Western blot (original) (raw)
Western Blot (Westernblot) bezeichnet die Übertragung (engl. Blotting) von Proteinen auf eine Trägermembran, die anschließend über immunologische Reaktionen nachgewiesen werden können. Die Übertragung kann auf unterschiedliche Weise durchgeführt werden: mittels Diffusion, Kapillarwirkung oder Elektrophorese. Anwendung findet der Western Blot in der biochemischen und medizinischen Forschung sowie in der Diagnostik, wodurch er zu den meistverwendeten proteinanalytischen Methoden gezählt wird. Der Western Blot gehört zur Gruppe der Immunblots.
| Property | Value |
|---|---|
| dbo:abstract | في التقنيات الحيوية، لطخة ويسترن (بالإنجليزية: Western Blot) (تعرف أيضا باللطخة المناعية Immunoblot) هي طريقة اكتشاف بروتين معين في عينة أو مستخلص أنسجة، وهي من التقنيات الحيوية المخبرية. تستخدم الفصل الكهربائي للهلام لفصل البروتينات الطبيعية native proteins أو denatured proteins حسب طول السلاسل البروتينية (ظروف مفككة) أو حسب الشكل الثلاثي الأبعاد للبروتين (ظروف قومية/غير مفككة). يتم، في ما بعد، نقل البروتينات إلى غشاء (عادة ما يكون الغشاء مصنوعا من مادة النيتروسيليلوز أو ثنائي فلوريد متعدد الفينيليدين)، حيث يتم التحقق (الاكتشاف) باستخدام أضداد مخصصة للبروتين الهدف. هناك الآن العديد من شركات المواد التي تتخصص في تجهيز أضداد (مستنسخة ومتعددة النسائل) ضد آلاف البروتينات المختلفة. وقد قام هذا بتقليل الوقت الذي تحتاجه لعمل لطخة بصورة كبيرة. كان يجب، سابقًا، تلقيح الحيوانات الكبيرة (مثل: الخرفان، العنز - يحتويان على الكثير من المصل) بالبروتين المستهدف مرتين (حيث أن الاستجابة المناعية الثانية تنتج أضدادا أكثر). ومن ثم إما يتم تصفية المصل واستخدامه (أضداد متعددة النسائل - Polyclonal -) أو يمكن فصل الخلايا البائية من الحيوان ودمجها خارج الجسم in vitro مع خلايا فأر سرطانية لتوليد خلايا هيبريدوما التي تستطيع في ما بعد إنتاج أضداد وحيدة النسيلة (Monoclonal). الأضداد التجارية عادة ما تكون مكلفة، ولكن يمكن إعادة استخدامها (استخدام ما يتبقى من الأجسام المضادة غير الملتصقة) بين التجارب. هذه الطريقة تستخدم في الأحياء الجزيئية والكيمياء الحيوية وعلم الجينات المناعية Immunogenetics وعدد آخر من علوم الأحياء الجزيئية. من التقنيات الأخرى المتعلقة هي استخدام الأجسام المضادة لاكتشاف البروتينات في الأنسجة أو الخلايا باستخدام Immunostaining والإلايزا ELISA. تم صنع هذه الطريقة في مختبر جورج ستارك في جامعة ستانفورد عام 1981. قام وولتر نيل بورنيت بتسميتها باسم «لطخة ويسترن»،وهو مشتق من اسم (Southern Blot بالإنكليزية، من Southern وهي نسبة إلى إدون ساذرن Edwin Southern، والتي تعني أيضا الجنوبي بالإنكليزية. فسميت التقنية الجديدة بـويسترن، تلاعبا بالمعنى). تقنية لاكتشاف الحمض الريبي النووي منقوص الأكسجين DNA، قام إدون ساذرن Edwin Southern بصنعها عام 1975. تسمى طريقة اكتشاف الحمض الريبي النووي RNA باسم . (ar) El western blot (de vegades anomenat proteïna immunoblot ), o western blot, és una tècnica analítica àmpliament utilitzada en biologia molecular i immunogenètica per a detectar proteïnes específiques en una mostra d'homogeneïtzació o extracte de teixits. En resum, la mostra experimenta una desnaturalització de proteïnes, seguida d'una electroforesi en gel. A sintètic o d'origen animal anticòs (conegut com el anticòs primari ) es cregui que reconeix i s'uneix a una proteïna diana específica. La membrana d'electroforesi es renta en una solució que conté l'anticòs primari, abans que es renti l'excés d'anticòs. S'afegeix un anticòs secundari que reconeix i s'uneix a l'anticòs primari. L'anticòs secundari es visualitza mitjançant diversos mètodes com la tinció, la immunofluorescència i la radioactivitat, cosa que permet la detecció indirecta de la proteïna diana específica. Altres tècniques relacionades inclouen l'anàlisi de transferència de punts, la transferència quantitativa de punts, la immunohistoquímica i la immunocitoquímica, on s'utilitzen anticossos per detectar proteïnes en teixits i cèl·lules mitjançant immunotinció i assaig d'immunosorbents lligats a enzims (ELISA). El nom de western blot és un joc de paraules amb Southern blot, una tècnica per a la detecció d'ADN que porta el nom del seu inventor, el biòleg anglès . De la mateixa manera, la detecció d'ARN es denomina Northern Blot. W. Neal Burnette va donar el terme "western blot" el 1981, encara que el propi mètode es va originar el 1979 al laboratori de Harry Towbin a l' de Basilea, Suïssa. Entre el 1979 i el 2019 "s'ha esmentat als títols, resums i paraules clau de més de 400.000 publicacions llistades a PubMed " i pot continuar sent la tècnica d'anàlisi de proteïnes més utilitzada. (ca) Western blot (v české literatuře též označovaný jako imunoblot) je analytická technika používaná k detekci specifického proteinu ve směsi s dalšími proteiny, např. ve vzorku homogenátu tkáně či jiného biologického vzorku. Využívá gelovou elektroforézu k separaci proteinů podle jejich velikosti (denaturující SDS-PAGE), popř. podle jejich celkové trojrozměrné struktury (nativní elektroforéza). Následně jsou proteiny přeneseny („přeblotovány“) z gelu na povrch membrány (nejčastěji nitrocelulosové či ), na jejímž povrchu jsou detekovány specifickými protilátkami. Touto metodou se v praxi diagnostikuje řada infekčních onemocnění člověka a zvířat. Oproti běžným sérologickým metodám jako je ELISA, je Western Blot sice časově náročnější a dražší, ale zato přesnější (větší specifičnost). Metoda dostala své jméno Western blot jako slovní hříčka na podobnou metodu Southern blot používanou k detekci DNA a vyvinutou dříve Edwinem Southernem. (cs) Western Blot (Westernblot) bezeichnet die Übertragung (engl. Blotting) von Proteinen auf eine Trägermembran, die anschließend über immunologische Reaktionen nachgewiesen werden können. Die Übertragung kann auf unterschiedliche Weise durchgeführt werden: mittels Diffusion, Kapillarwirkung oder Elektrophorese. Anwendung findet der Western Blot in der biochemischen und medizinischen Forschung sowie in der Diagnostik, wodurch er zu den meistverwendeten proteinanalytischen Methoden gezählt wird. Der Western Blot gehört zur Gruppe der Immunblots. (de) Proteina trimoo (P-trimoo) estas uzata por detekti proteinon specifan en samplo helpe de antikorpoj specifaj al tiu proteino. Tiu tekniko ankaŭ provizas informojn pri la grandeco de la proteino. (eo) El Western blot, inmunoblot o electrotransferencia, es una técnica analítica usada en biología celular y molecular para identificar proteínas específicas en una mezcla compleja de proteínas, tal como la que se presenta en extractos celulares o de tejidos. La técnica utiliza tres etapas para lograr esto: separación por tamaño, transferencia a un soporte sólido y, finalmente, visualización mediante la marcación de proteínas con el uso de anticuerpos primarios o secundarios apropiados. Esta técnica es hoy en día imprescindible en varios campos de la biología, como la biología molecular, la bioquímica, la biotecnología o la inmunología. Mediante una electroforesis en gel se separan las proteínas atendiendo al criterio que se desee: peso molecular, estructura, hidrofobicidad, etc. Hay casi tantas posibilidades como tipos de electroforesis existen. Luego son transferidas a una membrana adsorbente (típicamente de nitrocelulosa o de PVDF) para poder buscar la proteína de interés con anticuerpos específicos contra ella. Finalmente, se detecta la unión antígeno-anticuerpo por actividad enzimática o fluorescencia, entre otros métodos. De esta misma forma se puede estudiar la presencia de la proteína en el extracto y analizar su cantidad relativa respecto a las otras proteínas. La técnica «Western blot» fue desarrollada en la Universidad de Stanford. El nombre (Western, occidental en inglés) le fue dado por , y consiste en un juego de palabras con una técnica análoga pero que usa ADN, el Southern (sureño en inglés) blot, que en este caso debe su nombre a su descubridor, . Otras técnicas que fueron nombradas siguiendo este criterio son el Northern (norteño en inglés) (en el que se separa e identifica ARN), el Eastern (oriental en inglés) blot y el Southwestern (del suroeste en inglés) blot. (es) Le western blot (également appelé transfert de protéines ou buvardage de western ou encore technique des immuno-empreintes), est une méthode de biologie moléculaire permettant la détection et l'identification de protéines spécifiques dans un échantillon biologique (sérum ou autre extrait ou tissulaire) à l'aide d'anticorps dirigés contre ces protéines que l'on souhaite détecter. Le western blot permet ainsi de visualiser des protéines particulières dans un mélange complexe. C'est l'une des techniques analytiques de transfert sur membrane utilisées en biochimie et en biologie moléculaire. Elle est parfois utilisée comme un outil de diagnostic complémentaire pour mettre en évidence une protéine particulière (protéine virale, par exemple) dans le sérum d'un patient. (fr) Blot Western adalah sebuah metode untuk mendeteksi protein pada sampel jaringan. Imunoblot menggunakan elektroforesis gel untuk memisahkan protein asli atau perubahan oleh jarak polipeptida atau oleh struktur 3-D protein. Protein tersebut dikirim ke membran, di mana mereka dideteksi menggunakan antibodi untuk menargetkan protein. (in) ウェスタンブロッティング (Western blotting; WB) は電気泳動によって分離したタンパク質を膜に転写し、任意のタンパク質に対する抗体でそのタンパク質の存在を検出する手法。別名ウェスタンブロット法(Western blot analysis)。サザンブロッティング（南）、ノーザンブロッティング（北）の流れから、半ばジョークで命名されている（ちなみに様々な手法に「イースタン」と名付けられているが、確立したものはない）。前二者は核酸どうしの相補性を利用しているが、本法は抗体の特異性によって目的のタンパク質分子を区別している。よってイムノブロット (immunoblot; IB) とも呼ばれる。生命科学の研究者の間では、単に「ウェスタン」といえばこれを指す。 (ja) The western blot (sometimes called the protein immunoblot), or western blotting, is a widely used analytical technique in molecular biology and immunogenetics to detect specific proteins in a sample of tissue homogenate or extract. Western blot technique uses three elements to achieve its task of separating a specific protein from a complex: separation by size, transfer of protein to a solid support, and marking target protein using a primary and secondary antibody to visualize. A synthetic or animal-derived antibody (known as the primary antibody) is created that recognizes and binds to a specific target protein. The electrophoresis membrane is washed in a solution containing the primary antibody, before excess antibody is washed off. A secondary antibody is added which recognizes and binds to the primary antibody. The secondary antibody is visualized through various methods such as staining, immunofluorescence, and radioactivity, allowing indirect detection of the specific target protein. Other related techniques include dot blot analysis, quantitative dot blot, immunohistochemistry and immunocytochemistry, where antibodies are used to detect proteins in tissues and cells by immunostaining, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The name western blot is a play on the Southern blot, a technique for DNA detection named after its inventor, English biologist Edwin Southern. Similarly, detection of RNA is termed as northern blot. The term "western blot" was given by W. Neal Burnette in 1981, although the method itself was independently invented in 1979 byJaime Renart, Jakob Reiser, and George Stark in Stanford, and by Harry Towbin, Theophil Staehelin, and Julian Gordon at the Friedrich Miescher Institute in Basel, Switzerland. Between 1979 and 2019 "it has been mentioned in the titles, abstracts, and keywords of more than 400,000 PubMed-listed publications" and may still be the most used protein-analytical technique. (en) 웨스턴 블롯(영어: western blot) 또는 단백질 면역 블롯(영어: protein immunoblot)은 샘플에서 특정 단백질을 검출하기 위해 사용하는 분자생물학 기술이다. 웨스턴 블롯의 방법은 다음과 같다. 먼저 샘플들을 단백질 변성 후 젤 전기 영동을 거친다. 그 후 전달 과정을 거쳐 막에 단백질을 이동시킨 뒤, 1차 항체와 2차 항체에 노출시킨다. 1차 항체는 단백질이 항원이 되고, 2차 항체는 1차 항체가 항원이 되는 원리를 이용한다. 이렇게 결합된 2차 항체는 염색, 면역 형광법, 방사능 등을 이용하여 표적 단백질을 간접적으로 확인할 수 있다. 다른 관련 기술로는 도트 블롯 분석, 정량적 도트 블롯, 면역조직화학, 면역세포화학이 있다. 항체는 면역 염색을 통해 조직과 세포의 단백질을 검출하는 데 사용되며 효소결합면역흡착검사(ELISA)가 있다. 웨스턴 블롯이라는 이름은 영국의 생물학자 에드윈 서던의 이름을 따서 만들어졌다. 그는 DNA 검출 기술인 서던 블랏을 개발했는데, 이는 동(East), 서(West), 남(South), 북(North)를 이용하여 이름이 정해졌다. (ko) Il western blot o immunoblot è una tecnica biochimica che permette di identificare una determinata proteina in una miscela di proteine, mediante il riconoscimento da parte di anticorpi specifici; in generale, per facilitare il riconoscimento, la miscela di proteine viene prima separata in base alle loro dimensioni (o peso molecolare) utilizzando un gel di poliacrilammide (ma esistono variazioni quali il dot blot o slot blot, in cui la miscela proteica non viene separata in base alle dimensioni, ma ci si affida alla selettività antigene/anticorpo); successivamente le proteine vengono trasferite su un supporto, che comunemente è una membrana di nitrocellulosa, e quindi si procede al riconoscimento vero e proprio della proteina mediante l'utilizzo di un anticorpo specifico. Recentemente sono state messe a punto tecniche che permettono il riconoscimento antigene/anticorpo direttamente nella matrice del gel, evitando quindi il trasferimento su membrana. Questa tecnica si usa quando il campione è composto da una miscela di moltissime proteine tali che con una colorazione standard (blu di Coomassie o nitrato di argento) non si riuscirebbe a distinguerle l'una dall'altra, oppure quando, pur avendo bande ben distinte (discrete), la proteina di interesse è in quantità troppo basse per essere visualizzata con altre tecniche. Infatti il western possiede tre passaggi in cui avviene l'amplificazione del segnale, ciò rende visibili anche decimi di picomole (10−12mol) di proteina. (it) Western blot, western blotting, immunoblotting – metoda stosowana w biologii molekularnej służąca do wykrywania określonych białek. Technika ta obejmuje przygotowanie próbek z mieszaniną białek, elektroforezę, przeniesienie rozdzielonych białek z żelu na membranę, inkubację z odpowiednimi przeciwciałami i detekcję pożądanego białka. (pl) Een western blot is een biochemische techniek waarmee een specifiek eiwit in een mengsel van eiwitten door middel van antilichamen gedetecteerd kan worden. In het algemeen worden de eiwitten in het eiwitmengsel (bijvoorbeeld een cel) eerst gescheiden op basis van hun grootte of beter gezegd, moleculair gewicht door middel van een SDS-PAGE (gel-elektroforese). Vervolgens worden de eiwitten die gescheiden zijn op grootte van de gel "overgebracht" naar een nitrocellulose- of PVDF-membraan waar ze vervolgens aan hechten. Dit proces wordt blotten genoemd. De Western Blot wordt gebruikt in biochemisch en medisch onderzoek en in diagnostiek. De Western Blot behoort tot de groep van de . (nl) Western blot, WB, även immunoblot, är en vanlig molekylärbiologisk metod som används inom proteinkemin för att detektera och identifiera specifika proteiner med hjälp av antikroppar. Western blot används i princip vid alla laboratorier som bedriver biomedicinsk och biomolekylär forskning, men även vid klinisk medicinsk diagnostik i vissa sammanhang. Termen är bildad i analogi med Southern blot, som är en liknande metod för att detektera DNA. (sv) O western blot (por vezes chamado imunoblot de proteínas ou transferência western) é um método em biologia molecular e bioquímica para detectar proteínas numa amostra de homogenato (células bem trituradas) de tecidos biológicos ou estratos. Essa técnica usa eletroforese em gel para separar as proteínas nativas pela sua estrutura tridimensional ou proteínas desnaturalizadas pelo comprimento da sua cadeia polipeptídica. As proteínas são então transferidas do gel para uma membrana (tipicamente de nitrocelulose ou PVDF), sendo uma técnica de ou transferência. Uma vez na membrana são usados como sonda anticorpos específicos para a proteína alvo. A passagem de electroforese em gel é incluída nas análises de western blot para resolver o problema da dos anticorpos. Como resultado, os pesquisadores podem examinar a quantidade de proteína em uma dada amostra e comparar os níveis entre diversos grupos. O nome Western blot é um trocadilho do nome Southern blot, uma técnica para detecção de DNA desenvolvida anteriormente por Edwin Southern. Também há uma técnica chamada Northern blot que serve para a detecção de RNA. (pt) Вестерн-блот (англ. Western blot) — лабораторний метод, який ґрунтується на реакції антиген—антитіло і застосовується для визначення специфічних протеїнів в екстрактах клітин або тканин, попередньо фракціонованих за допомогою гелевого електрофорезу та перенесені, в переважній більшості випадків, на нітроцелюлозну або PVDF-мембрану. Трансфер протеїнів із гелю на мембрану дозволяє інкубувати їх з певним антитілом та виконати подальшу візуалізацію отриманих бендів. Інколи цей метод називають імунний блотинг. (uk) 西方墨點法（英語：Western blot）或稱「蛋白質轉漬法」、「免疫墨點法」（immunoblot）或「西式吸印雜交」，是在分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，也是HIV檢測的方法之一。 利用特定抗體能夠專一結合其抗原蛋白質的原理來對樣品進行着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息，來分析檢測特定蛋白質的生物學檢測技術。 发明者一般认为是美国斯坦福大学的乔治·斯塔克（George Stark）。在尼尔·伯奈特（Neal Burnette）于1981年所著的《分析生物化学》（Analytical Biochemistry）中首次被称为“Western印迹法”。 (zh) Вестерн-блоттинг (вестерн-блот, белковый иммуноблот, англ. Western blot) — аналитический метод, используемый для определения в образце специфичных белков. На первом этапе используют электрофорез белков в полиакриламидном геле для разделения денатурированных полипептидов по длине (как правило, в присутствии SDS) или по трехмерной структуре белка (в нативном состоянии). Далее белки переносят на нитроцеллюлозную или PVDF-мембрану, затем детектируют с использованием антител, специфичных к заданному белку. Существует множество коммерческих компаний, специализирующихся на производстве антител (как моноклональных, так и поликлональных) к десяткам тысяч различных белков. Вестерн-блоттинг используется в молекулярной биологии, биохимии, генетике и в других естественно-научных дисциплинах. Другие сходные методы используют антитела для определения белков в тканях и клетках посредством иммуноокрашивания и иммуноферментного анализа (ИФА, англ. ELISA). Вестерн-блоттинг был разработан в лаборатории Джорджа Старка (англ. George Stark) в Стэнфорде. Название «вестерн-блот» технике было дано У. Нейлом Бурнеттом (англ. W. Neal Burnette) и является игрой слов от названия «Саузерн-блоттинг», — методики определения ДНК, разработанной ранее Эдвином Саузерном. Аналогичный метод определения РНК называется нозерн-блоттингом, детекция посттрансляционных модификаций белков — (англ. Eastern blotting). (ru) |
| dbo:thumbnail | wiki-commons:Special:FilePath/Anti-lipoic_acid_immunoblot.png?width=300 |
| dbo:wikiPageExternalLink | http://sciugo.com https://ghostarchive.org/varchive/youtube/20211211/BguNIPiCmv8 https://ghostarchive.org/varchive/youtube/20211211/VgAuZ6dBOfs https://web.archive.org/web/20140517033848/http:/www.youtube.com/watch%3Fv=VgAuZ6dBOfs https://web.archive.org/web/20181210024526/https:/www.youtube.com/watch%3Fv=BguNIPiCmv8 https://www.youtube.com/watch%3Fv=BguNIPiCmv8&t=108s https://www.youtube.com/watch%3Fv=VgAuZ6dBOfs |
| dbo:wikiPageID | 174030 (xsd:integer) |
| dbo:wikiPageLength | 41551 (xsd:nonNegativeInteger) |
| dbo:wikiPageRevisionID | 1124657111 (xsd:integer) |
| dbo:wikiPageWikiLink | dbr:Protein_production dbr:Proteins dbr:PubMed dbr:Electroblotting dbr:Electrophoretic_mobility dbr:Powdered_milk dbr:Polyclonal_antibodies dbr:Basel dbr:Biochemistry dbr:Biotin dbr:Blood_plasma dbr:Hydrogen_peroxide dbr:Cyanine dbc:Diagnostic_virology dbr:DNA dbr:Voltage dbr:Dot_blot dbr:ELISA dbr:Eastern_blot dbr:Mass_spectrometry dbr:KDa dbr:Northern_blot dbr:Northwestern_blot dbr:Western_blot_normalization dbr:Coomassie_brilliant_blue dbr:Analytical_technique dbr:Chemiluminescence dbr:Gel_electrophoresis dbr:Edwin_Southern dbr:Enzyme dbr:Epicocconone dbr:Friedrich_Miescher_Institute_for_Biomedical_Research dbr:GIMP dbr:George_Stark dbr:Bovine_serum_albumin dbr:Bovine_spongiform_encephalopathy dbr:Cross-reactivity dbr:Protein_tags dbr:Antibody dbr:Lyme_disease dbr:Stanford dbr:Staphylococcus dbr:Cloning dbr:Densitometry dbr:Horseradish_peroxidase dbr:Peroxidase dbr:Post-translational_modification dbr:SDS-PAGE dbr:Spectrophotometry dbr:Staining dbr:Tris-buffered_saline dbr:Primary_and_secondary_antibodies dbr:Synthetic_antibody dbr:Triton_X-100 dbr:Tularemia dbr:HIV dbr:Acrylamide dbr:Adobe_Illustrator dbr:Alkaline_phosphatase dbr:Amido_black_10B dbc:Molecular_biology dbc:Molecular_biology_techniques dbr:FIV dbr:Nitrocellulose dbr:Normalization_(statistics) dbr:Capillary_action dbr:Far-eastern_blot dbr:Far-western_blot dbr:Fast_parallel_proteolysis dbr:Isoelectric_point dbr:Two-dimensional_gel_electrophoresis dbr:HIV_test dbc:Laboratory_techniques dbc:Protein_methods dbr:Blood_doping dbr:Switzerland dbr:Polyacrylamide dbr:Ponceau_S dbr:Sodium_dodecyl_sulfate dbr:Hybridoma dbr:Microsoft_PowerPoint dbr:World_Anti-Doping_Agency dbr:Luminescence dbr:Tween_20 dbr:Immunocytochemistry dbr:Immunofluorescence dbr:Immunogenetics dbr:Immunohistochemistry dbr:Immunostaining dbr:Molecular_biology dbr:ELISPOT dbr:Molecular_weight dbr:Variant_Creutzfeldt–Jakob_disease dbr:Southern_blot dbr:Enzyme-linked_immunosorbent_assay dbr:PVDF dbr:Polyvinylidene_difluoride dbr:Quantitative_dot_blot dbr:Isoforms dbr:Primary_antibody dbr:File:SDS-PAGE_Electrophoresis.png dbr:File:Anti-lipoic_acid_immunoblot.png dbr:4-chloronaphthol dbr:Dilution_series dbr:File:Blotautoradiogram.png dbr:File:Western_Blot_binding.png dbr:File:Western_blot_chemiluminescent_detection.png dbr:File:Western_blot_transfer.png |
| dbp:by | no (en) |
| dbp:colwidth | 30 (xsd:integer) |
| dbp:label | Western immunoblotting (en) |
| dbp:lcheading | Western immunoblotting (en) |
| dbp:onlinebooks | no (en) |
| dbp:refs | Mahmood T, Yang P-C. Western Blot: Technique, Theory, and Trouble Shooting. North American Journal of Medical Sciences. 2012;4:429-434. doi:10.4103/1947-2714.100998. (en) |
| dbp:wikiPageUsesTemplate | dbt:Protein_methods dbt:Cbignore dbt:Citation_needed dbt:Cite_journal dbt:Cite_web dbt:Commonscat dbt:Distinguish dbt:Main dbt:Portal dbt:Reflist dbt:Short_description dbt:Library_resources_box dbt:Molecular_probes |
| dcterms:subject | dbc:Diagnostic_virology dbc:Molecular_biology dbc:Molecular_biology_techniques dbc:Laboratory_techniques dbc:Protein_methods |
| rdf:type | owl:Thing yago:WikicatBiochemistryMethods yago:WikicatLaboratoryTechniques yago:WikicatMolecularBiologyTechniques yago:Ability105616246 yago:Abstraction100002137 yago:Cognition100023271 yago:Know-how105616786 yago:Method105660268 yago:PsychologicalFeature100023100 yago:Technique105665146 yago:WikicatProteinMethods |
| rdfs:comment | Western Blot (Westernblot) bezeichnet die Übertragung (engl. Blotting) von Proteinen auf eine Trägermembran, die anschließend über immunologische Reaktionen nachgewiesen werden können. Die Übertragung kann auf unterschiedliche Weise durchgeführt werden: mittels Diffusion, Kapillarwirkung oder Elektrophorese. Anwendung findet der Western Blot in der biochemischen und medizinischen Forschung sowie in der Diagnostik, wodurch er zu den meistverwendeten proteinanalytischen Methoden gezählt wird. Der Western Blot gehört zur Gruppe der Immunblots. (de) Proteina trimoo (P-trimoo) estas uzata por detekti proteinon specifan en samplo helpe de antikorpoj specifaj al tiu proteino. Tiu tekniko ankaŭ provizas informojn pri la grandeco de la proteino. (eo) Blot Western adalah sebuah metode untuk mendeteksi protein pada sampel jaringan. Imunoblot menggunakan elektroforesis gel untuk memisahkan protein asli atau perubahan oleh jarak polipeptida atau oleh struktur 3-D protein. Protein tersebut dikirim ke membran, di mana mereka dideteksi menggunakan antibodi untuk menargetkan protein. (in) ウェスタンブロッティング (Western blotting; WB) は電気泳動によって分離したタンパク質を膜に転写し、任意のタンパク質に対する抗体でそのタンパク質の存在を検出する手法。別名ウェスタンブロット法(Western blot analysis)。サザンブロッティング（南）、ノーザンブロッティング（北）の流れから、半ばジョークで命名されている（ちなみに様々な手法に「イースタン」と名付けられているが、確立したものはない）。前二者は核酸どうしの相補性を利用しているが、本法は抗体の特異性によって目的のタンパク質分子を区別している。よってイムノブロット (immunoblot; IB) とも呼ばれる。生命科学の研究者の間では、単に「ウェスタン」といえばこれを指す。 (ja) 웨스턴 블롯(영어: western blot) 또는 단백질 면역 블롯(영어: protein immunoblot)은 샘플에서 특정 단백질을 검출하기 위해 사용하는 분자생물학 기술이다. 웨스턴 블롯의 방법은 다음과 같다. 먼저 샘플들을 단백질 변성 후 젤 전기 영동을 거친다. 그 후 전달 과정을 거쳐 막에 단백질을 이동시킨 뒤, 1차 항체와 2차 항체에 노출시킨다. 1차 항체는 단백질이 항원이 되고, 2차 항체는 1차 항체가 항원이 되는 원리를 이용한다. 이렇게 결합된 2차 항체는 염색, 면역 형광법, 방사능 등을 이용하여 표적 단백질을 간접적으로 확인할 수 있다. 다른 관련 기술로는 도트 블롯 분석, 정량적 도트 블롯, 면역조직화학, 면역세포화학이 있다. 항체는 면역 염색을 통해 조직과 세포의 단백질을 검출하는 데 사용되며 효소결합면역흡착검사(ELISA)가 있다. 웨스턴 블롯이라는 이름은 영국의 생물학자 에드윈 서던의 이름을 따서 만들어졌다. 그는 DNA 검출 기술인 서던 블랏을 개발했는데, 이는 동(East), 서(West), 남(South), 북(North)를 이용하여 이름이 정해졌다. (ko) Western blot, western blotting, immunoblotting – metoda stosowana w biologii molekularnej służąca do wykrywania określonych białek. Technika ta obejmuje przygotowanie próbek z mieszaniną białek, elektroforezę, przeniesienie rozdzielonych białek z żelu na membranę, inkubację z odpowiednimi przeciwciałami i detekcję pożądanego białka. (pl) Een western blot is een biochemische techniek waarmee een specifiek eiwit in een mengsel van eiwitten door middel van antilichamen gedetecteerd kan worden. In het algemeen worden de eiwitten in het eiwitmengsel (bijvoorbeeld een cel) eerst gescheiden op basis van hun grootte of beter gezegd, moleculair gewicht door middel van een SDS-PAGE (gel-elektroforese). Vervolgens worden de eiwitten die gescheiden zijn op grootte van de gel "overgebracht" naar een nitrocellulose- of PVDF-membraan waar ze vervolgens aan hechten. Dit proces wordt blotten genoemd. De Western Blot wordt gebruikt in biochemisch en medisch onderzoek en in diagnostiek. De Western Blot behoort tot de groep van de . (nl) Western blot, WB, även immunoblot, är en vanlig molekylärbiologisk metod som används inom proteinkemin för att detektera och identifiera specifika proteiner med hjälp av antikroppar. Western blot används i princip vid alla laboratorier som bedriver biomedicinsk och biomolekylär forskning, men även vid klinisk medicinsk diagnostik i vissa sammanhang. Termen är bildad i analogi med Southern blot, som är en liknande metod för att detektera DNA. (sv) Вестерн-блот (англ. Western blot) — лабораторний метод, який ґрунтується на реакції антиген—антитіло і застосовується для визначення специфічних протеїнів в екстрактах клітин або тканин, попередньо фракціонованих за допомогою гелевого електрофорезу та перенесені, в переважній більшості випадків, на нітроцелюлозну або PVDF-мембрану. Трансфер протеїнів із гелю на мембрану дозволяє інкубувати їх з певним антитілом та виконати подальшу візуалізацію отриманих бендів. Інколи цей метод називають імунний блотинг. (uk) 西方墨點法（英語：Western blot）或稱「蛋白質轉漬法」、「免疫墨點法」（immunoblot）或「西式吸印雜交」，是在分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，也是HIV檢測的方法之一。 利用特定抗體能夠專一結合其抗原蛋白質的原理來對樣品進行着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息，來分析檢測特定蛋白質的生物學檢測技術。 发明者一般认为是美国斯坦福大学的乔治·斯塔克（George Stark）。在尼尔·伯奈特（Neal Burnette）于1981年所著的《分析生物化学》（Analytical Biochemistry）中首次被称为“Western印迹法”。 (zh) في التقنيات الحيوية، لطخة ويسترن (بالإنجليزية: Western Blot) (تعرف أيضا باللطخة المناعية Immunoblot) هي طريقة اكتشاف بروتين معين في عينة أو مستخلص أنسجة، وهي من التقنيات الحيوية المخبرية. تستخدم الفصل الكهربائي للهلام لفصل البروتينات الطبيعية native proteins أو denatured proteins حسب طول السلاسل البروتينية (ظروف مفككة) أو حسب الشكل الثلاثي الأبعاد للبروتين (ظروف قومية/غير مفككة). يتم، في ما بعد، نقل البروتينات إلى غشاء (عادة ما يكون الغشاء مصنوعا من مادة النيتروسيليلوز أو ثنائي فلوريد متعدد الفينيليدين)، حيث يتم التحقق (الاكتشاف) باستخدام أضداد مخصصة للبروتين الهدف. هناك الآن العديد من شركات المواد التي تتخصص في تجهيز أضداد (مستنسخة ومتعددة النسائل) ضد آلاف البروتينات المختلفة. وقد قام هذا بتقليل الوقت الذي تحتاجه لعمل لطخة بصورة كبيرة. (ar) El western blot (de vegades anomenat proteïna immunoblot ), o western blot, és una tècnica analítica àmpliament utilitzada en biologia molecular i immunogenètica per a detectar proteïnes específiques en una mostra d'homogeneïtzació o extracte de teixits. Altres tècniques relacionades inclouen l'anàlisi de transferència de punts, la transferència quantitativa de punts, la immunohistoquímica i la immunocitoquímica, on s'utilitzen anticossos per detectar proteïnes en teixits i cèl·lules mitjançant immunotinció i assaig d'immunosorbents lligats a enzims (ELISA). (ca) Western blot (v české literatuře též označovaný jako imunoblot) je analytická technika používaná k detekci specifického proteinu ve směsi s dalšími proteiny, např. ve vzorku homogenátu tkáně či jiného biologického vzorku. Využívá gelovou elektroforézu k separaci proteinů podle jejich velikosti (denaturující SDS-PAGE), popř. podle jejich celkové trojrozměrné struktury (nativní elektroforéza). Následně jsou proteiny přeneseny („přeblotovány“) z gelu na povrch membrány (nejčastěji nitrocelulosové či ), na jejímž povrchu jsou detekovány specifickými protilátkami. (cs) El Western blot, inmunoblot o electrotransferencia, es una técnica analítica usada en biología celular y molecular para identificar proteínas específicas en una mezcla compleja de proteínas, tal como la que se presenta en extractos celulares o de tejidos. La técnica utiliza tres etapas para lograr esto: separación por tamaño, transferencia a un soporte sólido y, finalmente, visualización mediante la marcación de proteínas con el uso de anticuerpos primarios o secundarios apropiados. (es) Le western blot (également appelé transfert de protéines ou buvardage de western ou encore technique des immuno-empreintes), est une méthode de biologie moléculaire permettant la détection et l'identification de protéines spécifiques dans un échantillon biologique (sérum ou autre extrait ou tissulaire) à l'aide d'anticorps dirigés contre ces protéines que l'on souhaite détecter. Le western blot permet ainsi de visualiser des protéines particulières dans un mélange complexe. C'est l'une des techniques analytiques de transfert sur membrane utilisées en biochimie et en biologie moléculaire. (fr) Il western blot o immunoblot è una tecnica biochimica che permette di identificare una determinata proteina in una miscela di proteine, mediante il riconoscimento da parte di anticorpi specifici; in generale, per facilitare il riconoscimento, la miscela di proteine viene prima separata in base alle loro dimensioni (o peso molecolare) utilizzando un gel di poliacrilammide (ma esistono variazioni quali il dot blot o slot blot, in cui la miscela proteica non viene separata in base alle dimensioni, ma ci si affida alla selettività antigene/anticorpo); successivamente le proteine vengono trasferite su un supporto, che comunemente è una membrana di nitrocellulosa, e quindi si procede al riconoscimento vero e proprio della proteina mediante l'utilizzo di un anticorpo specifico. (it) The western blot (sometimes called the protein immunoblot), or western blotting, is a widely used analytical technique in molecular biology and immunogenetics to detect specific proteins in a sample of tissue homogenate or extract. Other related techniques include dot blot analysis, quantitative dot blot, immunohistochemistry and immunocytochemistry, where antibodies are used to detect proteins in tissues and cells by immunostaining, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). (en) O western blot (por vezes chamado imunoblot de proteínas ou transferência western) é um método em biologia molecular e bioquímica para detectar proteínas numa amostra de homogenato (células bem trituradas) de tecidos biológicos ou estratos. Essa técnica usa eletroforese em gel para separar as proteínas nativas pela sua estrutura tridimensional ou proteínas desnaturalizadas pelo comprimento da sua cadeia polipeptídica. As proteínas são então transferidas do gel para uma membrana (tipicamente de nitrocelulose ou PVDF), sendo uma técnica de ou transferência. Uma vez na membrana são usados como sonda anticorpos específicos para a proteína alvo. A passagem de electroforese em gel é incluída nas análises de western blot para resolver o problema da dos anticorpos. Como resultado, os pesquisador (pt) Вестерн-блоттинг (вестерн-блот, белковый иммуноблот, англ. Western blot) — аналитический метод, используемый для определения в образце специфичных белков. На первом этапе используют электрофорез белков в полиакриламидном геле для разделения денатурированных полипептидов по длине (как правило, в присутствии SDS) или по трехмерной структуре белка (в нативном состоянии). Далее белки переносят на нитроцеллюлозную или PVDF-мембрану, затем детектируют с использованием антител, специфичных к заданному белку. (ru) |
| rdfs:label | لطخة ويسترن (ar) Western blot (ca) Western blot (cs) Western Blot (de) Proteina trimoo (eo) Western blot (es) Western blot (fr) Blot Western (in) Western blot (it) 웨스턴 블랏 (ko) ウェスタンブロッティング (ja) Western blot (pl) Western blot (nl) Western blot (pt) Western blot (sv) Вестерн-блот (ru) Western blot (en) 西方墨點法 (zh) Вестерн-блот (uk) |
| owl:differentFrom | dbr:Western_Bloc |
| owl:sameAs | dbpedia-ca:Western blot dbpedia-de:Western blot dbpedia-eo:Western blot dbpedia-es:Western blot dbpedia-fr:Western blot dbpedia-hu:Western blot dbpedia-it:Western blot dbpedia-ja:Western blot dbpedia-pt:Western blot dbpedia-sv:Western blot dbpedia-tr:Western blot http://ur.dbpedia.org/resource/لطخۂ_مغرب freebase:Western blot yago-res:Western blot wikidata:Western blot dbpedia-ar:Western blot http://bs.dbpedia.org/resource/Western_blot dbpedia-cs:Western blot dbpedia-et:Western blot dbpedia-fa:Western blot dbpedia-gl:Western blot dbpedia-he:Western blot dbpedia-id:Western blot dbpedia-ko:Western blot dbpedia-nl:Western blot dbpedia-no:Western blot dbpedia-pl:Western blot dbpedia-ro:Western blot dbpedia-ru:Western blot dbpedia-simple:Western blot dbpedia-sr:Western blot http://ta.dbpedia.org/resource/வெசுட்டர்ன்_படிவு dbpedia-uk:Western blot dbpedia-zh:Western blot https://global.dbpedia.org/id/4WkZP |
| skos:closeMatch | http://www.springernature.com/scigraph/things/subjects/immunoblotting http://www.springernature.com/scigraph/things/subjects/western-blot |
| prov:wasDerivedFrom | wikipedia-en:Western_blot?oldid=1124657111&ns=0 |
| foaf:depiction | wiki-commons:Special:FilePath/SDS-PAGE_Electrophoresis.png wiki-commons:Special:FilePath/Anti-lipoic_acid_immunoblot.png wiki-commons:Special:FilePath/Blotautoradiogram.png wiki-commons:Special:FilePath/Western_Blot_binding.png wiki-commons:Special:FilePath/Western_blot_chemiluminescent_detection.png wiki-commons:Special:FilePath/Western_blot_transfer.png |
| foaf:isPrimaryTopicOf | wikipedia-en:Western_blot |
| is dbo:medicalDiagnosis of | dbr:Anti-Hu_associated_encephalitis |
| is dbo:wikiPageDisambiguates of | dbr:Western dbr:WB |
| is dbo:wikiPageRedirects of | dbr:Western_Blot dbr:Blotting,_western dbr:Immunoblot dbr:Immunoblot_assay dbr:Immunoblotting dbr:Recombinant_immunoblot_assay dbr:Western-Blot dbr:Western_analysis dbr:Western_blot_analysis dbr:Western_blotting dbr:Western_immunoblot dbr:Westernblot |
| is dbo:wikiPageWikiLink of | dbr:Cassava_Sciences dbr:Protein_methods dbr:Epitope dbr:FANCE dbr:Powdered_milk dbr:Morpholino dbr:Transcription_factories dbr:BioLegend dbr:Borrelia dbr:Anti-Hu_associated_encephalitis dbr:Anti-immunoglobulin dbr:Aptamer dbr:Reverse_phase_protein_lysate_microarray dbr:Cyanothece dbr:C20orf27 dbr:De_novo_gene_birth dbr:Deficiency_of_RbAp48_protein_and_memory_loss dbr:Dot_blot dbr:Eastern_blot dbr:Index_of_HIV/AIDS-related_articles dbr:Index_of_genetics_articles dbr:Index_of_molecular_biology_articles dbr:India_ink dbr:Induced_cell_cycle_arrest dbr:Influenza_C_virus dbr:Influenza_D_virus dbr:Ligand_binding_assay dbr:GAS1 dbr:List_of_research_methods_in_biology dbr:O-GlcNAc dbr:Nucleic_acid_thermodynamics dbr:Proteome dbr:Proteomics dbr:Prp8 dbr:Northern_blot dbr:Northwestern_blot dbr:Timeline_of_HIV/AIDS dbr:Western_blot_normalization dbr:Meir_Wilchek dbr:Chemiluminescence dbr:Chemoproteomics dbr:Gel_electrophoresis dbr:Gel_electrophoresis_of_proteins dbr:Gene_expression dbr:Gene_expression_profiling dbr:Genetic_engineering_techniques dbr:PSMB6 dbr:Strep-tag dbr:Rabbit_hybridoma dbr:Wall-associated_kinase dbr:Edwin_Southern dbr:Elisabeth_Bik dbr:Epicocconone dbr:Functional_cloning dbr:Genetic_engineering dbr:George_Stark dbr:Glycine dbr:Monoclonal_antibody dbr:Blocking dbr:LI-COR_Biosciences dbr:Antibody dbr:Aplastic_anemia dbr:Apoptosis dbr:Levamisole dbr:Luminol dbr:Lyme_disease dbr:Calcium_channel_blocker dbr:Streptavidin dbr:Cloud_laboratory dbr:Horseradish_peroxidase dbr:Journal_of_Cell_Biology dbr:Proventricular_dilatation_disease dbr:Proximity_ligation_assay dbr:SDS-PAGE dbr:Neurofibrillary_tangle dbr:Tris-buffered_saline dbr:Microbiologically_induced_calcite_precipitation dbr:NCR3 dbr:Primary_and_secondary_antibodies dbr:Muscle–eye–brain_disease dbr:Scientific_plagiarism_in_India dbr:Veterinary_parasitology dbr:BTSB_anti-D_scandal dbr:Actin dbr:Cetrimonium_bromide dbr:Western_Blot dbr:Galit_Lahav dbr:HIV dbr:HIV/AIDS_denialism dbr:Heat_stabilization dbr:Linear_epitope dbr:Taenia_solium dbr:Alcian_blue_stain dbr:Amido_black_10B dbr:Ammonium_persulfate dbr:Bartonellosis dbr:Nitrocellulose dbr:Diagnosis_of_HIV/AIDS dbr:Diagnostic_microbiology dbr:Dipak_K._Das dbr:Far-western_blot dbr:Fasciola_hepatica dbr:Fasciolosis dbr:Fast_parallel_proteolysis dbr:Glutamate-rich_protein_3 dbr:Glutamate_receptor dbr:Glyceraldehyde_3-phosphate_dehydrogenase dbr:Gnathostomiasis dbr:Molecular_cloning dbr:Transcription_factor dbr:Recombinant_DNA dbr:Riba_(disambiguation) dbr:Robert_Rayford dbr:Hepatitis_C dbr:Survivin dbr:Trypanosoma_cruzi dbr:Armed_Forces_Radiobiology_Research_Institute dbr:Chagas_disease dbr:Checkpoint_(rapid_HIV_testing_facility) dbr:L-Photo-leucine dbr:L-Photo-methionine dbr:Biotinylation dbr:Blood_test dbr:Blot_(biology) dbr:Blotto_(biology) dbr:Sylvain_Lesné dbr:Echinococcus dbr:Hepatitis_C_and_HIV_coinfection dbr:Western dbr:Real-time_quaking-induced_conversion dbr:Autoimmune_retinopathy dbr:Avidin dbr:Phenotype dbr:Polyacrylamide_gel_electrophoresis dbr:Polysorbate_20 dbr:Polyvinylidene_fluoride dbr:Ponceau_S dbr:Group-specific_antigen dbr:Human_Proteinpedia dbr:Image_Studio_Lite dbr:Michael_Rosbash dbr:Rabbit_hemorrhagic_disease dbr:Western_Bloc dbr:Lysis_buffer dbr:Soluble_NSF_attachment_protein dbr:WB dbr:SLC46A3 dbr:Exosome_(vesicle) dbr:Extractable_nuclear_antigen dbr:Ccdc60 dbr:Immunohistochemistry dbr:Immunoprecipitation dbr:Immunoproteomics dbr:Live_single-cell_imaging dbr:Venomous_fish dbr:Surface-enhanced_laser_desorption/ionization dbr:Plant_development dbr:TBC1D30 dbr:Molecular_biology dbr:Monocarboxylate_transporter_4 dbr:Photo-reactive_amino_acid_analog dbr:Photoinhibition dbr:Polyclonal_B_cell_response dbr:Thermal_shift_assay dbr:Phenylalanine_hydroxylase dbr:Theanne_Griffith dbr:Outline_of_genetics dbr:P3_peptide dbr:PKM2 dbr:Terry_Elton dbr:Rickettsia_typhi dbr:Small_humanin-like_peptide dbr:WHO_model_list_of_essential_in_vitro_diagnostics dbr:Southern_blot dbr:Blotting,_western dbr:Immunoblot dbr:Immunoblot_assay dbr:Immunoblotting dbr:Recombinant_immunoblot_assay dbr:Western-Blot dbr:Western_analysis dbr:Western_blot_analysis dbr:Western_blotting dbr:Western_immunoblot dbr:Westernblot |
| is dbp:diagnosis of | dbr:Anti-Hu_associated_encephalitis |
| is foaf:primaryTopic of | wikipedia-en:Western_blot |
