Лиаза (4.) — C12N 9/88 — МПК (original) (raw)

410082

Номер патента: 410082

Опубликовано: 05.01.1974

МПК: C12N 9/88

Метки: 410082

...вначале в виях в среде следующего состаКлетки выращивали в 100 .г среды в колбах ЭрлсцхСйеря объемом 750 .и.г па качалке ирц 30 С в течсицс суток.Прц таких условях роста получали доста точную биомассу клеток (около 1 Я сырого Веса клеток со 100,ил среды), однако це обладающую искомой фермецтцой активностью.Клетки отдслялц цсцтрифугцроваписм, отмывали и переносили в 1,5 объема (к исходцому 10 объему среды) среды того же минеральногосо:тава, что и ца первой стадии с псптоцом (27 о) и 1 М.-Т 1)социцоа (1.10 ЗМ); цз сРеды исключали глюкозу.Все операции проводили в стерильных сго виях. Клетки выращивали олш сутки при37 С в стационарных условиях в колбах, доверху наполненных средой.Полу Синуо массу сусцеплцровалц в определенном объеме...

Способ определения орнитиндекарбоксилазы в тканях животных

Номер патента: 859440

Опубликовано: 30.08.1981

Автор: Сяткин

МПК: C12N 9/88

Метки: животных, орнитиндекарбоксилазы, тканях

...хлороформенным слоем измеряютпри 350 цм на спектрофотометре СФ,Контролем служит проба, в которуюорнитин добавляют непосредственноперед динитрофенилиоованием, Калибро"вочную коивую строят для стандартного препарата путресвина 2 НС 1, Устранение перед динитрофенилированием ианализируемой пробы белка центрифугированием после добавления НС 10увеличивает возврат до 10297+2,223Для нейтрализации НС 10 и защелачивания фазы до рН 9 добавляют порошокНаСО 1 О НО. Дитиотреитол используют для стабилизации дисульфидныхсвязей ОДК, Добавление пиридоксальфосфата улучшает воспроизводимостьрезультатов Качественный состав иколичественное соотношение компонентов инкубационной среды подбираютзаново,За единицу активности принимают1 нмоль...

Способ иммобилизации -лизиндекарбоксилазы

Номер патента: 1059002

Опубликовано: 07.12.1983

Авторы: Веножинскене, Казлаускас, Паулюконис, Ческис, Янушявичюте

МПК: C12N 9/88

Метки: иммобилизации, лизиндекарбоксилазы

...с таким силохромом при помощи реакции алкилирования нуклеофильных групп фермента.Предлагаемый способ является достаточно простым по технологии и, кроме того, позволяет получить иммобилизованную Ь-лизиндекарбоксилазу с довольно высокой удельной активностью (3000-3500,.мк моль/мин г).Полученный по предлагаемому способу уровень активности значительно превышает средний уровень активности иммобилизованных Ферментов (по известному способу 300-500 мк моль/мин г)Для получения иммобилизованного фермента с максимально высокой активностью (фиг.1 и 2) целесообразно осуществлять процесс при рН 6,6-7,3 и весовом соотношении белок/носитель 45-55 мг/г. При остальных значениях этих параметров процесс иммобилизации менее эффективен с точки зрения...

Штамм 2-82-продуцент пектат-лиазы

Номер патента: 1161551

Опубликовано: 15.06.1985

Авторы: C12R 1:18, Борисевич, Жук, Зинченко, Лобанок, Маламене

МПК: C12N 15/00, C12N 9/88

Метки: 2-82-продуцент, пектат-лиазы, штамм

...лактозу, эскулин, манно 61551 2зу, рамноэу, рибоэу с образованиемкислоты.Утилиэирует нитраты, лактат,цитрат, пелтон. Энергично разжижаетжелатину, выделяет НБ иэ цистеина,расщепляет пектат, гидролизует каэеин.Ацетоин и индол не образует, нерастет в присутствии 57 МаС 1, при10 утилизации глюкозы гаэ не выделяет.Максимальная температура роста40-42 С.Содержание ГЦ 52,2 мол.7.Признаки штамма устойчивы. Штаммц не патогенен.П р и м е р 1. Продуцент пектатлиазы Егчпьа сагоочога 2-82 культивируют на жидкой питательной среде следующего состава, мас,7;КНРО 1. 2 НО 0,7; КНРОд 0,2(ИН) БО, 0,1 ф, рН 7,0-7,2.В качестве источника углеродаиспользуют 2,57 сухого свекловичного жома. Водопроводная вода остальное.После стерилизации питательнуюосреду...

Способ получения препарата гистидиндекарбоксилазы

Номер патента: 1211289

Опубликовано: 15.02.1986

Авторы: Прозоровский, Романцев

МПК: C12N 9/88

Метки: гистидиндекарбоксилазы, препарата

...температуре. Суспензию центрифугируютв указанных условиях, после чегоосадок суспендируют в 150-160 млацетона и фильтруют, промывая нафильтре дважды ацетоном (по 150 мл)и эфиром (по 100 мл). Препарат высушивают на фильтре 30 мин. Полученный таким образом ферментный препарат гистидиндекарбоксилаэы (24,9 г)хранят в чашках Петри при 10 С 1 г.Активность при хранении уменьшаетсяна 4-6%, Выход 64,5% (от активностив биомассе), Активность препарата0,445 мккат на 1 г сухого весапрепарата.П р и м е р 3. Клетки продуцентаМ 1 сгососсцв зр.п. выращивают напитательной среде известного составав условиях аэрации. Биомассу собира -ют центрифугированием (10 000 8,15 фС, 15 мин) через 37 ч после выхода роста культуры на стационарнуюфазу,Стадия 1. 82,5...

Способ диагностики инфаркта миокарда

Номер патента: 1301381

Опубликовано: 07.04.1987

Авторы: Александров, Архипова, Корочкин, Степанова, Чукаева

МПК: A61B 10/00, C12N 9/88, C12Q 1/00 ...

Метки: диагностики, инфаркта, миокарда

...влены данные по опальдолазы типа А в тически здоровых люи различных концентние активности альдоотке крови больного Больной Д., 51 год, был доставлен в клинику с жалобами на жгучие боли за грудиной, удушье, выраженную слабость. Боли 4 за грудиной возникли впервые в жизни в день госпитализации, длительность их превышала 1 ч, эффекта от нитропрепаратов В табл. 1 предста ределению активности сыворотке крови прак дей при использовани раций субстратов.Пример 2. Определе лазы типа А в сывор инфарктом миокарда. ТХУ-фильтрата коэффициент 1 равен 1,5; затем делят на 60 (для выражения активности в 1 мин) и делят на 192 - молекулярный вес ангидрида гептулозы - моногидрата (для выражения активности в микромолях) . Отсюда активность равна Л мкгХ 0,26,...

Способ получения ферментного препарата l лизиндекарбоксилазы

Номер патента: 1433981

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Берецкене, Казлаускас, Паулюконис, Рагавичюс, Рузгене, Тарасова, Тихонов, Шебека, Янушявичюте

МПК: C12N 9/88, C12N 9/96

Метки: лизиндекарбоксилазы, препарата, ферментного

...суспензии;в которую при перемешивании приливаОют 350 мл охлажденного до +4 С ацетона, перемешивают,10 мин, фильтруютна вакуум-фильтре и высушивают на 15воздухе.Необходимые комоненты аналитической композиции в количестве 33 г ацетонированных клеток, 124,8 г натрияфосфорнокислого однозамещенного, 208,1 г фосфорнокислого двузамещенного,83,6 г растворимого крахмала, 22 гглюкозы, 2,75 г стеарата кальция перемешивают до образования однородноймассы и таблетируют на прессе ПЛТ25с пресс-инструментом 5 мм. Применяется такое давление прессования, прикотором время распадаемости таблеткиов 1 мл воды при 42 С и перемешиваниине превышало 1,0 мин, 30Значение рН образовавшейся суспензии соответствует 5,5 лизиндекарбоксилазная активность - 13...

Способ получения модифицирующих метилаз sso и sso

Номер патента: 1437394

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Грубер, Дебов, Лопатина, Никольская-Санович, Поляченко

МПК: C12N 9/88

Метки: метилаз, модифицирующих

...эа 2 дня получитьферменты с удельной активностью7000 ед/мг белка, Ферментные препараоты хранятся при -10 С в течение 12 мес,(срок наблюдения) без потери активности (см, табл, 2). При получении препаратов Ферментов по прототипу метилазная активность сохранялась в течение 1-.2 сут, активность составляла3000-4000 ед/мг белка,За единицу активности принимащтколичество фермента, необходимое дляпереноса. 1 ршо 1 метильной группы Баденозилметионина на ДНК в течение1 мин при 37 С,Активность метилаз определяетсяс помощью радиоизотопного метода.Инкубационная смесь объемом 50 мклсодержит 8-10 мкг белка, 5 мкг акцепторной ДНК и 0,5 мкКи Н-БАИ, Пробыоинкубируют 1 ч при 37 С, наносят нафильтры СР/С, осаждают 20%-ной трихлоруксусной кислотой...

Штамм грибов aspergillus flavipes продуцент тирозиназы

Номер патента: 1437395

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Багдасарьян, Гукасян, Пасоян

МПК: C12N 9/88

Метки: flavipes, аспергиллус, грибов, продуцент, тирозиназы, штамм

...не образует,Физиологические и биохимическиепризнаки, Усваивает следующие источники углерода: глюкозу, галактозу,сахароэу, мальтозу, фруктоэу, арабиноэу, ксилозу, крахмал, инулин, сорбит,манит и органические кислоты, Хорошорастет на нитритном, нитратном и ам Пример 2, С ферментного раствора яь.11 пя Г 1 ачхрея ВКПМ ют, как в примере 1. целью получениякультуру АярегРвыращиваПосле 4 сут куль. миачном азоте. Из органических источников азота ассимилируют аминокислоты. Растет в широких пределах кислотности среды (рН 2,0-9,0). Штамм нетоксичен,Исследование субстратной специфичности выделенной из штамма Аяреге 111 пя Г 1 ач 1 рея ВКПМ Ртирозиназыпоказало, что фермент окисляет следующий ряд фенолов: тирозин, п-креэол, фенол, пирокатехин,...

Штамм бактерий рsеudомоnаs species-продуцент триптофан синтазы

Номер патента: 1440923

Опубликовано: 30.11.1988

Авторы: Максимова, Олехнович, Фомичев

МПК: C12N 1/20, C12N 9/88

Метки: species-продуцент, бактерий, рsеudомоnаs, синтазы, триптофан, штамм

...0,6 х 2-3 р подвижные с 2-4 монополярными жгутиками, грамотрицательные, спор не образуют.Культуральные признаки. Колонии на агаризованнык питательных средах (мяса-пептонном агаре, Кинг В агаре) гладкие плоские круглые край ровный серовато"белые. Через 24 ч при 28 С образуют колонии размером 2- 3 мм. Рост по уколу в МПА умеренный, в основном на поверхности среды. В жидкой питательной среде образует ин тенсивную муть. Реакция на оксидазу и каталазуположительная. Реакция Фогес-Проскауэра отрицательная. Индол не образует, Тест на анаэробную аргинилдегидролазу положительный. 1 еакцияна анаэробную денитрификацию отрицательная Лецитиназная активностьотсутствует,Не гидрализует крахмал, желатину,Твин.В качестве источника углеродаиспользует...

Питательная среда для культивирования грибов рода aspergillus продуцентов тирозиназы

Номер патента: 1449577

Опубликовано: 07.01.1989

Авторы: Багдасарьян, Гукасян, Пасоян

МПК: C12N 1/14, C12N 9/88

Метки: аспергиллус, грибов, культивирования, питательная, продуцентов, рода, среда, тирозиназы

...атм 20 мин. Параллельно готовят среду Чапека и известную среду (без лигнина), Одновременно производят посев восьми штаммов иэ вггдов Г 1 ауцэ и Г 1 ачг.реп на трех средах. Культивирование осуоществляют при 29 С на качалках. Тирозиназную активность определяют по способности биомассы превращать Ь -тироэин. После определенного вре мени роста биомассу собирают фильтрацией, промывают дистиллированной водой (поглощение промывных вод при 280 нм ниже 0,01), Биомассу инкубируют с раствором тирозина в 0,01 м Ыа фосфатном буфере при аэрации при 25 С, В качестве контроля берут мицеллий в буфере. За единицу активности принимают количество фермента, который приводит к увеличению оптической плотности реакционной смеси при 280 нм на 0,001 за минуту....

Штамм бактерий viвriо наrvеyi продуцент индуцибельной l орнитин-декарбоксилазы

Номер патента: 1493669

Опубликовано: 15.07.1989

Авторы: Берецкене, Примакова, Рагавичюс, Рузгене, Фиш

МПК: C12N 1/20, C12N 9/88

Метки: viвriо, бактерий, индуцибельной, наrvеyi, орнитин-декарбоксилазы, продуцент, штамм

...На агариэованномиясопептонном бульоне с 3/.-ным ИаС 1 10колонии круглые, прозрачные, гладкие,блестящие с ровными краями. Диаметрколонии односуточной культуры - 23 мм.Физиологические свойства; штамм 15является факультативным анаэробом.Оптимальная температура роста 30 -35 С. Культура не растет при 4 С иО45 С. Восстанавливает нитраты донитритов, Реакция на оксидазу поло" 20житепьная. Выделяет хитиназу, амилаэу, липазу, желатиназу. Не способеннакапливать поли Р -оксибутират.Усваивает глюкозу, фруктоэу, галактоэу, мальтозу, сахарозу, маннит, 25глицерин. Усваивает пептон, дрожжевой экстракт, а также соли аммония,Не нуждается в органичских факторахроста. Содержит 46 мол.7. ГЦ-парв ДНК. Хемоорганотроф. Для роста и З 0лю:инесценции необходимо...

Штамм бактерий сiтrовастеr freundii для биотрансформации фумарата в l-яблочную кислоту

Номер патента: 1523569

Опубликовано: 23.11.1989

Авторы: Авсюк, Егоров, Кондратьева, Куплетская

МПК: C12N 1/20, C12N 9/88, C12P 7/46 ...

Метки: freundii, l-яблочную, бактерий, биотрансформации, кислоту, сiтrовастеr, фумарата, штамм

...лиЬо 4,95 мг белка клеток бактерий Определение Фумарат-гидратазной активности проводят известным способом. Потребление фумарата от его исходного количества в реакционной смеси составляет соответственно 52,8 ф 76,8 либо 79,24 с глубиной превращения потребленного фумарата в яблочную кислоту, равной соответственно 87,2 либо 95,3, либо 99,2 Ф,Удельная активность Фумаразы клеток С.Хгецпс 1 Ы ВКПМ 11 Вв зависимости от количества белка, содержа щегося в 1 мл реакционной смеси,соответственно равна либо 5,110 , либо 3, 7 .1 О , либо 2,610мМ на 1 мг белка зас.П р и м е р 3. Односуточные клетки 20 С.йгецпй 11 ВКПМ М Всмывают с поверхности агаризованной (1,5 Ф агара) среды из ферментолизата биомассы микроорганизмов, выросших на углеводородах (3...

Способ получения пируватдекарбоксилазы из пивных дрожжей

Номер патента: 1541255

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Баум, Гриценко, Черникевич

МПК: C12N 9/88

Метки: дрожжей, пивных, пируватдекарбоксилазы

...пируватдекарбоксилазы достигает 8,3 Е, однако присутствующие в препарате незначительные остаточные концентрации НАД Н-зависимых оксидаз приво 1541 255дят к самопроизвольному окислениюНАЛ На.Заключительную очистку проводят методами адсорбционной хроматографиина оксиапатите и ионного обмена наКМ-целлюлозе. Для достижения гомогенности 1 г грубой сульфо-аммонийной пасты растворяют в 1,5 мл0,005 М Ба-Фосфатного буфера, рН6,8 с 2 мМ Мд, 1 мМ ЭДТА, 0,5 мМтиаминдифосфатом и 5 мМ цистеингидрохлоркдом и пропускают через колонку (З,б 30 см, 48 мл/ч) с сефадексом С, уравновешенную исходнымбуфером, Значение рН и ионной силыуравновешивающего буфера подобраныэкспериментально, при которых пируватдекарбоксилаэа не связываетсяоксиапатитом и...

Штамм бактерий viвriо наrvеyi продуцент индуцибельной l лизиндекарбоксилазы

Номер патента: 1622394

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Воробьева, Рагавичюс, Рузгене, Фиш

МПК: C12N 1/20, C12N 9/88

Метки: viвriо, бактерий, индуцибельной, лизиндекарбоксилазы, наrvеyi, продуцент, штамм

...маслом. Она хорошо сохраняется в течение 2-3 лет. 25П р и м е р 1, Для получения инокулята музейную культуру ЧЬтъо Ьагчеуд 107 пересевают на питательный агар (ПЛ) с ЗХ ИаС 1 в чашки Петри и инкубируют в термостате при 30 С 24 ч.30о Оживленную культуру пересевают в пробирку на косяки ПА с ЗХ ИаС 1 и инкубируют 24 ч при 30 С. Затем культуру заливают 5 мл среды 1 1. Полученную суспенэию клеток засекают в конические колбы емкостью 250 мл со 100 мл среды И 1. Культуру .выращивают 18 ч при 30 С.Для получения биомассы ЧдЬто Ьагчеуд 107 штамм выращивают на тралици онной среде У 1 для данного вида, дополнительно добавляя кормовой лизин, как индуктор, г/л:Пелтон 10,0Кормовой лизин 8,0Глюкоза 2,0Цитрат натрия 0,65ИаС 1 30,0ИВБО 4 7 НО 0,2(ИН 4)...

Штамм бактерий рнотовастеriuм рноsрноrеuм продуцент l аргининдекарбоксилазы

Номер патента: 1678834

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Брузгулис, Примакова, Рагавичюс, Рузгене, Фиш

МПК: C12N 1/20, C12N 9/88

Метки: аргининдекарбоксилазы, бактерий, продуцент, рноsрноrеuм, рнотовастеriuм, штамм

...засевают суспензией клеток в количестве5 мл (по объему). Культуру выращивают 5012 ч. при 30 С при слабой аэрации(100 об./мин).Для получения биомассы Рп,рЬозрйогецш 189 штамм выращивают на традиционной полусинтетической для данноговида среде (Р 1, дополнительно добавляя Ь-аргинин НС 1 как индуктор), г/л:ИаС 1 30,0, МБОс ф 7 НО 0,2, КНРО1,0; ИаНРО 6,0; (ИН 4,)ИРОДА 0,5; глицерин 3 мл, пептон 10,0, Ь-аргинин НС 11,5, дистиллированная вода до 1 лрН 6,4 Ю,05,Питательную среду разливают по200 мл в качалочные колбы емкостью500 мл и стерилизуют 30 мин при0,5 атм. Стерильную питательную сре.ду засевают инокулятом - культуройРЬ.рЬозрЬогецш 189 в количестве .10(по объему), Выращивание продуцентав колбах проводят. на качалке(100 об,/мин) согласно...

Иммобилизованная аденилатциклаза чумного микроба

Номер патента: 1838409

Опубликовано: 30.08.1993

Авторы: Мишанкин, Рябухина, Шевченко

МПК: C12N 11/12, C12N 9/88

Метки: аденилатциклаза, иммобилизованная, микроба, чумного

...сефарозы С 6 В,Составитель О, ЛомовРедактор В. Трубченко Техред М. Моргентал Корректор Л, Филь Заказ 2905 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно.издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 совреОче рготеи Ыпс 3 пц сесЬпсне. Си, СЫв, Ас 1 а, 1974, ч,56, Р,221 - 224), Она составляет 2,5 ед/г. За единицу активности аденилатциклазы принимают количество наномелей цАМФ синтезированного одним мг фермента заминуту при 37 С, Количество.аденилатциклаэы, иммобилизованной на 1 г носителя равно 1,3 мг, что составляет 80 от добавленной для связывания. Иммобилиэованный фермент сохраняет 95;/, активности по отношению к нативному...