Песлякас — Автор (original) (raw)
Песлякас
Способ получения рекомбинантного альфа-2 интерферона человека
Номер патента: 1591484
Опубликовано: 20.05.1995
Авторы: Бумялис, Воробьев, Дебабов, Козлов, Коробицин, Маурицас, Парфенов, Песлякас, Петрова, Пивоваров, Радзявичюс, Ражанас, Стронгин, Янулайтис
МПК: C12N 15/21
Метки: альфа-2, интерферона, рекомбинантного, человека
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО АЛЬФА-2 ИНТЕРФЕРОНА ЧЕЛОВЕКА путем лизирования клеток Pseudomonas putida несущих рекомбинантную плазмиду, обработки полученного лизата полиэтиленимином с последующим фракционированием сернокислым аммонием и очисткой гидрофобной и иммуноаффинной хроматографией, отличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения выхода целевого продукта, клетки микроорганизмов лизируют буфером, содержащим 15-20% сахарозы, 5,0-5,5 мМ ЭДТА, 0,15 0,25 М натрия хлористого, 10,0-10,5 мМ фенилметилсульфонилфторида и 0,0045-0,0055% тиодигликоля с рН 6,7-8,2 при температуре 3-5oС, обрабатывают лизат полиэтиленимином до конечной его концентрации 0,25-0,35% гидрофобную хроматографию проводят на фенилсилохроме С-80,...
Способ получения водорастворимых сорбентов для аффинного распределения ферментов
Номер патента: 1699491
Опубликовано: 23.12.1991
Авторы: Жутаутас, Песлякас
МПК: B01D 15/08
Метки: аффинного, водорастворимых, распределения, сорбентов, ферментов
...голубой МХ-К.Производное ПЭГ 6000-Процион голубой МХ-К получают аналогично примеру 1. Выход продукта 12%, содержание красителя 205 мкмоль/г.Получение производных ПЭГ-краситель на основе полиэтиленгликоля ПЭГ 115 (мол.м. 5000, ТУ 6-14-826-72),П р и м е р 5. Получение производного ПЭГ 115-Цибакрон голубой РЗС - А.1 кг полиэтиленгликоля ПЭГ 115 растворяют н 1 л воды, добавляют МаОН 112 г, ИаБО 48 г и перемешивают до полного растворения веществ, В реакционную смесь добавляют 33 г активного красителя Цибакрон голубого РЗС - А и реакцию проводят н течение 7 ч при комнатной температуре.Полученную реакционную смесь растноряют в 30 л 2 М раствора КС 1, добавляют 600 мл 0,5 М раствора Иа 1 РО и экстрагируют с 15 л хлороформа....
Способ получения днк-полимеразы 1 еsснеriснiа coli
Номер патента: 1622393
Опубликовано: 23.01.1991
Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Гаврюченкова, Громова, Марцишаускас, Песлякас, Суджювене
МПК: C12N 9/14
Метки: днк-полимеразы, еsснеriснiа
...баню и перемеаиваютстеклянной палочкой до получениягомогенной суспенэии, Суспеиэии кле"ток обрабатывают экструзиоииьи деэинтеграторои. Обломки клеток осаждают центрифугироваиием при 10000 В 2393 Ьв течение 1 ч. Выпавщий осдлок отбрасывают, центрифугят (560 мл) используют для выделения Фермента.б) фракционнрование ферментногоэкстракта полимином 11 и сульфатомаммония. К центрифугату (1560 ил),полученному нд предьдущей стадии,при постояннои перемещивянии в течение 30 мин добавляют 203-ный растворполимина 11 (48 ил) ло конечной концентрации 0,6 г После добавления всего объема полимина 11 переиещиваниепродолжают еще 30 мин, Экстракт цент Рифугируют в течение 10 иин при5000 е. Супернатант сливают, я полученный осадок суспенлируют в 780...
Способ получения щелочной фосфатазы
Номер патента: 1576563
Опубликовано: 07.07.1990
Авторы: Дайлиденайте, Лакачаускене, Марцишаускас, Песлякас, Суджювене
МПК: C12N 9/14
...буфером.При этом фосфатаза не сорбируется и выходит острым пиком, а нуклеазные примеси сорбируются и могут быть элюированы при повышении ионной силы до 1 М КС 1. Фракции щелочной фосАатазы объединяют и концентрируют. Концентрирование конечного препа-. рата.Объединенные Фракции диализуют против 1 л 0,01 М трис-НС 1 буфера рН 7,5, содержащего 0,001 М МРС 1 , 005 М ИаС 1 и 50% глицерина (по обьему). Диализ продолжают в течение 12 ч, Препарат помещают в предварительно охо лажденную емкость и хранят при -20 С, Выход щелочной АосАатазы Е, со 11 составляет ЗЗЕ с удельной активностью 30 ед/мг белка. Ферментный препарат не содержит нуклеазных примесей и пригоден для использования в генноинженерных экспериментах и молекулярной биологии....
Способ получения большого фрагмента днк-полимеразы i еsснеriснiа coli фрагмента кленова
Номер патента: 1541256
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Марцишаускас, Пасечник, Песлякас, Суджювене, Федорова
МПК: C12N 15/00, C12N 9/00
Метки: большого, днк-полимеразы, еsснеriснiа, кленова, фрагмента
...ферментного экстракта полимином Р и сульфатом аммония. К центрифугату (215 мл), полу5 15412 ченному на предыдущей стадии, при постоянном перемешивании в течение 30 мин добавляют 107.-ный (13,7 мл) раствор полимина Р до конечной концентрации 0,67, После добавления 5 всего объема полимина перемешивание продолжают еще 30 мин. Экстракт центрифугируют в течение 15 минпри 4000 Полученный осадок используют для получения фрагмента Кленова. Фермент экстрагируют из осадка 100 мл 0,1 М калий-фосфатным буфером рН 7,0, содержащим 0,001 М /ь-меркаптоэтанол, 0,002 М ЭДТА, 0,1 М ЯаС 1. Процедуру повторяют еще раз. Супернатанты объединяют, Экстракт центрифугируют в течение 15 мин при 4000 я. К супернатанту (230 мп), медленно перемеши вая,...
Способ получения l-лизин -оксидазы
Номер патента: 1454846
Опубликовано: 30.01.1989
Авторы: Березов, Веса, Лаугалене, Песлякас, Пуоджюте, Суджювене, Тиминскене, Хадуев, Янкевич
...400 мл дистиллированной воды, 500 мл 0,1 М ЭДТА,300 мл воды, 500 мл 0,1 М карбонатом натрия и 400 мл воды,Получение бесклеточной культуральМ.ной жидкости, содержащей Ь"лизин- --оксидазу.Продуцент лизиноксидазы Тгхс 1 поЙегша Ьаггапцш ЫЕа культивируютглубинным способол на питательнойсреде следующего состава г/л: 50пшеничных отрубей и 50 НН 4 Ю, при28 С на качалке в течение 6 сут.оКлетки микроорганизмов и твсрдыеосадки отделяют центрифугированиемпри 3000 об/мин в течение 0,5 ч.В центрифугате определяют удельную1.-лизин-( -оксидазную активность,которая составляет 107 Е/мг белка(1170 мл).Осахдение примесей аммоний сульфатом,В бесклеточную культуральную жидкость в объеме 1170 мл (рН 7,1) судельной активностью 1,28 Е/мг белкапри перемешивании...
Способ получения органоминерального анионита
Номер патента: 1398901
Опубликовано: 30.05.1988
Авторы: Кадушевичюс, Маченис, Песлякас, Симутене
МПК: B01J 20/10, B01J 20/32
Метки: анионита, органоминерального
...анионита, г;В данном примере И = 79 мкмоль/г.П р и м е р 17. Все операции проводят по примеру 16, используя вкачестве растворителя метанол. Ю == 58 мкмоль/г.П р и м е р 18. Все операции проводят по примеру 16, используя в качестве растворителя толуол. М == 75 мкмоль/г.П р и м е р 19-28. Все операциипроводят по примеру 16, используяполимер различной молекулярной массы. Данные приведены в табл.З.В табл.З показана зависимостьтитруемых амнногрупп в анноннте отмолекулярной массы полимеров. При полимеризацнн н растворе в этаноле полимер также осаждают днстнллироСпособ получения органоминерально го анионита путем обработки макропо". ристого кремнезема раствором аэотсо держащего полимера при перемешивании и последующих отмывки и высушивания...
Способ получения сорбента для очистки ферментов и белков
Номер патента: 1286268
Опубликовано: 30.01.1987
Авторы: Гибиетис, Кадушевичюс, Мелнгалве, Песлякас
МПК: B01D 15/08, B01J 20/10
Метки: белков, сорбента, ферментов
...на О г носителя), добавляют 7,4 мл эфирата трехфтористого бора и реакцию проводятпо примеру 1. Концентрация лиганда всорбенте 22,3 мкмоль/г.П р и м е р 4. 70 г глицидилсилильного силохрома С, полученного попримеру 1, заливают 245 мл абсолютного диоксана, содержащего 10,5 мл фенилглицидилоного эфира (11 мМ лиганда на 10 г носителя), полученного попримеру 1, добавляют 4,9 мл (0,7 млна 10 г носителя) снежеперегнанногоэфирата трехфтористого бора и реакцию проводят по примеру 1. Концентрация лиганда в сорбенте 84,8 мкмоль/г.. П р и м е р 5. 20,5 г глицидилсилильного силохрома С, полученногопо примеру 1, заливают 102,5 мл 5 мМраствором НС 1 и эпоксигруппы носителя гидролизуют до диольных перемешинанием суспензии 2 ч при...
Способ получения альбумина
Номер патента: 1113125
Опубликовано: 15.09.1984
Авторы: Глемжа, Кадушявичюс, Котова, Ляхова, Мигунов, Песлякас, Позина, Суджювене
МПК: A61K 35/14
Метки: альбумина
...а именно к способам получения альбумина из сыворотки плацентарной крови и может быть использовано в вакцинно-сывороточном производстве.Известен способ получения алъбумина путем фракционирорания сыворотки плацентарной крови этиловым спиртом при отрицательных температурах 110Недостатком этого способа получения альбумина является значительное содержание в препарате гонадотропного гормона - хорионического гонадотропина. 15Цель изобретения - повышение степени очистки целевого продукта от хорионического гонадотропина.Указанная цель достигается тем, что согласно способу получения аль бумина из плацентарной сыворотки путем многократной обработки этанолом на холоду и центрифугирования, центрифугат после второго осаждения этанолом обрабатывают...
Способ получения сорбента для очистки белков
Номер патента: 1061828
Опубликовано: 23.12.1983
Авторы: Кадушявичюс, Песлякас, Суджювене
МПК: B01D 15/08
...водой и высушивают. Количество присоединенного декстрана состав-.ляет 92,1 мг/г носителя.Присоединение активного красителя красно-коричневого 2 КТ к декстраном модифицированноглу силохрому 40СХ,5.К 20,0 г силохрома СХ,5, модифицированного декстраном 80000,прибавляют 50 мл воды, температурусмеси поднимают до 60 С и при перемешивании прибавляют раствор 1,65 гкрасителя, например, красно-коричневого 2 КТ в 140 мл воды, Перемешивание продолжают в течение 0,5 ч,после чего прибавляют 20,8 г хлористого натрия и реакционную смесь перемешивают при 60 С в течение 1 ч.Температуру смеси поднимают до 80 оС,прибавляют 1,8 г натрия углекислогои перемешивают при 80 С в течение 552,5-3 ч. Продукт реакции отфильтровывают и промывают водой до прекг 1...
Способ получения сорбента для очистки белков
Номер патента: 1060217
Опубликовано: 15.12.1983
Авторы: Башкевичюте, Глемжа, Гумаускайте, Кадушявичюс, Песлякас, Суджювене, Флаксайте
МПК: B01J 20/22
...используют аминопропилсилохроммы Сили СХ,5, модифицированные глутаровым альдегидом или водорастворимыми полисахаридами.Использование в качестве лигандов ароматических азосоединений,которые содержат в своей структуре реакционноспособные винилсульфоновые группировки, позволяет получать сорбенты с высокой устойчивостью к кислым значениям рН за счет образования связи между винилсульфоновой группировкой и носителем. Наличие иона меди с одной стороны повышает устойчивость связи лиганд-носитель, с другой стороны ион меди является дополнительным центром селективности по отношению белков или ферментов, что в свою очередь расширяет области использования сорбентов, включая Ферменты класса оксндо-редуктаз, трансфераз, обмена нуклеиновых кислот и...
Способ получения сорбента
Номер патента: 979354
Опубликовано: 07.12.1982
Авторы: Гумаускайте, Кюдулас, Лауцюс, Песлякас, Суджювене, Флаксайте
МПК: C07F 7/18
Метки: сорбента
...вымыго 0,2-0,3 БаВН 4,в течение 2 ч водой. вают балластные белки; Активная гекК влажному модифицированному стеклу сокиназа десорбируется линейным граприбавляют 10 мл воды и при пере- диентом хлористого натрия от 0 мешивании при 60 С вводят по каплям 35 1,0 М в исходном буФере, Удельная акраствор 660, 1 мг (613,9 мкМ) ци-тивность гексокинаэы после десорбциибакРон голУбого Рз СА, Далее Реакцию 82,0 ед/мг белка, выход по активноспроводят по примеру 1, но количество ти 100. Емкость сорбента 225 ед/мл.прибавляемых БаС 6 и НаСОЗсоотве П р н м е р Зб. В хроматографивенно 5,5 г и 493 мг. о ц р цческую колонку (как в примере 3) эаон гол бого 25 мкМ/г сухогогружают 1,0 мл сорбента, полученного сорбента.по примеру 1 при использовании 50 п е...
Способ очистки дрожжевой гексокиназы
Номер патента: 874754
Опубликовано: 23.10.1981
Авторы: Веса, Глемжа, Песлякас, Суджювене, Травкина
МПК: C12N 9/00
Метки: гексокиназы, дрожжевой
...Паневежеского опытного спиртового завода, базовый препарат дрожжевой.гексокиназы удельной активностью 30-40 ед/мг фирмы "Флука" ( Швейцария), Сг 2(С 04)36 Н 10, янтарную, уксусную и борную кислоты, натрий уксуснокислый, натрий тетраборнокислый и натрий хлористый,П р и м е р 1, Получение сорбента. В круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, вводят5, 0 г сульфата хрома (1 Н ) С г 1 ( 5 04 )ххбн 10 800 мл 0,1 М ацетатного буферного раствора рН 5,6 и 10,0 гфосфатцеллюлозы(ОЗХР). Содержимоеколбы перемешивают в течение 20-24 ч.По окончании реакции сорбент отфильтронынают, промывают водой, 0,1 Мраствором янтарной кислоты для удаления избыточного хрома (И),Концентрацию ионов хрома 00) в сорбенте определяют из разницы его...
Способ получения сорбента для очистки дрожжевой гексокиназы
Номер патента: 857145
Опубликовано: 23.08.1981
Авторы: Веса, Глемжа, Песлякас, Суджювене, Травкина
МПК: C08B 37/00
Метки: гексокиназы, дрожжевой, сорбента
...до полного отсутствия сорбции на незаряженной ионами с+ ФосФатделлюлОзеС ДРУГОЙ стОРоныр пРи дальнейшем увеличении концентрации ионов хрома выше 800 мкИ/г сорбентапроисхоцит необратимая сорбция Фермента. П р и и е р 2. Очистка дрожжевойГЕКСОКИНаЭЫда) 2,0 г комплекса Фосфатцелллюлозы с ионами хрома (111) загружают в хроматографическую колонку (1 х 20 см) уравновешивают 5 МИ сукцинатиым буФерным раствором рН 6,0, содержащим 05 мИ ЭДТЛ и наносят 4,0 им Фермент- ного раствора дрожжевбй гексокиназы фирмы "Флука" (Швейцария). Концентрация белка 145 мг/мл, удельная активность 28,0 ед/мг белка. При злюции 330 мл исходного буФерного раствора рН 6,0 вымываются балластные белки.Элюирование активной гексокиназы про Водят градиентом...
Способ получения сорбента длявыделения и очистки сериновыхпротеаз
Номер патента: 798109
Опубликовано: 23.01.1981
Авторы: Бендикене, Веса, Глемжа, Песлякас
МПК: C08B 37/08
Метки: длявыделения, сериновыхпротеаз, сорбента
...бензилированияхитина обеспечивают, протекание реакциийо аминогруппам хитина (60-90 мкм/г) ив значительной степени снижают возможность присоединения бензильных остатковпо гидроксильным группам носителя, причем бензилирование хитина происходит вусловиях, обеспечивающих сохранение вхитине связи между его полисахариднойи белковой частью, ответственной, в качестве одного из сорбционных центров,за избирательность сорбции сериновыхпротеаз.Для синтеза сорбента и его применения для выделения, разделения и очисткисериновых протеаз из различных источников используют лабораторную аппаратуру для синтеза сорбентов, хроматографические колонки, ФЭК, Сф.П р и м е р 1. Синтез сорбента осуществляют следующим образом,Хитин (ч. МРГУ 6-09-5113-63)...
Способ выделения гексокиназы из пекарских дрожжей
Номер патента: 771112
Опубликовано: 15.10.1980
Авторы: Алишевичене, Веса, Глемжа, Купятис, Песлякас
МПК: C07G 7/02
Метки: выделения, гексокиназы, дрожжей, пекарских
...концентрации аминогрупп,Описываемый способ выделения дрожжевой гексокиназы обеспечивает посравнению с существующими способамиследующие преимущества,"повышение в 2-3 раза выходаактивного фермента, что приводит кснижению себестоимости целевого продукта,двукратное повышение удельнойактивности выделяемого Фермента, чтопривоцит к снижению затрат на дальнейшие стадии доочистки Фермента,сокращение времени процесса выделения Фермента в два раза, чтоважно при получении препаративныхколичеств Ферментов в промышленныхмасштабах. 50 Преимуществом описываемого способа является также то, что исключаются те стадии очистки Фермента, которые обуславливают низкий выход фермента, так как по своей сущности они дейстуют на нативную структуру фермента,...
Способ выделения и очистки трипсина и химотрипсина
Номер патента: 767121
Опубликовано: 30.09.1980
Авторы: Бендикене, Берзиня-Берзите, Веса, Глемжа, Кирсе, Песлякас
МПК: C07G 7/02
Метки: выделения, трипсина, химотрипсина
...наполненную 10,63 г2 О й-бенэилхитина, уравновешивают 0,002 М раствором Са(СНэСОО)э рН 7,0 и наносят 50 мл раствора медицинского панкреатина в 0,002 М Са(СНэСОО)э рН 7,0 концентрацией белка2,6 мг/мл общей протеолитической активностью0,15 казеиновых единиц на 1 мг белка (каз. ед/мг). Скорость течения элюента 40 мл/ч.После нанесения раствора медицинского панкреатина колонку промывают начальным буфером (0,002 М Са(СНэСОО)эрН 7,0) до отрицательной реакции на белок. После чего через колон. ку пропускают 0,5 М раствор йаС в 0,002 М Са(СНэСОО)э рН 7,0 до отрицательной реакции на белок (около 100 мл), Фракции с протеолитической активностью собирают, общий объем 60 мл, концентрация белка 0,87 мг/мл, получают 522 мг трипсина с активностью 0,10...
Способ получения сорбента для выделения и очистки сериновых протеаз
Номер патента: 721449
Опубликовано: 15.03.1980
Авторы: Бендикене, Веса, Глемжа, Палубинскас, Песлякас
МПК: A61K 38/46
Метки: выделения, протеаз, сериновых, сорбента
...при его использовании предлагаемый способ является перспективным, дешевым для применения в крупномасштабном производстве. Предлагаемый способ приготовления хитина позволяет повысить сорбционную емкость сериновых протеаэ, при этом удельная активность сериковых протеаз за одну стадию сорбции-десорбции повышается в 4-5 раэ. Выходы по белку и активности составляют 80-100%.По сущности процесса сорбции сериковых протеаз приготовленный предлагае мым способом хитин является аффинным сор 6 ентом. 9 4П р и м е р 1. Обработка хитина.Хитип (ч.МРТУ 6-09-5 113-68) измельчают, просеивают через набор сит, отбирают фракции с размером частиц 0,3 мм, обрабатывают при комнатной температуре 6 н. НС 1 до прекращения выделения СО .:., перемешивая...