Оксидоредуктазы (1.), например люцифераза — C12N 9/02 — МПК (original) (raw)
Способ получения окислительно-восстановительных ферментных препаратов
Номер патента: 297294
Опубликовано: 01.01.1971
Авторы: Гор, Дай, Институт, Пугачев, Треть, Туребеков, Турсуметова
МПК: C12N 9/02
Метки: окислительно-восстановительных, препаратов, ферментных
...способа получения окислительцых ферментов, в частности каталазы, обеспечивающего высокий выход фермептцых препаратов и их высокго ферхгеитагивпуго аки- ность.Это досппается тем, что в кгчсствс источшкд углерода используют смесь углеводов с углеводородами, цд пример глюкозы с парафинами. Количество углеводородов в смеси составляет 75 - 90%,Сособ по,г 1 гепи фсръгсптпых прсттдратов заключается в культивироваиии плеспевых грибов ца питательных средах, содержащих 1 О - 25% углеводов, например глюкозы, и 75 - 90% парафпповых углеводородов.П р и м е р 1. Плесневой гриб Лврегр 1 цз пгдсг вырдщиваюг в колбах со 100 тг,гг среды 2Чггпекд, в которой глгокозд пд 85% замеце.пд ядрггфипами и виде 1%-пой Водв-парафпновой эмульсии....
Способ получения мутантов дрожжей, дефецитных по цитохромам и содержащих цианидрезистентную оксидазу
Номер патента: 724575
Опубликовано: 30.03.1980
Автор: Акименко
МПК: C12N 15/01, C12N 9/02
Метки: дефецитных, дрожжей, мутантов, оксидазу, содержащих, цианидрезистентную, цитохромам
...содержащую также сбраживаемый источник углерода. Через10 ч роста проводят полярографическоеизмерение дыхания в присутствиси ингиби-.тора цианидрезистентной оксидазы, например салицилгидроксамовой кислоты, бензгидроксамовой кислоты или ихгалоидпроизводных. Так как цианидрезистентная оксидаза - единственная оксидаза митохондрий у этих цитохромдефицитных дрожжей,культура дрожжей, у которой вэтих условиях полностью отсутствует дыхание, является мутантом, дефицитным по одномуили нескольким цитохромам.Изобретение отличается от существующих способов .отбора цитохромдефицитныхмутантов дрожжей тем, что используютсяспецифические ингибиторы "цианидрезистентной оксидазы на стадии измерения дыхания культур петитных колоний.П р и м е р....
Способ получения иммобилизованной лакказы
Номер патента: 883172
Опубликовано: 23.11.1981
Авторы: Березин, Варфоломеев, Сухомлин, Ярополов
МПК: C12N 9/02
Метки: иммобилизованной, лакказы
...1 по отношениюк лакказе, ( Наилучшие результаты903"ого сохранения первоначальной активности получают при 5-кратном избыткереагента Вудворда по отношению к лакказе. При увеличении этого соотношенияактивность полученного препарата уменьшается и при 20-кратном избытке реак Отива Вудворда составляет 59 от первоначальной активности),Термостабильность полученной иммобилизованной лакказы в интервале температуры 20-65 С не отличается от стаобильности нативного Фермента, Активность иммобилизованной лакказы можетдостигать 907 от исходной.П р и м е р. 4 мгпредварительноизмельченной сажи МПсуспендируютв 0,5 мл дистиллированной воды, содержащей 3 мг БСА, Суспензию перемешивают в течение часа, а затем центрифугируют в течение 10 мин при 6000...
Способ получения ферментных электродов чувствительных к метаболитам
Номер патента: 891774
Опубликовано: 23.12.1981
Авторы: Кулис, Лауринавичюс, Малинаускас, Песлякене, Самалюс, Швирмицкас
МПК: C12N 9/02
Метки: метаболитам, ферментных, чувствительных, электродов
...е р 2. Электрод изготавливают иэ 26 мг комплекса состава ЙМФ ТЦХВГ и погружают в раствор высокоочищенной пероксидаэы иэ хрене в 0,1 М фосфатном буфере. Концентрация фермента 1(Гмоль/л (4 10 фмг/мл). Адсорбция проводится в течение 25- 30 мин при 20 С. Ферментный электрод пропитывают фосфатньм буфером и про" . водят определение тока электрода в зависимости от концентрации перекиси водорода.Зависимость катодного тока восстановления перекиси водорода адсорбированной на комплексе МИФ ТЦХИ пероксидазой (20 оСрКш 7,0,; О, 1 И фосфатный буфер) показана в табл,3Электрод сохраняет работоспособ;ность в течение суток. Когда на комплексе захватывается раствор пер" .оксидазы (0,1 мг/мл) при помощи ди- Зз ализной мембраны, электрод сохраняет активность...
Питательная среда для культивирования светящихся бактерий
Номер патента: 973614
Опубликовано: 15.11.1982
Авторы: Высоцкий, Заворуев, Межевикин
МПК: C12N 9/02
Метки: бактерий, культивирования, питательная, светящихся, среда
...с прототипом. 8,0 - 10,0 ЭНатрий фосфорнокислыйоднозамещенный 8,0 - 10,0Калий фосфорнокислыйодно замещенный 1,0 - 1,1Аммоний фосфорнокислыйодно замещенный 0,50 - 0,55Магний ссрнокислый 0,08 - 0,12Глицерин 3,4-3,6Бактопептон 5,0-5,5Дистиллированная вода ОстальноеФенобарбитал является ангибитором синтеза,альдегидного фактора одного из субстратовлюцифераэы в клетках бактерий.П р и м е р 1, В культиватор заливаютстерильную питательную среду, г/л: МаС 29,0;Наг НР 0412 НО 10,0; КНзР 04 1,0; (ЙН) яНРО 40525; Мд 80,7 НгО 0,08; глицерин3,5; бактопептон 5,5; дистиллированная водадо 1 л. Затем вводят инокулят и сразу жедобавляют фенобарбитал в концентрации0,2 г/л. Скорость роста (фиг. 1 а, кривая2) не отличается от контроля (фиг. 1 а,...
Способ выделения -зависимой супероксиддисмутазы из печени крысы
Номер патента: 979506
Опубликовано: 07.12.1982
МПК: C12N 9/02
Метки: выделения, зависимой, крысы, печени, супероксиддисмутазы
...полученной после высокоскоростного центрифугирования цитозольной фракции используют в объемном соотношении 1:(1,5-1,7), а хроматографию проводят на диэтиламиноэтил-сефадексе, с элюцией ступенчатым градиентом ИаС 1 0,05-0,1 М, причем стадию хроматографии проводят дважды.Предлагаемый способ позволяет 40 повысить степень очистки до 250 раз, сократить длительность процесса выделения на 20 ч и значительно упростить сам процесс.П р и м е р. Охлажденную печень 45 крыс гомогенизируют при ОфС в растворе, содержащем 0,25 М сахарозы, 1 мм ЭДТА, рН 7,4, из расчета нб 1 г ткани 10 мл раствора. Гомогенат центрифугируют при 105000 9 в течение 60 мин. К надосадочной жидкости (цитозольной Фракции) добавляют при перемешивании 1,5 объема охлажденного...
Способ выделения лактопероксидазы
Номер патента: 1024501
Опубликовано: 23.06.1983
Авторы: Ажицкий, Денисова, Крашенюк, Носков, Умовская, Хазенсон
МПК: C12N 9/02
Метки: выделения, лактопероксидазы
...при температуре -20 С, Молоко предварительно обезжирнвают центрифугированием при 300 об/мин втечение 30 мин на центрифуге Я - 70( 2600 д) .Казеин осаждают при рН 4,0-4,5установленном с помощью 0,5 М раствора НС 1, РН в растворах определяютс помощью РН-метра ЛПУ - 01. Осадокказеина отделяют центрифугированиемпри 300 об/мин в течение 20 мин нацеитрифуге Я. Затеи к молочнойсыворотке добавляют сухой необработанный КИ-сефадекс Сиз расчета2 г на 1 л сыворотки. Сорбцию ЛПОна ионообменном сефадексе ведут втечение 5 ч при комнатной температуРе при постоянном перемешивании.Сефадекс отделяют на воронке Бюхнера и просеивают 2 л воды, а к Фильтрату добавляют новую порцию сефадекса и рроводят повторную сорбциюЛПО,ЛПО элюируют на воронке Бюхнера0,02...
Способ получения препарата бактериальной люциферазы
Номер патента: 1035062
Опубликовано: 15.08.1983
Авторы: Высоцкий, Заворуев, Межевикин, Родичева
МПК: C12N 9/02
Метки: бактериальной, люциферазы, препарата
...импортные материалы, что значительно5 удорожает получение люциферазыЦель, изобретения - упрощениеспособа.Указанная цель достигается тем,что согласно способу получения препарата бактериальной люциферазы,включающему выращивание культурысветящихся бактерий рода РЬоСоЬас 1 ег 1 цщ на жидкой питательной среде,содержащей источники, углерода,азота, кислорода и минеральные соли,в аэробных условиях, отделение клеток, их разрушение, отделение клеточньв оболочек и колоночную хроматографию ферментсодержащего раствора, в качестве наполнителя для ко 30 лонок используют СаНРО 4 НО ( брушит),полученный после хроматографии элюат концентрируют и хроматографируют повторно,Элюцию люциферазы при хроматогра 35 фии обычно осуществляют...
Способ получения ферментного препарата липоксигеназы
Номер патента: 888542
Опубликовано: 15.08.1983
Авторы: Будницкая, Двадцатова, Кретович, Соловьева, Токарева, Яровенко
МПК: C12N 9/02
Метки: липоксигеназы, препарата, ферментного
...При этомкультивирование продуцентов липо-ксигенаэы осуществляют на питательной среде, содержащей индуктор - соевое масло, муку в качестве источни ка углерода и минеральные солиазотнокислый натрий, сернокислыймагний, одноэамещенный фосфорнокислый калий, взятые соответственнов количествах вес.4:15 Соевое масло1-5Соевая мука 8-12А зотнокислыйнатрийСернокислыймагний 0,005-0,015Однозамещенныйфосфорнокислыйкалий 0,05-0,3Вода Остальное 25 Способ отличается тем, цто в качестве продуцентов используют штаммыАэрегд 111 цэ огугае 3-9-15 или Аэрегс 111 цэ аиаогу ч 66,Штамм Аэрег 9 111 цэ огугае 3-9- 15Получен путем одноступенчатого воздействия ультрафиолетовых лучей наштамм Аэрегс 11 ц э огугае. Штамм хранится в коллекции ВНИИгенетика,...
Способ получения иммобилизованной люциферазы
Номер патента: 987976
Опубликовано: 23.02.1984
Авторы: Беляева, Березин, Бровко, Иванова, Угарова
МПК: C12N 9/02
Метки: иммобилизованной, люциферазы
...при реализацииописываемого способа получения иммобилиэованной люцифераэы снетлякон,включающим экстракцию фермента иэлампочек светляков буферным раствором и последующую обработку полученного экстракта полимерным полисахаридным носителем, актинированнымбромцианом, причем экстракцию осуществляют Фосфатным бубером с ионной силой 0,5 М при весовом соотношении лампочки светляков:буфер1:40-10и обработку экстракта полимером проводят при весовом соотношении лампочки светляков:полимер1:1-3. Обычно в качестве полисахаридного носителя используют сефарозу, сефадекс, ультрагель (смешанный полимер, полиакриламида иагарозы ), ультрадекс (гель декстрана) целлофановую пленку, целлюлозу,С целью экономии Фермента отработанный Ферментный экстракт...
Способ получения комплекса внеклеточных ферментов
Номер патента: 1084299
Опубликовано: 07.04.1984
Авторы: Даниляк, Семичаевский, Трутнева
МПК: C12N 9/02
Метки: внеклеточных, комплекса, ферментов
...агримуса целлюлозу (фильтровальную бумагу) в количестве 15,0 г/л.В табл. 1 и 2 приведены результаты измерений активностей внеклеточных пероксидазы (Кф 1.11,1.7), монофенол-монооксигеназы (Кф 1. 14.18. 1), Эндо,4-3-глюканаэы (КФ,3.2.1.4), полигалактуроназы (КФ 3.1.1,15), экзополигалактуроназы (Кф 3,2.1,67) и пектинэстеразы (Кф 3.1111) в культуральных фильтратах указанных продуцентов, полученных после отделения мицелия и остатков твердого субстрата. По сравнению с контролем среда с агримусом более эффективна для получения большинства3 1084299исследуемых ферментов. Так, привыращивании Р 2 ецгогцз озггеагцэ насреде с агримусом достигнуто увеличение активности пероксидазы и моно"фенол-монооксигеназы, более чем в12 раз по сравнению с...
Штамм -1215-продуцент гидрогеназы
Номер патента: 1125245
Опубликовано: 23.11.1984
Авторы: Заварзин, Крюков, Пушева, Савельева
МПК: C12N 9/02
Метки: 1215-продуцент, гидрогеназы, штамм
...устойчивость к кислороду при хранении. Сравнительное изучение изменений активности фермента при его хранении в атмосфе . ре водорода при 40 С и на воздухеов замороженном состоянии показало, что период полуинактивации в обоих случаях составляет 8 дн, т.е. данный фермент оксистабилен.Пределы рН для .гидрогеназы Са 1 йегоЪас гегдпш ЬуйгояепорМ 1 цш достаточно велики, она проявляет активность в пределах рН 5;5 - 13. Максимум активности при рН 7,0. Активность 45 гидрогеназы определяют в бесклеточных экстрактах. Для получения бесклеточного экстракта осадок клеток суспеидируют в 0,05 М фосфатном буфере рН 7 и разрушают 5 мин при 50 0 С в дезинтеграторе при частоте 22 кГц. Неразрушенные клетки и осколки клеток отделяют центрифугироваа,Р,днием...
Штамм микроскопического гриба 35219-продуцент фенолаз
Номер патента: 1161549
Опубликовано: 15.06.1985
Авторы: Дурмишидзе, Зухбая, Квачадзе, Пруидзе
МПК: C12N 1/14, C12N 9/02
Метки: 35219-продуцент, гриба, микроскопического, фенолаз, штамм
...загрязнения среды его спорамиеШтамм имеет следующие морфологи ческие и физиологические характеристики. Растет хорошо на средах: Чапека, Сабуро, чайном, картофельноглюкозном и сусло"агаре,а также на естественных питательных субстратах,На чайном агаре хорошо развивается воздушный мицелий серовато-бело- го цвета, рыхло-войлочный, высоко поднимающийся на поверхность среды, Центр колоний не рыхлый, приземистый, Строма не окрашена, гифы трех типов: толстые - до 10 мкм, густо гранулированные утолщенные - до 5 мкм, слегка гранулированные; тонкие с мелкими каплями жира и митохроматина, Хламидоспоры отсутствуют, линейный рост колоний на сусло-агаре по дням: 3-й день - 29 мм, 5-й день - 48 мм, 7-й день - 72 мм, 10-й день - 91,5 мм.Отношение...
Способ выделения ферредоксина
Номер патента: 1255640
Опубликовано: 07.09.1986
МПК: C12N 9/02
Метки: выделения, ферредоксина
...полиакриламидном геле.Активность ферредоксина определяют по скорости Фотовосстановления НАДФ хлоропластами пшеницы в реакционной смеси следующего состава: мкмоль МяС 10; НАДф Оуб М Ферреоксина; 0,05 М трис-НСС буфера (рН 8,2), 10-хлорофилла.П р и м е р 3. Выделение ферредоксина из листьев пшеницы ведут аналогично примеру 1, но с использованием механического измельчения замороженных листьев в соотношении листья:буфер 1:2 и без добавок, снижают выход белка в 1,5 - 2 раза и активность в 1,5 раза.П р и м е р 4. Выделение ферредоксина из листьев люцерны, выращенной в открытом грунте, ведут анало1255640 Таблица 1 7 от исОбщий белок, мг Активностьферредоксина,мкмоль НАДФН Стадии очистки ивыделения фермента ходногобелка мг хф ч Гомогенат...
Способ определения активности 3-оксибутиратдегидрогеназы в биологических структурах
Номер патента: 1317022
Опубликовано: 15.06.1987
Авторы: Бирюков, Фисинин, Шольц
МПК: C12N 9/02
Метки: 3-оксибутиратдегидрогеназы, активности, биологических, структурах
...кривую .зависимости светопоглощения,суспензии митохондрий от концентраций детергента. Эта зависимость имеет точки перегиба в области высоких и низких значений поглощения, Концентрация детергента, соответствующая таСоставитель 1 О,КононенкоРедактоР И.СеглЯник ТехРед М,Ходанич КоРРектоР А,ОбРУчаР Заказ 2394/23 Тираж 499 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5. Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 П р и м е р. Митохондрии, выделенные из печени крыс весом 250-300 г линии Вистар, в количестве 0,5 мг белка вносят в 3 мл среды, содержащей 25 ммоль трис-НС 1 (рй 7,4), 2 ммоль НАД+, 1 мкмоль ротенона, Добавляют тритон Хдо...
Способ получения люциферазы светляков
Номер патента: 1339128
Опубликовано: 23.09.1987
Авторы: Букатина, Духович, Угарова, Филиппова
МПК: C12N 9/02
Метки: люциферазы, светляков
...при 3000 д 10 мин, отделяютраствор, к осадку добавляют 20 млсвежего буферного раствора того жесостава, инкубируют 30 мин, вновьцентрифугируют, Последнюю операциюинкубирования и центрифугиронанияповторяют, Три порции полученногонадосадочного раствора объединяют ицентрифугируют 30 мин при 25000 я,осадок отбрасывают, а надосадочнуюжидкость центрифугируют при 1400001,5 ч, Получают надосадочный раствор,который содержит люциферазу с активностью 1,0 10 мВ/мл и удельной ак 9тивностью 131 О мВ/мг белка, Степеньочистки исходного экстракта последифференциального ультрацентрифугирования состанляет 16 раз. При хранеонии при 4 С в растворе 30 сут, препарат сохраняет 50% актинности, По известному способу получают препаратлюцифераэы с...
Препарат для индикации оксидазы микробов
Номер патента: 1364636
Опубликовано: 07.01.1988
МПК: C12N 9/02, C12Q 1/04
Метки: индикации, микробов, оксидазы, препарат
...оксидазы через 1 Ь 30 с происходит покраснение штрихаи культуры, а через 1 мин цвет меняется от синего до черного. При отсутствии оксидазы у микробов штрих неменяет свою первоначальную окраску(светло-коричневый цвет).Результаты сравнительного изучения чувствительности препарата дляиндикации оксидазы и СИБ-оксидазыв зависимости от сроков храненияприведены в табл.З.Из табл.З видно, что с увеличением сроков хранения чувствительностьпрепарата для индикации оксидазыьщкробов на протяжении 5 лет не меняет свои свойства, а при использовании СИБ-оксидазы ее чувствительность снижается, что статистическидоказано (Р ( 0,01 и Р ( 0,001),Результаты чувствительности препарата для индикации оксидазы микробов в зависимости от количественного содержания...
Способ определения оксидазы бактерий
Номер патента: 1395669
Опубликовано: 15.05.1988
Авторы: Кукулянский, Соколовская
МПК: C12N 9/00, C12N 9/02
...петлей с поверхности среды и наносят штрихами на увлажненные полоски бумаги. Быстрая реакция - коричнево-красное окрашивание бумаги в течение 1-15 с. Медленная реакция - такое ке окрашивание бумаги в пределах 16-60 с. Отрицательная реакция - отсутствие какого- либо окрашивания. Окрашивание бумаги за время более 1 мин оценивают как сомнительную реакцию.Результаты сравнительных опытов приведены в табл. 1Как видно из табл, 1, из 38 штаммов оксидазопозитивных бактерий положительную реакцию дали; В табл. 2 приведены результаты определения оптимальных концентрацийЭОЭФД сульфата и ЭДТА-Иа: число штаммов, положительных по оксидазномутесту (число быстро реагирукицих штаимов),Данные табл. 2 свидетельствуют,что оптимум концентрации ЭОЭФЦ-сульфата в...
Способ получения cu, zn-супероксиддисмутазы из животного сырья
Номер патента: 1413133
Опубликовано: 30.07.1988
Автор: Симонян
МПК: C12N 9/02
Метки: zn-супероксиддисмутазы, животного, сырья
...помощью раэмельчителейткани при 8000 об/мин в течение 2 мин.Собирают ацетоновый осадок центрифугнрованием при 3000 х я, 15 мин, егогомогенизируют в 0,1 М Фосфатном буфере, рН 7,4 (КФБ) и инкубируют полученную смесь при 10 С в течение2 ч, прн интенсивном перемешивании,.Затем рН этого гомогената приводят к5,7 (0,5 М моляной кислоты) и удаляют нерастворимые части центрифугированием в течение 20 мин при 6000 хх я, К полученному надосадочномураствору добавляют сульфат аммониядо насыщения и затем ацетон (в 20 кратно меньшем объеме), смесь интенсивно перемешивают и оставляют впокое, Через 20-30 мин при 20 Спроисходит полное разделение белко"вой фракции от других компонентовсмеси (белковая фракция в виде агрегата собирается на верхнем слое...
Способ получения липоксигеназы
Номер патента: 1472501
Опубликовано: 15.04.1989
Авторы: Аль-Нури, Васильева, Егоров, Кривова, Прянишникова
МПК: C12N 9/02
Метки: липоксигеназы
...1 табл,Активность липоксиг ляют при помощи электродапоглощению кислорода, а всубстрата используют линоарахидоновую кислоты.1472501 Формула изобретения Способ получения липоксигеназы, предусматривающий культивирование продуцента на питательной среде,до доСтижения максимального уровня активности, отделение мицелия и разрушение его, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения активности целевого продукта и ускорения процесса, в качестве продуцента используют штамм Бггергошусев врЬегоЫев ВКПМЯ, а культивирование ведут на питательной среде с рН 8,0,Активность липоксигеназы нМ 0 Длительность рН Штаммы культивирования,ч г биомассы,мин субстраты Линолевая Арахидоноваякислота кислота Гцвагцт 0,6 2,4 168 6,0 охуврогцш Бггерготусев...
Способ получения гидрогеназы
Номер патента: 1477741
Опубликовано: 07.05.1989
Авторы: Гоготов, Зорин, Корсунский
МПК: C12N 9/02
Метки: гидрогеназы
...увеличивают до 70% и суспензию центриФугируют в течение 15 мин при 5000 я. Осадок, содержащий гидрогеназу, растворяют в 150 мл 0,02 М калийФосфатного буфера, рН 7,0 и полученный раствор прогренают в течение 10 мин при 70 С для удаления термолибильных белков. Денатурированные белки осаждают центриАугировянием в течение 30 мин при 5000 я и для дальнейшей очистки гидрогеназы су-, пернатант наносят на колонку (1,5 х х 15 см) с Аенилсефарозой СЬВ, урав. новешенную 0,8 М раствором сульАатя аммония в 0,02 М калийфосфатном буФере, рН 7,0. Колонку с адсорбированной на ней гидрогеназой промывают вначале 100 мл 0,8 М, а затем тем же объемом 0,2 М раствором сульфата аммония. Гидрогеназу элюируют дистиллированной водой до полной элюции и...
Способ выделения над-зависимой формиатдегидрогеназы
Номер патента: 1479512
Опубликовано: 15.05.1989
Авторы: Березин, Вайткявичюс, Глемжа, Егоров, Кадушевичюс, Ламзин, Петкявичене, Попов, Тишков
МПК: C12N 9/02
Метки: выделения, над-зависимой, формиатдегидрогеназы
...объемом 500 мл. Объединяютфракции Фермента с удельной активностью от 9 до 11. Фракции с удельной активностью от 5 до 9 могут бытьиснользонаны при очистке гидрофобнойхроматографией следующей партииФермента. Активность фермента2900 мкмоль/мин, Удельная активность10 мкмоль/мин мг,П р и м е р 2, Способ осуществляютсогласно примеру 1, но после стадиигидрофобной хроматографии объединенные фракции фермента концентрируютдо объема 25 мл ультрафильтрацией,используя мембраны или полые волокнас отсекающей молекулярной массой10 кДа, Раствор фермента наносят наколонку объемом 1,5 л (50 х 750 мм)с сефакрилом 8-200, уравновешенным0,05 М калий-фосфатным буфером, 0,01 МЭДТА, рН 7,8. Скорость нанесения формиатдегидрогенаэы до 2 мл/см.ч....
Способ определения активности супероксиддисмутазы
Номер патента: 1521773
Опубликовано: 15.11.1989
Авторы: Афанасьев, Костюк, Потапович
МПК: C12N 9/02, C12Q 1/00
Метки: активности, супероксиддисмутазы
...проба; 0,2 мл синовиальнойжидкости, разведенной в 10 раз и выдержанной в кипящей водяной бане10 мин, и 0,1 мл 0,5 мМ раствора квер 60 ьИ), каталаза (0,01-100 мкгlмл) не оказывают влияние на этот процесс. В то же время очищенный препарат СОД с удельной активностью 3000 Б/кг его ингибирует. Степень ингибирования оценивается по отношению величины изменения оптической плотности при 406 нм ( Л 1)щ ) в присутствии СОДд 114 фб в контрольной пробе, не содержащей фермента за 20 мин,цетина - контрольная проба;,0,2 мпфизиологического раствора и О, 1 мл0,5 мМ раствора кверцетина - холостаяпроба,Оптическую плотность при 406 нмопределяют сразу после добавлениякверцетина и через 20 мин. Результатыприведены в табл. 1. Т а б л и ц а,1...
Способ получения лактатоксидазы
Номер патента: 1521774
Опубликовано: 15.11.1989
Авторы: Браженас, Куртинайтене, Лукошявичене, Павленко
МПК: C12N 9/02
Метки: лактатоксидазы
...указанному в прототипе: 10 г/л 85/-ной Э,Ь-молочйой кислоты; 5,0 г/л дрожжевого экстракта; 2,0 г/л КНРО ЗНО;2,0 г(л МяБО; 7 НО,. 500 мл пивного сусла, 500 мл фталатного буфера, рН 5,5. Посевной материал выращивают втечение 1 сут при 25 С на качалкепри 150 колебаний/мин,Посевной материал в количестве 5%переносят в колбы с ферментационнойсредой, состав которой соответствуетуказанному в прототипе, г/л: ЮН 4 С 11,5;,дрожжевой экстракт 1,0; На 805,0; КНРО 4 4,0 М 8804 7 НО Оф,Мп 80 НО 0,08; 37,5 мп/л 407-ной Р, Ь-молочной кислоты, рН среды уравновешивают с ИН ОН до 5,2. Культивирование продуцента проводят в течение 24 ч при 25 С на качалке при 150 колебаний/мин.Отделение биомассы, ее гомогенизация и центрифугирование клеточного...
Способ получения люциферазы светляков luciola мingrеliса
Номер патента: 1546484
Опубликовано: 28.02.1990
Авторы: Букатина, Дементьева, Кутузова, Угарова
МПК: C12N 9/02
Метки: luciola, люциферазы, мingrеliса, светляков
...1:30 1:30 5" 1 О 0,01 В, ,Гомогенный препарат,0 2 10 2 1 О 0 тем же буфером для удаления с носителя,несвяэавшихся веществ. Люцифераэу элюируют тем же буфером, но содержащим 60 мМ МАЗО,. Во Фракциях, содер-жащих люциферазу спектрофотометрическим методом определяют концентрациюбелка, и полученные фракции наносятна колонку с голубой агарозой в соотношении белок:носитель 1:30. Несвязав шиеся белки смывают 0,05 М трис-ацетатным буфером, рН 7,8,. содержащим2 мМ ЭДТА 60 мМ ИМБО. Злюцию люциферазы проводят тем же буфером, содержащим 15 мК АТФ. Получают раствор люцифераэы с концентрацией белка0,05 мг/мл и удельной активностью2 10 мВ/мг, Выход по активности сос 9тавляет 1004 от исходной.Раствор люциферазы после аффиннойхроматографии на...
Способ выделения цитохрома с из дрожжей
Номер патента: 1563698
Опубликовано: 15.05.1990
Авторы: Ежов, Ильин, Козлов, Косарева, Темина, Троицкая
МПК: A23J 1/18, A61K 35/72, A61K 38/44 ...
Метки: выделения, дрожжей, цитохрома
...шестикратном пропускании суспензии через баллистическую мельницу МЛ. Дезинтеграт центрифугируют при 3000 об/мин, осадок клеточных стенок промывают 7 Х-ным раствором поваренной соли, затем водой в соот3 15636шенин 1-1,5. Супернатанты объединяи йракционируют путем ультрайильтации в установке "Пеликон" фирмыллипор последовательно на мембранах 100000, 30000 и 1000 дальтон.Концентрат йракции белков, обогащенной Цитохромом С, собирают на мембране1 ООО дальтон, промывают водой и затем хроматограйируют в одну стадиюа ионообменной колонке размероме ,Ох 200 мм, наполненной котионитомКСуравновешенным 0,15 М аммоно-йосйатным буйером (рН 7;О),концентрируют на мембране ИМ"АшьОоп подвергают гепь-йильтрацииа колонке размером 16 х 400 мм с се 4 адексом...
Способ получения цианидгидратазы
Номер патента: 1602394
Опубликовано: 23.10.1990
МПК: C12N 9/02
Метки: цианидгидратазы
...н количестве 10, наиболее предпочтительно4-6 ммоль/г сухих клеток. Обнаружено, что с ростом концентрации цианид-ионов в питательной среде, вводимой н культуру в стационарных условиях, увеличивается активность Фермента цианидгидратази, причем величина его активности линейно зависитот концентрации цианид-ионов, Так,например, активность Ферманта, вираженная в микромолях Образуюпегося н1 мин ца 1 л культуры Формамида, принеболыиом содержании (20 ммоль) ранна 220,Предпочтительными являются следующие условия культивации предлагаемого способа: скорость разведения0,05-0,1 ч , рН 5,0-6,0 предпочтиотельно 5,5; температура 28-32 С,предпочтительно 30-32 Г. В этих чсловиях активность получаемого Ферментамаксимальна. 02394 1 О 15 20 В...
Способ лиофильного высушивания оксидазы l-аминокислот из яда гюрзы
Номер патента: 1307849
Опубликовано: 30.11.1990
Авторы: Аавиксаар, Сийгур, Тара
МПК: C12N 9/02
Метки: высушивания, гюрзы, л-аминокислот, лиофильного, оксидазы, яда
...(до 80 . остаточной активности),Влияние добавки фракции яда гюрзыс мол.м. 1000-1300 является исключи"тельной - уже при низком весовомсоотношении 17;1 наблюдается практи 40 чески 100%-ный выход целевого продукта при лиофилизации, а оптимальнымявляется соотношение 1031. При этомважно отметить, что введение в препарат оксидазы Ь-аминокислот неболь 45 шого количества инертного пептидного стабилизатора не мешает определению активности и использованию этогофермента, .При соотношении 33:1 стабилизирующий эффект уменьшается.Иэ таблицы видно, что другие фракции яда гюрзы, в частности фракции.с мол.м. 2000 и 5000, не имеют ста-билизирующего эффекта. Модельный пептяд с мол,м, 1060, брадикияин, такжене имел стабилизирующего эффекта,сравнимого с...
Способ получения ферментного препарата для количественного определения тиаминдифосфата в биологических объектах
Номер патента: 1620483
Опубликовано: 15.01.1991
Авторы: Гриценко, Макарчиков, Черникевич
МПК: C12N 9/02
Метки: биологических, количественного, объектах, препарата, тиаминдифосфата, ферментного
...гидроксиапатита, уравновешенного этим же буферои, и после 10 мин экспозиции при 4 С центрифугируют 10 мин при 12000 я, Надосадочная жидкость содержит смесь алкогольдегидрогеназы и пируватдекарбоксилазы. Для полноты экстракции адсорбент повторно промывают, белок надосадочной жидкости объединяют, осаждают (ЫН)БО (полное высаливание) и собирают центрифугированием. На данном этапе очистки (табл, 1) удельная активность пируватдекарбоксилазы возрастает в 2,9 раза (с 4,8 ед, акт.,мгдо 14,0 ед.акт./мг), а алкогольдегид" рогеназы - в 175 раза (с 1,2 ед.акт./мг до 2, ед,акт./мг) и является приемлемой для Ферментативного определе 5 ния содержания ТДФ. Соотношение пируватдекарбоксилазной (14 ед.акт./мг белка) и алкогольдегидрогеназной (2,1...
Способ получения ксантиноксидазы
Номер патента: 1693047
Опубликовано: 23.11.1991
Авторы: Аликулов, Бесбаева, Якупбаев
МПК: C12N 9/02
Метки: ксантиноксидазы
...процесса и удешевление целевого продукта.Способ включает обработку исходного сырья и очистку продукта. причем в качестве исходного сырья используют зародыши пшеницы - отходы мукомольно-крупяного производства, которые обрабатывают буферным раствором, полученный экстракт прогревают при 55-65 С, а разделение бес- клеточного экстракта проводят методом ионообменной хроматографии на ДЭАЭ- целлюлозе и изоэлектрофокусированием.1693047 25 Общий белок, мг Этапы очистки Удельная активность,ммоль/мин мг белкаСтепень очистки Общая активность, мкМ/мин 200 2,4 12 176 145 15 30 290 103 24 26 0,8 25,8 10,5 936 13125791093 Составитель А.СеменовРедактор О,Юрковецкая Техред М.Моргентал Корректор Т,Палий Заказ 4051 Тираж Подписное ВНИИПИ...