Гормоны роста — C12N 15/18 — МПК (original) (raw)

Рекомбинатная плазмидная днк рвgнтrр 3, кодирующая гормон роста крупного рогатого скота, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гормона роста крупного рогатого скота

Номер патента: 1708847

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Баев, Голова, Горбулев, Позмогова, Рубцов, Садиев, Свердлова, Скрябин, Чернов, Чупеева, Шульга

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: бактерий, гормон, гормона, днк, еsснеriснiа, кодирующая, крупного, плазмидная, продуцент, рвgнтrр, рекомбинатная, рогатого, роста, скота, штамм

...20 вМ, Реакционную смесь экстрагируют равным объемом смеси фенол:хлороформ. ДНК из водной фазы осаждают спиртом, высушивают, растворяют в водефракционируют в 1 Д агарозном геле, Нужный фрагмент ДНК (Рчц И - Есой - фрагмент размером 680 п,о.) элюируют из легкоплавкой агарозы с помощью стандартной процедуры осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде,0,5 мкг Рчц 1 - Есой - фрагмента инкубируют в 10 мкл срднесолевого буфера с 5 ед. рестриктазы Н 1 пб И 1 в течение 1 ч при 37 С, ДНК из реакционной смеси осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде.Для получения вектора из плазмиды зуп/рВй 327 4 мкг ДНК гидролизуют в 20 мкл инкубационной смеси на основе среднесолевого буфера, содеожащей 15 ед. Рчц И и 20 ед, Н 1 пб 1 И, в...

Фрагмент днк alv 7, кодирующий синтез альфа-амилазы, способ его конструирования и штамм бактерий bacillus suвтilis продуцент альфа-амилазы

Номер патента: 1717633

Опубликовано: 07.03.1992

Авторы: Баев, Болотин, Вольфович, Дебабов, Йомантас, Козлов, Народицкая, Орлова, Попов, Рябченко, Сорокин, Стеркин, Стронгин

МПК: C12N 15/18

Метки: bacillus, suвтilis, альфа-амилазы, бактерий, днк, кодирующий, конструирования, продуцент, синтез, фрагмент, штамм

...ТемпераДНК А Ч произведена оптимальная под- турный оптимум для а-амилазы, кодируе.стыковкапоследовательностиДНК,кодиру- мой фрагментом ДНК А 1.Ч, составляет5 10 15 20 30 40 45 50 55 75-85"С. Меньшая продуктивность штамма, синтезирующего термостабильную а -амилазу связана с меньшей удельной активностью термостабильного белка из В.ИсЬепИогглз. измеренной в неоптимальных условиях (37 С).Б р и м е р 1, Конструирование фрагмента ДНК АУ/7, кодирующего синтез термостабильной а -амилазы,Клетки бактерий В.мЬИз (рЧ 31), содержащие плазмидную ДНК рЧЯ 1, выращивают в 10 мл 1-бульона (триптон 10 г/л; дрожжевой экстракт 5 г/л; ЙаС 10 г/л; рН 7,5) с добавлением эзоитромицина (0,02 мг/мл) до титра 1 х 10 кл/мл, Клетки осаждают центрифугированием...

Фрагмент днк, кодирующий гормон роста овцы, рекомбинантная плазмидная днк роgнтrр11, кодирующая синтез гормона роста овцы, штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гормона роста овцы

Номер патента: 1730150

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Баев, Горбулев, Рубцов, Сагадиев, Садиев, Скрябин, Шульга

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: бактерий, гормон, гормона, днк, еsснеriснiа, кодирующая, кодирующий, овцы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, роgнтrр11, роста, синтез, фрагмент, штамм

...работы отобрали плазмиду, содержащую Есой 1-Н 1 пб И 1-фрагмент с геном ГР КРС размером 601 п.ообозначенную рВОН Ва 112;П р и.м е р 2. Получение фрагмента ДНК,кодирующего ГР овцы.А) Клонирование фрагмента ДНК, коди рующего ГР КРС, в векторе М 13(фиг, 6).10 мкг плазмидной ДНК рВОНВа 12гидролизовали рестриктазами Есой 1 и НпбИ 1 в 50 мкл инкубационной смеси следующего состава: 50 вМ йаС 1, 10 вМ 5 трисНС 1. рН 7,5,10 вМ МяС 2, 1 еМ дитиот-рейтола(ДТТ), 10 ед; рестриктазы Есойи 10 ед. рестриктазы Н 1 пбИ, в течение 2 ч при 37 С.Проводили разделениефрагментов ДНКв 1агарозном геле и выделяли из геля фрагмент раз мером 601 п,оиспользуя стандартный метод.5.мкг ДНК репликативной формы бактериофага М 13 вр 8 гидролизовалирестриктазами...

Способ получения днк,кодирующей гормон роста лосося, способ конст-ния промежуточной рекомбинантной плазмидной днк, содержащей днк-фрагмент, кодирующий гормон роста лосося, для получения плазмид ps gh1, ps gh3,

Номер патента: 1825376

Опубликовано: 30.06.1993

Авторы: Акико, Мориюки, Сейга, Сусуму, Тамио

МПК: C12N 15/18, C12N 15/70

Метки: гормон, днк, днк,кодирующей, днк-фрагмент, кодирующий, конст-ния, лосося, плазмид, плазмидной, промежуточной, рекомбинантной, роста, содержащей

...экстрагируют смесью фенола с хлороформом и осаждают этанолом с получением 0,5 пмоля кДНК-вектора-затравки ДНК, связанной с (дЦ) цепями. Затем 0,08 пмоля ДНК и 0,16 пмоля упомянутой связующей ДНК добавляют к 40 мл раствора, содержащего 10 мМ трис-НС (рН 7,5), 0,1 М йаС и 1 мМ ЭДТА, и инкубируют при 65 С, 42 С и 0 С в течение соответственно 10, 25 и 30 мин. Реакционный раствор доводят до 400 мл (полный объем) раствора. содержащего 20 мМ трис-НС 1 (рН 7,5) 4 мМ МцС 12, 10 мМ (НН 4)2504, 0,1 М КС 1 и 0,1 мМ Р.НАД, К реакционному раствору добавляют 10 единиц ДНК-лигазы Езсег 1 сЬ 1 а со 11 и инкубируют в течение 1 сут при 11 С. Реакционный раствор доводят до раствора, содержащего 40 мкМ дНТФ и 0,15 мкМ /3-НАД. Затем добавляют пять единиц...

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей бычий гормон роста, способ биосинтеза производного бычьего гормона роста

Номер патента: 1838412

Опубликовано: 30.08.1993

Авторы: Бригитте, Рональд, Хансен

МПК: C12N 15/18, C12N 15/70

Метки: биосинтеза, бычий, бычьего, гормон, гормона, днк, кодирующей, плазмидной, производного, рекомбинантной, роста

...трансформантыэкспрессируют вышеупомянутое производное МЕТ бГР с высокими уровнями, Поскольку плазмида рАТ содержит15 термоиндуцируемый репликон неконтролируемого роста, максимальная экспрессияжелаемого продукта производного бГР происходит при культивировании при температурах около 37 С,20 П р и м е р 9. Конструирование плазми 25 ДНК; ССС ЛАС ССТ СТССТ 3ССС ТТС ССЛ С 515 30 35 40 ки, и затем культивируют для последующего продуцирования и выделения плазмиды45 рАЯР 1. Как показано ЯОЯ-гель-электрофо 50 55 В, Лигирование и трансформация,Примерно 20 пикомолей линкернойДНК примера 7,Б, 1 мкг перевара рММ 608примера 7,А, 0,5 мкг ВаоН 1-ЕсоВ 1 фрагмента примерно 10,2 3 сЬ плазмиды рСЕ 101(полученного в соответствии с методикойпримера 2;Б, с...

Рекомбинантная плазмидная днк psth 2191, кодирующая синтез соматотропина человека, и штамм escherichia coli продуцент соматотропина человека

Номер патента: 1387414

Опубликовано: 30.12.1994

Авторы: Баев, Рубцов, Свердлова, Скрябин, Чернов, Чупеева, Шляпников

МПК: A61K 35/55, C12N 15/18

Метки: 2191, escherichia, днк, кодирующая, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, соматотропина, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pSTH 2191, кодирующая синтез соматотропина человека, размером 6,0 т.п.о., состоящая из: плазмидной ДНК вектора pBR 322 размером 4,14 т.п.о.; фрагмента ДНК, содержащего trp-промотор E.coli, размером 1,17 т.п.о., EcoRI-Hind III-фрагмента реконструированной к ДНК соматотропина человека размером 713 п.о., 1 участка расщепления рестриктазы EcoRI; 1 участка расщепления рестриктазы Hind III, расположенного на расстоянии 713 п.о. по часовой стрелке от EcoRI-сайта, 1 участка расщепления рестриктазы BamHI, расположенного на расстоянии 1059 п.о. по часовой стрелке от EcoRI-сайта, 1 участка расщепления рестриктазы SalGl, расположенного на расстоянии 1334 п.о. по часовой стрелке от EcoRI-сайта, 2 участков расщепления...

Рекомбинантные плазмидные днк, кодирующие синтез производных соматотропного гормона человека, способ их конструирования, штаммы escherichia coli, содержащие эти плазмиды продуценты производных соматотропного го

Номер патента: 1248280

Опубликовано: 09.02.1995

Авторы: Баев, Звонок, Парсаданян, Рубцов, Свердлова, Скрябин, Федорова, Чернов, Чупеева

МПК: C12N 15/18

Метки: coli, escherichia, гормона, днк, кодирующие, конструирования, плазмидные, плазмиды, продуценты, производных, рекомбинантные, синтез, содержащие, соматотропного, человека, штаммы, эти

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pSTH 38 + 4/P - lac размером 5,3 тыс. пар оснований, обеспечивающая синтез Мет-Глу-Сер-Ала-соматотропина человека, которая состоит из:большого Hind III - EcoRI-фрагмента векторной плазмиды pBR 322 размером 4331 пар оснований,EcoRI-фрагмента, содержащего двойной lac UV - 5 - промотор, размером 285 пар оснований,EcoRI - Hind III-фрагмента реконструированной кДНК соматотропина человека размером 726 пар оснований; содержит:2 участка расщепления рестриктазы EcoRI, расположенных на расстоянии 285 пар оснований друг от друга,1 участок расщепления рестриктазы Hind III, расположенный на расстоянии 726 пар оснований по часовой стрелке от правого EcoRI-сайта,1 участок расщепления...

Способ получения биомассы бактерий, содержащих гормон роста человека

Номер патента: 1269511

Опубликовано: 27.06.1999

Авторы: Баев, Башкис, Ежов, Кадомцева, Козловский, Лузина, Парсаданян, Рубцов, Санцевич, Скрябин, Янулайтис

МПК: C12N 1/20, C12N 15/18

Метки: бактерий, биомассы, гормон, роста, содержащих, человека

Способ получения биомассы бактерий, содержащих гормон роста человека, включающий выращивание бактерий Escherichia coli, несущих плазмиды, в аэробных условиях на питательной среде с источниками углерода, азота и фосфора, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода биомассы, выращивание культуры осуществляют на среде, содержащей следующие компоненты, г/л: глюкоза 5 - 20, бакто-пептон 10 - 20, MgCl2 6H2O 1 - 2, сульфат аммония 5 - 10, KH2PO4 4 - 9, Na2HPO4 12H2O 20 - 50, дрожжевой...

Рекомбинантная плазмидная днк pbatam2, кодирующая альфа амилазу bacillus licheniformis, штамм бактерий bacillus amyloliquefaciens продуцент альфа-амилазы

Номер патента: 1782029

Опубликовано: 10.07.1999

Авторы: Баев, Болотин, Вольфович, Дебабов, Иомантас, Козлов, Народицкая, Орлова, Попов, Рябченко, Сорокин, Стеркин, Стронгин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: amyloliquefaciens, bacillus, licheniformis, pbatam2, альфа, альфа-амилазы, амилазу, бактерий, днк, кодирующая, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК рВАТАМ2, кодирующая альфа-амилазу Bacillus licheniformis, размером 9 т.п.н., содержащая:- HindIII-HindIII - ДНК плазмиды рВА91, размером 4,7 т.п.н.;- HindIII-HindIII - фрагмент ДНК плазмиды pLV7, размером 4,3 т.п.н.;- два участка расщепления рестриктазой HindIII;- один участок расщепления рестриктазой BamH1;- amy-ген, кодирующий синтез термостабильной амилазы B.Licheni-formis;- ermC - ген, детерминирующий устойчивость клеток к эритромицину;- par - область, обеспечивающая стабильное наследование плазмиды.2. Штамм бактерий Bacillus...