратность рассева 1:10, Культура полуприкрепленная. Культивирование ворганизме животных. Для выращиваниягибридомы в...

Штамм культивируемых гибридных клеток животных мus мusсulus х мusтеlа vison продуцент многоканальных иммуноглобулинов класса j g норки

Номер патента: 1521772

Опубликовано: 15.11.1989

Авторы: Баранов, Галахарь, Дьяченко, Таранин, Уфимцева

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: vison, гибридных, животных, иммуноглобулинов, класса, клеток, культивируемых, мusсulus, мusтеlа, многоканальных, норки, продуцент, штамм

...пред 45варительно иммунизированной суммарным 18 норки. В гибридизацию бралиВ-лимфоциты (10 ) селезенки норки.натретий день после последней инъекцииантигена (18 норки).50 Гибридизацию В-лимфоцитов норки иклеток миеломы мыши ИБО лри соотношении 10:1 соответственно проводят встандартной среде ДЕМЕ без сыворотки,с добавлением полиэтиленгликоля(М.в. 1500). После обработки в течение 3 мин полиэтиленгликолем клеткиосаждают центрифугированием при800 об/мин и суспендируют в средеДЕМЕ с добавлением 157 эмбриональнойсыворотки крупного рогатого скота,2 мМ глютамина, 19 мМ пирувате натрия, 4 10 аминоптерина, 10 гипоксантина, 16 10 М тимидина и антибиотиков. Суспензию (10 клеток в6мл среды) разливают по 0,1 мл в 96 луночные пластиковые плато и...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus продуцент моноклонального антитела, нейтрализующего биологическую активность человеческого фактора некроза опухолей-альфа

Номер патента: 1521776

Опубликовано: 15.11.1989

Авторы: Войтенок, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панютич, Турецкая, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: A61K 39/395, C12N 15/00

Метки: активность, антитела, биологическую, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, нейтрализующего, некроза, опухолей-альфа, продуцент, фактора, человеческого, штамм

...кроличьими антимьшгиными антителами. Все отмывкипроводят бидистиллированной водой.Контролем служит бычий сывороточныйальбумкц в качестве антигена.Стабильность продукции. ПродукцияьанАТ сохраняется как минимум до 15пассажей 1 п ч 7.сто, Б асцитной формештамм не пассировался более одногораза,Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Режим замораживания: 1 С/миндо минус -70 С. После замораживанияклетки переносят в жидкий азот, Разморая(иванне на водяной бане при 37 С,Жизнеспособность клеток после размораживания 60-70% по Окрашиванию три"пановым синим,П р и м е р 1, Гибридамцые клеткипомеШаот в стеклянный Флакон объемомГ50 мл по...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных -mus мusсulus -продуцент моноклональных антител к возбудителю амиотрофического лейкоспонгиоза

Номер патента: 1527257

Опубликовано: 07.12.1989

Авторы: Вотяков, Коломиец, Куницкая, Лучко, Малахова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: амиотрофического, антител, возбудителю, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лейкоспонгиоза, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...мьппи в среднем получают 3,0 мл асцитической жидкости. Асцитическую жидкость осветляют путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение10 мин. 18 С осаждают сульфатом аммония (ЭОХ насыщения) и чистят путем аффинной хроматографии. Штамм АЛМАна мышах не перевивается.Характеристика продукта.Класс продуцируемых иммуноглобу 50 линов - Тф 2 а. Продуцируемые антитела охарактеризованы в точечном иммуноферментном методе (ТИФМ),Изоферменты.Подвижность глюкоза-фосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогенаэы в клетках клона АЛМАхарактерна для мышиных клеток. Контаминация.Бактерии не.обнаружены, грибы и дрожжи не обнаружены, микоплазмы не обнаружены, вирусы - обнаружены частицы типа А и С, аналогичные частицам родительского штамма клеток Х 63-Ае...